摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第10-22页 |
1.1 铜绿假单胞菌概述 | 第10-13页 |
1.1.1 铜绿假单胞菌的病理学特征 | 第11-12页 |
1.1.2 铜绿假单胞菌T3SS的研究现状 | 第12-13页 |
1.2 铜绿假单胞菌的检测方法 | 第13-17页 |
1.2.1 传统的细菌培养法 | 第13-14页 |
1.2.2 酶联免疫吸附法 | 第14页 |
1.2.3 传统的PCR方法 | 第14-15页 |
1.2.4 实时荧光定量PCR | 第15页 |
1.2.5 多重PCR | 第15-16页 |
1.2.6 电化学分析方法 | 第16-17页 |
1.3 磁性纳米材料概述 | 第17-18页 |
1.3.1 Fe_3O_4磁珠 | 第17页 |
1.3.2 Fe_3O_4磁性纳米粒子的应用研究进展 | 第17-18页 |
1.4 化学发光检测新方法的研究进展 | 第18-19页 |
1.4.1 化学发光技术简介 | 第18页 |
1.4.2 磁性纳米颗粒在化学发光检测中的应用 | 第18-19页 |
1.4.3 AuNP在化学发光检测中的应用 | 第19页 |
1.5 本研究的内容及意义 | 第19页 |
1.6 本论文组织构架 | 第19-22页 |
第二章 基于磁分离的快速高质量基因组DNA提取试剂盒的开发 | 第22-32页 |
2.1 引言 | 第22页 |
2.2 实验材料与方法 | 第22-25页 |
2.2.1 实验样本 | 第22-23页 |
2.2.2 实验试剂与仪器 | 第23-24页 |
2.2.3 实验方法 | 第24-25页 |
2.3 结果与讨论 | 第25-30页 |
2.3.1 磁珠法提取铜绿假单胞菌基因组DNA及PCR验证 | 第25-26页 |
2.3.2 磁珠粒径对核酸提取效果的影响 | 第26-27页 |
2.3.3 磁珠表面基团对核酸提取能力的影响 | 第27-28页 |
2.3.4 样本裂解时间对核酸提取效果的影响 | 第28页 |
2.3.5 核酸提取率的考察以及商用产品的比较 | 第28-30页 |
2.4 本章小结 | 第30-32页 |
第三章 铜绿假单胞菌T3SS基因型磁富集多重PCR的建立 | 第32-40页 |
3.1 引言 | 第32页 |
3.2 材料与方法 | 第32-35页 |
3.2.1 实验样本 | 第32页 |
3.2.2 实验试剂与仪器 | 第32-34页 |
3.2.3 实验方法 | 第34-35页 |
3.3 结果与讨论 | 第35-38页 |
3.3.1 四种引物的验证及退火温度优化 | 第35-36页 |
3.3.2 引物比例的优化和多重PCR扩增体系的建立 | 第36-37页 |
3.3.3 磁富集多重PCR的确立以及PCR的生物素标记 | 第37-38页 |
3.4 本章小结 | 第38-40页 |
第四章 基于磁分离和化学发光的铜绿假单胞菌T3SS基因分型研究 | 第40-48页 |
4.1 引言 | 第40页 |
4.2 材料与方法 | 第40-43页 |
4.2.1 实验样本 | 第40页 |
4.2.2 实验试剂与仪器 | 第40-41页 |
4.2.3 实验方法 | 第41-43页 |
4.3 结果与讨论 | 第43-46页 |
4.3.1 化学发光检测方法的优化 | 第43-44页 |
4.3.2 铜绿假单胞菌标准菌株T3SS分型 | 第44-45页 |
4.3.3 临床实际铜绿假单胞菌样本的检测 | 第45-46页 |
4.4 本章小结 | 第46-48页 |
第五章 总结与展望 | 第48-50页 |
5.1 总结 | 第48-49页 |
5.2 展望 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
硕士期间发表论文 | 第56-57页 |
致谢 | 第57页 |