摘要 | 第2-3页 |
Abstract | 第3页 |
引言 | 第6-8页 |
第一章 实验材料 | 第8-10页 |
1.1 细胞株 | 第8页 |
1.2 主要试剂和材料 | 第8-9页 |
1.3 主要仪器设备 | 第9-10页 |
第二章 实验方法 | 第10-15页 |
2.1 人脐静脉内皮细胞的传代培养、冻存与复苏 | 第10页 |
2.1.1 HUVECs的传代培养 | 第10页 |
2.1.2 HUVECs的冻存与复苏 | 第10页 |
2.2 实验分组与处理 | 第10-11页 |
2.2.1 ox-LDL氧化损伤模型的建立 | 第10-11页 |
2.2.2 熊果酸细胞毒性筛选 | 第11页 |
2.2.3 熊果酸预保护时间及浓度筛选 | 第11页 |
2.2.4 实验分组设计 | 第11页 |
2.3 实验方法与检测指标 | 第11-15页 |
2.3.1 熊果酸对氧化损伤后HUVECs细胞生存率的影响 | 第11-12页 |
2.3.2 3-MA及EX-527对ox-LDL损伤的HUVECs细胞生存率的影响 | 第12页 |
2.3.3 SOD、MDA、NOS、NO、H2O2测定 | 第12页 |
2.3.4 透射电镜 | 第12-13页 |
2.3.5 电子自旋共振(ESR)检测各组细胞NO及ROS释放量 | 第13页 |
2.3.6 免疫印迹法(Western Blotting)检测Sirt1、LC3B、p62、Atg5蛋白 | 第13-15页 |
2.3.7 免疫沉淀法(Immunoprecipitation, IP)检测乙酰化Atg5蛋白 | 第15页 |
2.4 统计学分析 | 第15页 |
第三章 实验结果 | 第15-26页 |
3.1 ox-LDL造模浓度的筛选结果 | 第15-16页 |
3.2 熊果酸细胞毒性的筛选结果 | 第16页 |
3.3 熊果酸预保护时间及浓度筛选 | 第16-17页 |
3.4 熊果酸对氧化损伤后HUVECs细胞生存率的影响 | 第17-18页 |
3.5 熊果酸对ox-LDL损伤的HUVECs中H2O2、SOD及MDA的影响 | 第18页 |
3.6 熊果酸对ox-LDL损伤的内皮细胞中NO及NOS的影响 | 第18-19页 |
3.7 熊果酸对ox-LDL损伤的内皮细胞自噬水平的影响 | 第19-20页 |
3.8 熊果酸对Sirt1蛋白表达的影响 | 第20-21页 |
3.9 3-MA及EX-527对ox-LDL损伤的HUVECs细胞生存率的影响 | 第21-22页 |
3.10 电子自旋共振(ESR)检测HUVECs内NO及ROS释放量 | 第22-24页 |
3.11 熊果酸通过Sirt1激活自噬保护ox-LDL损伤的HUVECs | 第24-25页 |
3.12 自噬相关基因Atg5乙酰化蛋白表达水平检测 | 第25-26页 |
第四章 讨论 | 第26-33页 |
结论 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-41页 |
综述 | 第41-58页 |
参考文献 | 第51-58页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |