致谢 | 第6-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
缩略语表 | 第11-15页 |
1 绪论 | 第15-36页 |
1.1 中国桃种质资源分布 | 第15-16页 |
1.1.1 中国桃的地理分布及品种群的划分 | 第15-16页 |
1.1.2 中国桃种质资源和过敏蛋白测定品种的选择 | 第16页 |
1.2 水果过敏和水果过敏原 | 第16-28页 |
1.2.1 过敏的定义及水果过敏的临床表现 | 第17页 |
1.2.2 水果过敏反应发生机理 | 第17-18页 |
1.2.3 水果过敏原的分类及其理化性质 | 第18-28页 |
1.3 桃过敏研究现状 | 第28-34页 |
1.3.1 桃主要过敏原脂质转移蛋白的研究现状 | 第31-32页 |
1.3.2 桃与其它物种中非特异性脂质转移蛋白致敏模式 | 第32-34页 |
1.4 研究意义 | 第34-35页 |
1.5 研究内容和技术路线 | 第35-36页 |
1.5.1 研究内容 | 第35页 |
1.5.2 技术路线 | 第35-36页 |
2 nPru p 3标准品制备和双单抗ELISA检测方法建立 | 第36-50页 |
2.1 材料与方法 | 第36-38页 |
2.1.1 实验材料 | 第36页 |
2.1.2 试剂配制 | 第36-37页 |
2.1.3 实验仪器 | 第37-38页 |
2.2 天然Pru p 3纯化制备 | 第38-41页 |
2.2.1 '湖景蜜露'果皮总蛋白提取 | 第38页 |
2.2.2 纯化前样品处理 | 第38-39页 |
2.2.3 离子交换层析纯化桃过敏原 | 第39-40页 |
2.2.4 纯化得到的Prup3蛋白浓度测定 | 第40-41页 |
2.3 双单抗夹心ELISA | 第41-44页 |
2.3.1 抗体的生物素标记 | 第41-42页 |
2.3.2 桃抗体效价测定 | 第42-43页 |
2.3.3 Pru p 3蛋白标准曲线的建立 | 第43-44页 |
2.4 结果与分析 | 第44-47页 |
2.4.1 '湖景蜜露'果皮粗提物处理结果 | 第44-45页 |
2.4.2 Pru p 3纯化结果及Prup 3的定量结果 | 第45页 |
2.4.3 桃B10-5和Bio-4-1抗体效价 | 第45-46页 |
2.4.4 桃Prup 3蛋白标准曲线的确定 | 第46-47页 |
2.5 讨论 | 第47-49页 |
2.5.1 桃蛋白粗提蛋白和纯化蛋白定量方法的选择 | 第47页 |
2.5.2 桃双夹心ELISA抗体的长久保存方法 | 第47-49页 |
2.6 本章小结 | 第49-50页 |
3 基于双夹心ELISA定量不同桃品种中LTP的含量 | 第50-72页 |
3.1 材料与方法 | 第50-56页 |
3.1.1 实验材料 | 第50-55页 |
3.1.2 试剂配制 | 第55页 |
3.1.3 不同桃品种总蛋白提取 | 第55页 |
3.1.4 双夹心ELISA的精确度、准确性和重复性的验证和抗体效价的检测 | 第55页 |
3.1.5 不同桃品种Pru p 3含量的测定 | 第55-56页 |
3.2 结果与分析 | 第56-69页 |
3.2.1 精密度、准确性和重复性 | 第56页 |
3.2.2 同一桃品种不同成熟期桃整果中Pru p 3含量比较 | 第56-58页 |
3.2.3 同一桃品种2014年和2015年Pru p 3含量比较 | 第58-60页 |
3.2.4 野生桃、地方桃、油桃、栽培品种Pru p 3含量比较 | 第60-64页 |
3.2.5 不同桃品种中果皮、果肉和整果的比较 | 第64页 |
3.2.6 冷害对桃果实中Prup 3的影响 | 第64-69页 |
3.3 讨论 | 第69-71页 |
3.3.1 如何利用双夹心ELISA准确评估大量桃品种中Pru p 3含量 | 第69页 |
3.3.2 桃果实中Prup 3变异规律讨论 | 第69-71页 |
3.4 本章小结 | 第71-72页 |
4 结论与展望 | 第72-73页 |
附图 | 第73-77页 |
参考文献 | 第77-88页 |
作者简历及在学期间的科研成果 | 第88页 |