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疫霉菌Avr3a家族效应蛋白保守靶标CAD7的鉴定与功能研究

摘要第5-7页
abstract第7-9页
第一章 文献综述第13-33页
    1.1 植物与病原菌互作的分子机制第13-16页
        1.1.1 PAMP分子激发的植物免疫反应第14页
        1.1.2 效应蛋白激发的植物免疫反应第14-16页
    1.2 植物病原菌效应蛋白的研究进展第16-23页
        1.2.1 植物病原菌及其效应蛋白第16-17页
        1.2.2 植物病原卵菌效应蛋白的研究进展第17-20页
        1.2.3 植物病原真菌效应蛋白的研究进展第20-22页
        1.2.4 植物病原细菌效应蛋白的研究进展第22-23页
    1.3 疫霉菌生物学及其Avr3a效应蛋白家族第23-27页
        1.3.1 疫霉菌的危害第23-24页
        1.3.2 疫霉菌的生活史第24页
        1.3.3 疫霉菌的Avr3a效应蛋白家族第24-27页
    1.4 植物的苯丙氨酸代谢通路第27-30页
        1.4.1 苯丙氨酸代谢通路概述第27页
        1.4.2 木质素的生物合成通路第27-30页
        1.4.3 木质素的生物学功能第30页
    1.5 植物CAD家族基因的研究进展第30-32页
    1.6 本研究的目的意义第32-33页
第二章 疫霉菌Avr3a家族效应蛋白靶标的筛选与鉴定第33-50页
    2.1 实验材料第33页
        2.1.1 菌株第33页
        2.1.2 质粒第33页
        2.1.3 培养基第33页
    2.2 实验方法第33-41页
        2.2.1 酵母双杂交第33-38页
        2.2.2 双分子荧光互补第38-40页
        2.2.3 免疫共沉淀第40-41页
    2.3 结果与分析第41-48页
        2.3.1 Avr3a家族效应蛋白互作蛋白的筛选第41-42页
        2.3.2 Avr3a家族效应蛋白保守互作蛋白的鉴定第42-43页
        2.3.3 Avr3a家族效应蛋白保守靶标CAD7的确认第43-47页
        2.3.4 拟南芥CAD家族蛋白与Avr3a家族效应蛋白的互作网络第47-48页
    2.4 讨论第48-50页
第三章 Avr3a家族效应蛋白植物靶标CAD7的功能分析第50-79页
    3.1 实验材料第50-51页
        3.1.1 菌株第50页
        3.1.2 质粒第50页
        3.1.3 植物第50页
        3.1.4 培养基第50-51页
    3.2 实验方法第51-59页
        3.2.1 载体构建第51-54页
        3.2.2 转基因拟南芥的制备第54-55页
        3.2.3 病毒诱导的基因沉默第55页
        3.2.4 植物接菌测试第55-56页
        3.2.5 实时荧光定量PCR第56-59页
        3.2.6 GUS染色第59页
        3.2.7 台盼蓝染色第59页
    3.3 结果与分析第59-76页
        3.3.1 CAD7亚家族在植物基因组中高度保守且迅速扩张第59-61页
        3.3.2 拟南芥CAD家族基因在疫霉菌侵染中差异表达第61-65页
        3.3.3 沉默CAD7减少了疫霉菌在寄主植物中的定殖第65-70页
        3.3.4 过表达CAD7促进了疫霉菌对寄主植物的侵染第70-72页
        3.3.5 CAD7抑制INF1引发的植物细胞坏死第72-74页
        3.3.6 CAD7参与了R3a和Avr3a的识别第74-76页
    3.4 讨论第76-79页
第四章 Avr3a家族效应蛋白与CAD7互作机制的初探第79-90页
    4.1 实验材料第79页
        4.1.1 菌株第79页
        4.1.2 质粒第79页
        4.1.3 植物第79页
    4.2 实验方法第79-82页
        4.2.1 载体构建第79-80页
        4.2.2 植物及微生物操作第80-81页
        4.2.3 木质素染色第81页
        4.2.4 Western Blot第81-82页
    4.3 结果与分析第82-88页
        4.3.1 拟南芥CAD7与Avr3a家族效应蛋白互作关键结构域的探究第82-83页
        4.3.2 拟南芥CAD7与Avr3a家族效应蛋白互作关键酶活位点的探究第83-84页
        4.3.3 拟南芥CAD7对植物防卫反应的负调控与其酶活性无关第84-86页
        4.3.4 过表达AtCAD7不影响拟南芥茎部木质素含量第86-87页
        4.3.5 Avr3a家族效应蛋白可增加CAD7的蛋白累积量第87-88页
    4.4 讨论第88-90页
第五章 结论与创新点第90-92页
    5.1 结论第90-91页
    5.2 创新点第91-92页
参考文献第92-113页
致谢第113-114页
作者简介第114页

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