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Runx1在脑死亡供体肝脏中作用机制研究

中文摘要第4-9页
英文摘要第9-13页
目录第14-17页
符号说明第17-19页
前言第19-22页
1 兔脑死亡肝脏差异蛋白表达趋势检测第22-40页
    1.1 实验材料第22-24页
        1.1.1 实验器材第22-23页
        1.1.2 实验主要试剂第23-24页
    1.2 方法第24-32页
        1.2.1 蛋白质样品的制备第24-25页
        1.2.2 免疫组织化学验证第25-26页
        1.2.3 RT-PCR检测RUNX1 mRNA表达第26-28页
        1.2.4 Western blot检测Runx1蛋白质含量变化第28-32页
        1.2.5 统计分析第32页
    1.3 结果第32-34页
        1.3.1 免疫组织化学法验证RUNX1表达情况第32-33页
        1.3.2 RT-PCR检测RUNX1蛋白在肝脏中各时间点的表达第33页
        1.3.3 Western blot检测RUNX1蛋白在肝脏中各时间点的表达第33-34页
    1.4 讨论第34-39页
    1.5 小结第39-40页
2 RUNX1蛋白对缺血缺氧肝脏细胞作用的体外实验研究第40-63页
    2.1 实验材料第41-42页
        2.1.1 实验主要试剂第41页
        2.1.2 实验设备第41-42页
    2.2 方法第42-52页
        2.2.1 实验分组第42页
        2.2.2 建立pEGFP-N1质粒转染的Runxl过表达第42-46页
        2.2.3 氧糖剥夺(OGD)模型大鼠肝细胞缺血缺氧模型建立第46-47页
        2.2.4 RT-PCR检测mRNA表达水平第47-49页
        2.2.5 Western blot检测蛋白表达水平第49-51页
        2.2.6 流式细胞仪检测对照组、缺血缺氧组、过表达组细胞凋亡第51-52页
        2.2.7 统计分析第52页
    2.3 结果第52-58页
        2.3.1 pEGFP-N1-RUNX1转染大鼠肝细胞结果第52-53页
        2.3.2 缺血缺氧处理大鼠肝脏细胞模型建立第53-54页
        2.3.3 RT-PCR检测各组Runx1 mRNA表达水平第54页
        2.3.4 Western blot检测各组Runx1蛋白表达水平第54-55页
        2.3.5 流式细胞仪检测缺血缺氧组、过表达组、阴性对照组和对照组细胞凋亡第55-56页
        2.3.6 PCR检测各组TGF-β、Bcl-2、Bim、TNF-α mRNA表达水平变化第56-58页
    2.4 讨论第58-62页
    2.5 小结第62-63页
3 RUNX1蛋白对脑死亡大鼠肝脏细胞作用机制的在体实验研究第63-74页
    3.1 实验材料第63-64页
        3.1.1 实验动物第63页
        3.1.2 实验器材第63-64页
        3.1.3 实验主要试剂第64页
        3.1.4 实验一般用品第64页
    3.2 方法第64-67页
        3.2.1 实验分组第64-65页
        3.2.2 pEGFP-N1质粒转染大鼠第65-67页
    3.3 结果第67-70页
        3.3.1 高压注射质粒转染大鼠尾静脉pEGFP-N1-RUNX1第67页
        3.3.2 大鼠脑死亡模型建立第67-68页
        3.3.3 脑死亡后肝脏功能检测第68-69页
        3.3.4 大鼠脑死亡肝脏形态学检测第69-70页
        3.3.5 PT-PCR(Real-time PCR)检测mRNA表达第70页
    3.4 讨论第70-73页
    3.5 小结第73-74页
4 结论第74-75页
参考文献第75-82页
附录第82-84页
综述一第84-102页
    参考文献第95-102页
综述二第102-114页
    参考文献第108-114页
攻读学位期间的主要研究成果第114-116页
致谢第116页

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