| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-7页 |
| 缩略词中英文对照表 | 第8-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-26页 |
| 1.1 引言 | 第12页 |
| 1.2 砷的形态及砷毒性 | 第12-14页 |
| 1.2.1 砷对人和动物的危害 | 第13页 |
| 1.2.2 砷对植物和微生物的危害 | 第13-14页 |
| 1.3 砷污染现状 | 第14-15页 |
| 1.4 微生物在环境砷污染修复中的应用 | 第15-22页 |
| 1.4.1 As(Ⅲ)氧化 | 第16页 |
| 1.4.2 As(Ⅴ)还原 | 第16-17页 |
| 1.4.3 As(Ⅲ)甲基化 | 第17-22页 |
| 1.5 ELP蛋白纯化标签 | 第22-24页 |
| 1.6 本课题的研究内容和创新性 | 第24-26页 |
| 第2章 组氨酸标签融合ArsM的表达纯化和性质研究 | 第26-50页 |
| 2.1 引言 | 第26-27页 |
| 2.2 材料和方法 | 第27-40页 |
| 2.2.1 菌株和质粒 | 第27页 |
| 2.2.2 仪器和试剂 | 第27-28页 |
| 2.2.3 试剂配制 | 第28-29页 |
| 2.2.4 培养基及培养条件 | 第29-30页 |
| 2.2.5 重组E.coli(ArsM-His)的构建 | 第30-33页 |
| 2.2.6 重组E.coli(ArsM-His)砷抗性测定 | 第33-34页 |
| 2.2.7 ArsM-His纯化与鉴定 | 第34-36页 |
| 2.2.8 ArsM酶活检测 | 第36-38页 |
| 2.2.9 ArsM-His酶学性质分析 | 第38页 |
| 2.2.10 砷去除能力检测 | 第38-40页 |
| 2.3 结果和分析 | 第40-48页 |
| 2.3.1 基因组DNA检测 | 第40页 |
| 2.3.2 arsM和质粒的检测 | 第40-41页 |
| 2.3.3 重组载体pET-28a-ArsM克隆与鉴定 | 第41-42页 |
| 2.3.4 重组E.coli(ArsM-His)砷抗性研究 | 第42-44页 |
| 2.3.5 ArsM-His表达与纯化 | 第44-45页 |
| 2.3.6 ArsM-His酶学特性分析 | 第45-47页 |
| 2.3.7 砷去除能力检测 | 第47-48页 |
| 2.4 讨论与小结 | 第48-50页 |
| 第3章 类弹性蛋白标签融合ArsM表达纯化及性质研究 | 第50-76页 |
| 3.1 引言 | 第50-51页 |
| 3.2 材料和方法 | 第51-58页 |
| 3.2.1 材料 | 第51页 |
| 3.2.2 重组E.coli(ArsM-ELP)的构建 | 第51-54页 |
| 3.2.3 重组E.coli(ArsM-ELP)砷抗性测定 | 第54页 |
| 3.2.4 BL21(ArsM-ELP)蛋白表达条件的优化 | 第54-55页 |
| 3.2.5 蛋白浓度和NaCl浓度对ArsM-ELP相变温度的影响 | 第55页 |
| 3.2.6 ArsM-ELP蛋白ITC纯化及条件优化 | 第55-57页 |
| 3.2.7 蛋白的SDS-PAGE鉴定 | 第57-58页 |
| 3.2.8 ArsM-ELP酶学性质分析 | 第58页 |
| 3.2.9 砷去除能力检测 | 第58页 |
| 3.3 结果和分析 | 第58-73页 |
| 3.3.1 质粒检测 | 第58-59页 |
| 3.3.2 重组菌E.coli(ArsM-ELP)鉴定 | 第59页 |
| 3.3.3 重组菌E.coli(ArsM-ELP)砷抗性测定 | 第59-61页 |
| 3.3.4 ArsM-ELP蛋白表达条件的优化 | 第61-63页 |
| 3.3.5 ArsM-ELP的表达及纯化 | 第63页 |
| 3.3.6 蛋白浓度和NaCl浓度对ArsM-ELP相变温度的影响 | 第63-64页 |
| 3.3.7 ArsM-ELP蛋白ITC纯化条件优化 | 第64-70页 |
| 3.3.8 ArsM-ELP酶学特性研究 | 第70-72页 |
| 3.3.9 重组酶的除砷能力 | 第72-73页 |
| 3.4 讨论与小结 | 第73-76页 |
| 第4章 结论与展望 | 第76-78页 |
| 4.1 结论 | 第76页 |
| 4.2 展望 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-86页 |
| 致谢 | 第86-88页 |
| 附录 | 第88-90页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第90页 |
