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三角褐指藻多不饱和脂肪酸合成相关去饱和酶的功能研究

摘要第3-4页
Abstract第4页
英文缩略词表第9-10页
第一章 绪论第10-20页
    1.1 研究背景第10-18页
        1.1.1 微藻简介第10页
        1.1.2 微藻的综合应用第10-11页
        1.1.3 微藻的遗传转化第11-13页
        1.1.4 三角褐指藻的研究第13-14页
        1.1.5 多不饱和脂肪酸的研究第14-15页
        1.1.6 脂肪酸去饱和酶的研究第15-16页
        1.1.7 多不饱和脂肪酸代谢途径的研究第16-18页
    1.2 研究目的及意义第18页
    1.3 研究内容第18页
    1.4 研究创新点第18-20页
第二章 实验材料与方法第20-36页
    2.1 实验藻种与菌种第20页
    2.2 主要的实验试剂及仪器第20-22页
    2.3 主要的培养基及试剂配方第22-24页
        2.3.1 f/2无硅海水培养基的配制第22-23页
        2.3.2 LB培养基的配制第23-24页
    2.4 实验方法第24-35页
        2.4.1 目的基因生物信息学分析第24页
        2.4.2 三角褐指藻的培养与生长曲线的绘制第24页
        2.4.3 三角褐指藻基因组DNA的提取第24-25页
        2.4.4 目的基因的克隆第25-27页
        2.4.5 表达载体的构建第27页
        2.4.6 大肠杆菌转化克隆第27-28页
        2.4.7 质粒的提取及验证第28-29页
        2.4.8 三角褐指藻的电击方法及转化藻株的筛选第29-30页
        2.4.9 转化藻株的PCR验证第30-31页
        2.4.10 转化藻株基因转录水平分析第31-33页
        2.4.11 转化藻中性脂含量的测定第33-34页
        2.4.12 转化藻总糖和总蛋白含量的测定第34页
        2.4.13 脂肪酸的提取第34-35页
    2.5 统计学方法第35-36页
第三章 三角褐指藻多不饱和脂肪酸合成途径SDR基因的功能研究第36-45页
    3.1 实验结果第36-43页
        3.1.1 三角褐指藻SDR的亚细胞定位的预测第36-37页
        3.1.2 SDR基因蛋白系统发育树的构建以及蛋白结构序列分析第37-38页
        3.1.3 SDR的扩增及载体构建第38-39页
        3.1.4 SDR转化藻的筛选和PCR水平鉴定第39-40页
        3.1.5 SDR转化藻基因表达水平分析第40-41页
        3.1.6 SDR转化藻生长周期及光合作用效率的测定第41页
        3.1.7 SDR转化藻中性脂、总糖、总蛋白含量的测定第41-42页
        3.1.8 SDR转化藻脂肪酸含量的测定第42-43页
    3.2 分析与讨论第43-44页
    3.3 小结第44-45页
第四章 三角褐指藻多不饱和脂肪酸合成途径SAD基因的功能研究第45-54页
    4.1 实验结果第45-52页
        4.1.1 三角褐指藻SAD的亚细胞定位的预测第45-46页
        4.1.2 SAD基因蛋白系统发育树的构建以及蛋白结构序列分析第46-47页
        4.1.3 SAD的扩增及载体构建第47-48页
        4.1.4 SAD转化藻的筛选和PCR水平鉴定第48-49页
        4.1.5 SAD转化藻基因表达水平分析第49-50页
        4.1.6 SAD转化藻生长周期及光合作用效率的测定第50页
        4.1.7 SAD转化藻中性脂、总糖、总蛋白含量的测定第50-51页
        4.1.8 SAD转化藻脂肪酸含量的测定第51-52页
    4.2 分析与讨论第52-53页
    4.3 小结第53-54页
第五章 三角褐指藻PtD9、PtD12基因的功能及两者共表达对多不饱和脂肪酸合成调控的作用分析第54-68页
    5.1 实验结果第54-65页
        5.1.1 三角褐指藻PtD9、PtD12的亚细胞定位的预测第54-56页
        5.1.2 PtD9、PtD12基因蛋白系统发育树的构建以及蛋白结构序列分析第56-58页
        5.1.3 PtD9、PtD12基因的扩增及载体构建第58-59页
        5.1.4 PtD9、PtD12及PtD9-D12转化藻的筛选和PCR水平鉴定第59-60页
        5.1.5 转化藻PtD9、PtD12及PtD9-D12基因表达水平分析第60-61页
        5.1.6 转化藻PtD9、PtD12及PtD9-D12生长周期及光合作用效率的测定第61-62页
        5.1.7 转化藻PtD9、PtD12及PtD9-D12中性脂、总糖、总蛋白含量的测定第62-63页
        5.1.8 转化藻PtD9、PtD12及PtD9-D12脂肪酸含量的测定第63-65页
    5.2 分析与讨论第65-67页
    5.3 小结第67-68页
第六章 总结与展望第68-71页
    6.1 总结第68-70页
    6.2 展望第70-71页
参考文献第71-80页
攻读硕士期间发表的论文第80-81页
致谢第81-82页

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