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熊果酸通过SIRT1/Atg5激活自噬对ox-LDL诱导HUVECs氧化损伤的保护作用

摘要第2-3页
Abstract第3页
引言第6-8页
第一章 实验材料第8-10页
    1.1 细胞株第8页
    1.2 主要试剂和材料第8-9页
    1.3 主要仪器设备第9-10页
第二章 实验方法第10-15页
    2.1 人脐静脉内皮细胞的传代培养、冻存与复苏第10页
        2.1.1 HUVECs的传代培养第10页
        2.1.2 HUVECs的冻存与复苏第10页
    2.2 实验分组与处理第10-11页
        2.2.1 ox-LDL氧化损伤模型的建立第10-11页
        2.2.2 熊果酸细胞毒性筛选第11页
        2.2.3 熊果酸预保护时间及浓度筛选第11页
        2.2.4 实验分组设计第11页
    2.3 实验方法与检测指标第11-15页
        2.3.1 熊果酸对氧化损伤后HUVECs细胞生存率的影响第11-12页
        2.3.2 3-MA及EX-527对ox-LDL损伤的HUVECs细胞生存率的影响第12页
        2.3.3 SOD、MDA、NOS、NO、H2O2测定第12页
        2.3.4 透射电镜第12-13页
        2.3.5 电子自旋共振(ESR)检测各组细胞NO及ROS释放量第13页
        2.3.6 免疫印迹法(Western Blotting)检测Sirt1、LC3B、p62、Atg5蛋白第13-15页
        2.3.7 免疫沉淀法(Immunoprecipitation, IP)检测乙酰化Atg5蛋白第15页
    2.4 统计学分析第15页
第三章 实验结果第15-26页
    3.1 ox-LDL造模浓度的筛选结果第15-16页
    3.2 熊果酸细胞毒性的筛选结果第16页
    3.3 熊果酸预保护时间及浓度筛选第16-17页
    3.4 熊果酸对氧化损伤后HUVECs细胞生存率的影响第17-18页
    3.5 熊果酸对ox-LDL损伤的HUVECs中H2O2、SOD及MDA的影响第18页
    3.6 熊果酸对ox-LDL损伤的内皮细胞中NO及NOS的影响第18-19页
    3.7 熊果酸对ox-LDL损伤的内皮细胞自噬水平的影响第19-20页
    3.8 熊果酸对Sirt1蛋白表达的影响第20-21页
    3.9 3-MA及EX-527对ox-LDL损伤的HUVECs细胞生存率的影响第21-22页
    3.10 电子自旋共振(ESR)检测HUVECs内NO及ROS释放量第22-24页
    3.11 熊果酸通过Sirt1激活自噬保护ox-LDL损伤的HUVECs第24-25页
    3.12 自噬相关基因Atg5乙酰化蛋白表达水平检测第25-26页
第四章 讨论第26-33页
结论第33-34页
参考文献第34-41页
综述第41-58页
    参考文献第51-58页
攻读学位期间的研究成果第58-59页
致谢第59-60页

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