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microRNA-376b-5p对脑缺血后血管新生的调控作用及机制研究

摘要第4-7页
Abstract第7-10页
英文缩略词表第14-15页
前言第15-19页
第一章 大鼠局灶性脑缺血后MIR-376B-5P表达及血管新生情况第19-40页
    1.1 材料与方法第19-32页
        1.1.1 主要实验材料第19-20页
        1.1.2 主要实验设备第20页
        1.1.3 主要溶液配制第20-21页
        1.1.4 实验动物第21-22页
        1.1.5 大鼠永久性局灶性大脑中动脉脑缺血(pMCAO)模型的建立第22页
        1.1.6 动物实验分组第22-23页
        1.1.7 脑组织标本的制备第23页
        1.1.8 TTC染色法第23页
        1.1.9 免疫组织化学方法第23-25页
        1.1.10 实时荧光定量PCR方法第25-30页
        1.1.11 Western blot方法第30-32页
        1.1.12 统计学分析第32页
    1.2 结果第32-40页
        1.2.1 大鼠永久性局灶性大脑中动脉脑缺血(pMCAO)模型TTC染色结果第32-33页
        1.2.2 大鼠pMCAO模型脑梗死组织中vWF表达情况第33-34页
        1.2.3 大鼠pMCAO模型脑梗死组织中miR-376b-5p的表达第34-35页
        1.2.4 大鼠pMCAO模型脑梗死组织中HIF-1α,VEGFA,Notch1在mRNA水平的表达第35-37页
        1.2.5 大鼠pMCAO模型脑梗死组织中HIF-1α,VEGFA,Notch1在蛋白水平的表达第37-40页
第二章 HUVEC细胞缺氧后MIR-376B-5P表达及血管新生情况第40-59页
    2.1 材料与方法第40-51页
        2.1.1 主要实验材料第40-41页
        2.1.2 主要实验设备第41页
        2.1.3 HUVEC细胞培养及细胞缺氧模型的制备第41-43页
        2.1.4 实时荧光定量PCR方法第43-47页
        2.1.5 Western blot方法第47-50页
        2.1.6 MTT试验第50页
        2.1.7 内皮细胞小管形成实验第50页
        2.1.8 细胞迁移实验第50-51页
        2.1.9 统计学分析第51页
    2.2 结果第51-59页
        2.2.1 缺氧后HUVEC细胞中miR-376b-5p在mRNA水平的表达变化第51-52页
        2.2.2 缺氧对HUVEC细胞增殖的影响第52页
        2.2.3 缺氧对HUVEC细胞小管形成的影响第52-53页
        2.2.4 缺氧对HUVEC细胞迁移能力的影响第53-54页
        2.2.5 缺氧对HUVEC细胞中HIF-1α,VEGFA,Notch1 mRNA表达的影响第54-56页
        2.2.6 缺氧对HUVEC细胞中HIF-1α,VEGFA,Notch1蛋白表达的影响第56-59页
第三章 转染MIR-376B-5P模拟物及抑制物对HUVEC细胞血管新生的影响第59-70页
    3.1 材料与方法第59-61页
        3.1.1 主要实验材料第59-60页
        3.1.2 主要实验设备第60页
        3.1.3 实验分组第60页
        3.1.4 细胞转染第60-61页
        3.1.5 其余实验方法第61页
    3.2 结果第61-70页
        3.2.1 miR-376b-5p模拟物或抑制物转染HUVEC细胞后,细胞内miR-376b-5p的表达情况第61-62页
        3.2.2 miR-376b-5p模拟物或抑制物转染HUVEC细胞后对细胞增殖的影响第62-63页
        3.2.3 miR-376b-5p模拟物或抑制物转染HUVEC细胞后对细胞小管形成的影响第63-64页
        3.2.4 miR-376b-5p模拟物或抑制物转染HUVEC细胞后对细胞迁移能力的影响第64-65页
        3.2.5 miR-376b-5p模拟物或抑制物转染HUVEC细胞后对细胞中HIF-1α,VEGFA,Notch1 mRNA表达的影响第65-67页
        3.2.6 miR-376b-5p模拟物或抑制物转染HUVEC细胞后对细胞中HIF-1α,VEGFANotch1蛋白表达的影响第67-70页
第四章 MIR-376B-5P影响血管新生的机制研究第70-84页
    4.1 材料与方法第70-71页
        4.1.1 主要实验材料及设备第70页
        4.1.2 实验分组第70页
        4.1.3 细胞转染第70-71页
        4.1.4 其余实验方法第71页
    4.2 结果第71-84页
        4.2.1 HIF-1α shRNA转染HUVEC细胞后,细胞内HIF-1α的表达情况第71-75页
        4.2.2 HIF-1α shRNA转染HUVEC细胞后,细胞内miR-376b-5p的表达情况第75-76页
        4.2.3 HIF-1α shRNA转染HUVEC细胞后对细胞增殖的影响第76-77页
        4.2.4 HIF-1α shRNA转染HUVEC细胞后对细胞小管形成的影响第77-78页
        4.2.5 HIF-1α shRNA转染HUVEC细胞后对细胞迁移能力的影响第78-79页
        4.2.6 HIF-1α shRNA转染HUVEC细胞后对细胞中VEGFA,Notch1 mRNA表达的影响第79-81页
        4.2.7 HIF-1α shRNA转染HUVEC细胞后对细胞中VEGFA,Notch1蛋白表达的影响第81-84页
讨论第84-93页
结论第93-94页
参考文献第94-103页
综述第103-121页
    参考文献第111-121页
攻读学位期间主要的研究成果第121-122页
致谢第122页

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