摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
英文缩略词表 | 第9-10页 |
第一章 绪论 | 第10-20页 |
1.1 研究背景 | 第10-18页 |
1.1.1 微藻简介 | 第10页 |
1.1.2 微藻的综合应用 | 第10-11页 |
1.1.3 微藻的遗传转化 | 第11-13页 |
1.1.4 三角褐指藻的研究 | 第13-14页 |
1.1.5 多不饱和脂肪酸的研究 | 第14-15页 |
1.1.6 脂肪酸去饱和酶的研究 | 第15-16页 |
1.1.7 多不饱和脂肪酸代谢途径的研究 | 第16-18页 |
1.2 研究目的及意义 | 第18页 |
1.3 研究内容 | 第18页 |
1.4 研究创新点 | 第18-20页 |
第二章 实验材料与方法 | 第20-36页 |
2.1 实验藻种与菌种 | 第20页 |
2.2 主要的实验试剂及仪器 | 第20-22页 |
2.3 主要的培养基及试剂配方 | 第22-24页 |
2.3.1 f/2无硅海水培养基的配制 | 第22-23页 |
2.3.2 LB培养基的配制 | 第23-24页 |
2.4 实验方法 | 第24-35页 |
2.4.1 目的基因生物信息学分析 | 第24页 |
2.4.2 三角褐指藻的培养与生长曲线的绘制 | 第24页 |
2.4.3 三角褐指藻基因组DNA的提取 | 第24-25页 |
2.4.4 目的基因的克隆 | 第25-27页 |
2.4.5 表达载体的构建 | 第27页 |
2.4.6 大肠杆菌转化克隆 | 第27-28页 |
2.4.7 质粒的提取及验证 | 第28-29页 |
2.4.8 三角褐指藻的电击方法及转化藻株的筛选 | 第29-30页 |
2.4.9 转化藻株的PCR验证 | 第30-31页 |
2.4.10 转化藻株基因转录水平分析 | 第31-33页 |
2.4.11 转化藻中性脂含量的测定 | 第33-34页 |
2.4.12 转化藻总糖和总蛋白含量的测定 | 第34页 |
2.4.13 脂肪酸的提取 | 第34-35页 |
2.5 统计学方法 | 第35-36页 |
第三章 三角褐指藻多不饱和脂肪酸合成途径SDR基因的功能研究 | 第36-45页 |
3.1 实验结果 | 第36-43页 |
3.1.1 三角褐指藻SDR的亚细胞定位的预测 | 第36-37页 |
3.1.2 SDR基因蛋白系统发育树的构建以及蛋白结构序列分析 | 第37-38页 |
3.1.3 SDR的扩增及载体构建 | 第38-39页 |
3.1.4 SDR转化藻的筛选和PCR水平鉴定 | 第39-40页 |
3.1.5 SDR转化藻基因表达水平分析 | 第40-41页 |
3.1.6 SDR转化藻生长周期及光合作用效率的测定 | 第41页 |
3.1.7 SDR转化藻中性脂、总糖、总蛋白含量的测定 | 第41-42页 |
3.1.8 SDR转化藻脂肪酸含量的测定 | 第42-43页 |
3.2 分析与讨论 | 第43-44页 |
3.3 小结 | 第44-45页 |
第四章 三角褐指藻多不饱和脂肪酸合成途径SAD基因的功能研究 | 第45-54页 |
4.1 实验结果 | 第45-52页 |
4.1.1 三角褐指藻SAD的亚细胞定位的预测 | 第45-46页 |
4.1.2 SAD基因蛋白系统发育树的构建以及蛋白结构序列分析 | 第46-47页 |
4.1.3 SAD的扩增及载体构建 | 第47-48页 |
4.1.4 SAD转化藻的筛选和PCR水平鉴定 | 第48-49页 |
4.1.5 SAD转化藻基因表达水平分析 | 第49-50页 |
4.1.6 SAD转化藻生长周期及光合作用效率的测定 | 第50页 |
4.1.7 SAD转化藻中性脂、总糖、总蛋白含量的测定 | 第50-51页 |
4.1.8 SAD转化藻脂肪酸含量的测定 | 第51-52页 |
4.2 分析与讨论 | 第52-53页 |
4.3 小结 | 第53-54页 |
第五章 三角褐指藻PtD9、PtD12基因的功能及两者共表达对多不饱和脂肪酸合成调控的作用分析 | 第54-68页 |
5.1 实验结果 | 第54-65页 |
5.1.1 三角褐指藻PtD9、PtD12的亚细胞定位的预测 | 第54-56页 |
5.1.2 PtD9、PtD12基因蛋白系统发育树的构建以及蛋白结构序列分析 | 第56-58页 |
5.1.3 PtD9、PtD12基因的扩增及载体构建 | 第58-59页 |
5.1.4 PtD9、PtD12及PtD9-D12转化藻的筛选和PCR水平鉴定 | 第59-60页 |
5.1.5 转化藻PtD9、PtD12及PtD9-D12基因表达水平分析 | 第60-61页 |
5.1.6 转化藻PtD9、PtD12及PtD9-D12生长周期及光合作用效率的测定 | 第61-62页 |
5.1.7 转化藻PtD9、PtD12及PtD9-D12中性脂、总糖、总蛋白含量的测定 | 第62-63页 |
5.1.8 转化藻PtD9、PtD12及PtD9-D12脂肪酸含量的测定 | 第63-65页 |
5.2 分析与讨论 | 第65-67页 |
5.3 小结 | 第67-68页 |
第六章 总结与展望 | 第68-71页 |
6.1 总结 | 第68-70页 |
6.2 展望 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-80页 |
攻读硕士期间发表的论文 | 第80-81页 |
致谢 | 第81-82页 |