| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 文献综述 | 第16-31页 |
| 1.1 植物Al毒害 | 第16-17页 |
| 1.2 植物耐Al机制 | 第17-18页 |
| 1.3 有机酸分泌是大多数植物主要的耐Al机制 | 第18-29页 |
| 1.3.1 有机酸分泌种类 | 第18页 |
| 1.3.3 有机酸分泌模式 | 第18-29页 |
| 1.3.3.1 有机酸转运蛋白 | 第19-20页 |
| 1.3.3.2 转运蛋白基因上游序列调节因子 | 第20-21页 |
| 1.3.3.3 转运蛋白基因拷贝数 | 第21-22页 |
| 1.3.3.4 转录因子 | 第22-24页 |
| 1.3.3.5 蛋白可逆磷酸化 | 第24-25页 |
| 1.3.3.6 有机酸合成代谢 | 第25-26页 |
| 1.3.3.7 能量代谢 | 第26-28页 |
| 1.3.3.8 质膜H~+-ATPase | 第28页 |
| 1.3.3.9 其它 | 第28-29页 |
| 1.4 组学在植物耐Al中的研究 | 第29-30页 |
| 1.5 本研究的目的意义及主要内容 | 第30-31页 |
| 2 饭豆早期Al应答基因的鉴定与分析 | 第31-68页 |
| 2.1 材料与方法 | 第31-38页 |
| 2.1.1 材料与试剂 | 第31-32页 |
| 2.1.2 相对根伸长的测量与Evans blue染色 | 第32页 |
| 2.1.3 总RNA的提取 | 第32页 |
| 2.1.4 双链cDNA合成 | 第32-33页 |
| 2.1.5 抑制差减cDNA文库的构建 | 第33-35页 |
| 2.1.5.1 双链cDNA的酶切消化与产物回收 | 第33页 |
| 2.1.5.2 接头连接 | 第33页 |
| 2.1.5.3 cDNA杂交 | 第33-34页 |
| 2.1.5.4 PCR扩增与纯化 | 第34页 |
| 2.1.5.5 克隆载体的连接与转化 | 第34页 |
| 2.1.5.6 重组子PCR扩增 | 第34-35页 |
| 2.1.6 反向Northern杂交筛选cDNA文库 | 第35-36页 |
| 2.1.6.1 探针标记 | 第35页 |
| 2.1.6.2 重组子PCR产物转膜 | 第35页 |
| 2.1.6.3 杂交 | 第35页 |
| 2.1.6.4 洗膜 | 第35-36页 |
| 2.1.6.5 免疫检测 | 第36页 |
| 2.1.6.6 显色 | 第36页 |
| 2.1.7 DNA测序与序列分析 | 第36页 |
| 2.1.8 实时定量PCR分析 | 第36-38页 |
| 2.2 结果与分析 | 第38-59页 |
| 2.2.1 Al胁迫对饭豆根伸长的影响 | 第38-40页 |
| 2.2.2 RNA的提取LD-PCR循环数的确定 | 第40-41页 |
| 2.2.3 酶切与接头连接 | 第41-43页 |
| 2.2.4 PCR抑制差减杂交 | 第43-44页 |
| 2.2.5 重组子PCR鉴定 | 第44-45页 |
| 2.2.6 差异表达cDNA的鉴定 | 第45-50页 |
| 2.2.7 SSH数据的验证 | 第50-52页 |
| 2.2.8 序列装配和EST注释 | 第52-54页 |
| 2.2.9 差异表达基因的功能分类 | 第54-57页 |
| 2.2.10 两个Al处理浓度SSH文库中共同鉴定的基因 | 第57页 |
| 2.2.11 信号转导和转录相关基因 | 第57页 |
| 2.2.12 转运子相关基因 | 第57-58页 |
| 2.2.13 胁迫/防御相关基因 | 第58页 |
| 2.2.14 代谢与能量相关基因 | 第58页 |
| 2.2.15 细胞壁结构与修饰相关基因 | 第58-59页 |
| 2.2.16 其它生物学进程相关基因 | 第59页 |
| 2.3 讨论 | 第59-68页 |
| 3 饭豆VuSTOP1转录因子基因的克隆与功能研究 | 第68-92页 |
| 3.1 材料与方法 | 第68-76页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第68-69页 |
| 3.1.2 培养条件 | 第69页 |
| 3.1.3 RNA和DNA提取 | 第69页 |
| 3.1.4 RACE技术扩增基因全长 | 第69-70页 |
| 3.1.5 生物信息学分析 | 第70页 |
| 3.1.6 Southern杂交 | 第70-71页 |
| 3.1.7 载体构建 | 第71-72页 |
| 3.1.8 亚细胞定位 | 第72页 |
| 3.1.9 转录激活实验 | 第72-73页 |
| 3.1.10 VuSTOP1在饭豆中的表达分析 | 第73页 |
| 3.1.11 拟南芥stop1突变体鉴定 | 第73-74页 |
| 3.1.12 拟南芥转化 | 第74页 |
| 3.1.13 回复株系根伸长实验 | 第74页 |
| 3.1.14 回复株系基因表达分析 | 第74-76页 |
| 3.2 结果与分析 | 第76-89页 |
| 3.2.1 VuSTOP1的克隆与生物信息学分析 | 第76-81页 |
| 3.2.2 VuSTOP1表达模式分析 | 第81-83页 |
| 3.2.3 VuSTOP1基本特性分析 | 第83-85页 |
| 3.2.4 拟南芥stop1突变体及回复株系鉴定 | 第85-86页 |
| 3.2.5 VuSTOP1回复拟南芥stop1表型分析 | 第86页 |
| 3.2.6 VuSTOP1回复株系基因表达分析 | 第86-89页 |
| 3.3 讨论 | 第89-92页 |
| 4 结论与展望 | 第92-94页 |
| 5 参考文献 | 第94-110页 |
| 6 附表 | 第110-130页 |
| 7 致谢 | 第130-132页 |
| 8 攻读博士期间发表的论文 | 第132页 |
