摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-9页 |
第一章 文献综述 | 第13-33页 |
1.1 植物与病原菌互作的分子机制 | 第13-16页 |
1.1.1 PAMP分子激发的植物免疫反应 | 第14页 |
1.1.2 效应蛋白激发的植物免疫反应 | 第14-16页 |
1.2 植物病原菌效应蛋白的研究进展 | 第16-23页 |
1.2.1 植物病原菌及其效应蛋白 | 第16-17页 |
1.2.2 植物病原卵菌效应蛋白的研究进展 | 第17-20页 |
1.2.3 植物病原真菌效应蛋白的研究进展 | 第20-22页 |
1.2.4 植物病原细菌效应蛋白的研究进展 | 第22-23页 |
1.3 疫霉菌生物学及其Avr3a效应蛋白家族 | 第23-27页 |
1.3.1 疫霉菌的危害 | 第23-24页 |
1.3.2 疫霉菌的生活史 | 第24页 |
1.3.3 疫霉菌的Avr3a效应蛋白家族 | 第24-27页 |
1.4 植物的苯丙氨酸代谢通路 | 第27-30页 |
1.4.1 苯丙氨酸代谢通路概述 | 第27页 |
1.4.2 木质素的生物合成通路 | 第27-30页 |
1.4.3 木质素的生物学功能 | 第30页 |
1.5 植物CAD家族基因的研究进展 | 第30-32页 |
1.6 本研究的目的意义 | 第32-33页 |
第二章 疫霉菌Avr3a家族效应蛋白靶标的筛选与鉴定 | 第33-50页 |
2.1 实验材料 | 第33页 |
2.1.1 菌株 | 第33页 |
2.1.2 质粒 | 第33页 |
2.1.3 培养基 | 第33页 |
2.2 实验方法 | 第33-41页 |
2.2.1 酵母双杂交 | 第33-38页 |
2.2.2 双分子荧光互补 | 第38-40页 |
2.2.3 免疫共沉淀 | 第40-41页 |
2.3 结果与分析 | 第41-48页 |
2.3.1 Avr3a家族效应蛋白互作蛋白的筛选 | 第41-42页 |
2.3.2 Avr3a家族效应蛋白保守互作蛋白的鉴定 | 第42-43页 |
2.3.3 Avr3a家族效应蛋白保守靶标CAD7的确认 | 第43-47页 |
2.3.4 拟南芥CAD家族蛋白与Avr3a家族效应蛋白的互作网络 | 第47-48页 |
2.4 讨论 | 第48-50页 |
第三章 Avr3a家族效应蛋白植物靶标CAD7的功能分析 | 第50-79页 |
3.1 实验材料 | 第50-51页 |
3.1.1 菌株 | 第50页 |
3.1.2 质粒 | 第50页 |
3.1.3 植物 | 第50页 |
3.1.4 培养基 | 第50-51页 |
3.2 实验方法 | 第51-59页 |
3.2.1 载体构建 | 第51-54页 |
3.2.2 转基因拟南芥的制备 | 第54-55页 |
3.2.3 病毒诱导的基因沉默 | 第55页 |
3.2.4 植物接菌测试 | 第55-56页 |
3.2.5 实时荧光定量PCR | 第56-59页 |
3.2.6 GUS染色 | 第59页 |
3.2.7 台盼蓝染色 | 第59页 |
3.3 结果与分析 | 第59-76页 |
3.3.1 CAD7亚家族在植物基因组中高度保守且迅速扩张 | 第59-61页 |
3.3.2 拟南芥CAD家族基因在疫霉菌侵染中差异表达 | 第61-65页 |
3.3.3 沉默CAD7减少了疫霉菌在寄主植物中的定殖 | 第65-70页 |
3.3.4 过表达CAD7促进了疫霉菌对寄主植物的侵染 | 第70-72页 |
3.3.5 CAD7抑制INF1引发的植物细胞坏死 | 第72-74页 |
3.3.6 CAD7参与了R3a和Avr3a的识别 | 第74-76页 |
3.4 讨论 | 第76-79页 |
第四章 Avr3a家族效应蛋白与CAD7互作机制的初探 | 第79-90页 |
4.1 实验材料 | 第79页 |
4.1.1 菌株 | 第79页 |
4.1.2 质粒 | 第79页 |
4.1.3 植物 | 第79页 |
4.2 实验方法 | 第79-82页 |
4.2.1 载体构建 | 第79-80页 |
4.2.2 植物及微生物操作 | 第80-81页 |
4.2.3 木质素染色 | 第81页 |
4.2.4 Western Blot | 第81-82页 |
4.3 结果与分析 | 第82-88页 |
4.3.1 拟南芥CAD7与Avr3a家族效应蛋白互作关键结构域的探究 | 第82-83页 |
4.3.2 拟南芥CAD7与Avr3a家族效应蛋白互作关键酶活位点的探究 | 第83-84页 |
4.3.3 拟南芥CAD7对植物防卫反应的负调控与其酶活性无关 | 第84-86页 |
4.3.4 过表达AtCAD7不影响拟南芥茎部木质素含量 | 第86-87页 |
4.3.5 Avr3a家族效应蛋白可增加CAD7的蛋白累积量 | 第87-88页 |
4.4 讨论 | 第88-90页 |
第五章 结论与创新点 | 第90-92页 |
5.1 结论 | 第90-91页 |
5.2 创新点 | 第91-92页 |
参考文献 | 第92-113页 |
致谢 | 第113-114页 |
作者简介 | 第114页 |