中文摘要 | 第4-9页 |
英文摘要 | 第9-13页 |
目录 | 第14-17页 |
符号说明 | 第17-19页 |
前言 | 第19-22页 |
1 兔脑死亡肝脏差异蛋白表达趋势检测 | 第22-40页 |
1.1 实验材料 | 第22-24页 |
1.1.1 实验器材 | 第22-23页 |
1.1.2 实验主要试剂 | 第23-24页 |
1.2 方法 | 第24-32页 |
1.2.1 蛋白质样品的制备 | 第24-25页 |
1.2.2 免疫组织化学验证 | 第25-26页 |
1.2.3 RT-PCR检测RUNX1 mRNA表达 | 第26-28页 |
1.2.4 Western blot检测Runx1蛋白质含量变化 | 第28-32页 |
1.2.5 统计分析 | 第32页 |
1.3 结果 | 第32-34页 |
1.3.1 免疫组织化学法验证RUNX1表达情况 | 第32-33页 |
1.3.2 RT-PCR检测RUNX1蛋白在肝脏中各时间点的表达 | 第33页 |
1.3.3 Western blot检测RUNX1蛋白在肝脏中各时间点的表达 | 第33-34页 |
1.4 讨论 | 第34-39页 |
1.5 小结 | 第39-40页 |
2 RUNX1蛋白对缺血缺氧肝脏细胞作用的体外实验研究 | 第40-63页 |
2.1 实验材料 | 第41-42页 |
2.1.1 实验主要试剂 | 第41页 |
2.1.2 实验设备 | 第41-42页 |
2.2 方法 | 第42-52页 |
2.2.1 实验分组 | 第42页 |
2.2.2 建立pEGFP-N1质粒转染的Runxl过表达 | 第42-46页 |
2.2.3 氧糖剥夺(OGD)模型大鼠肝细胞缺血缺氧模型建立 | 第46-47页 |
2.2.4 RT-PCR检测mRNA表达水平 | 第47-49页 |
2.2.5 Western blot检测蛋白表达水平 | 第49-51页 |
2.2.6 流式细胞仪检测对照组、缺血缺氧组、过表达组细胞凋亡 | 第51-52页 |
2.2.7 统计分析 | 第52页 |
2.3 结果 | 第52-58页 |
2.3.1 pEGFP-N1-RUNX1转染大鼠肝细胞结果 | 第52-53页 |
2.3.2 缺血缺氧处理大鼠肝脏细胞模型建立 | 第53-54页 |
2.3.3 RT-PCR检测各组Runx1 mRNA表达水平 | 第54页 |
2.3.4 Western blot检测各组Runx1蛋白表达水平 | 第54-55页 |
2.3.5 流式细胞仪检测缺血缺氧组、过表达组、阴性对照组和对照组细胞凋亡 | 第55-56页 |
2.3.6 PCR检测各组TGF-β、Bcl-2、Bim、TNF-α mRNA表达水平变化 | 第56-58页 |
2.4 讨论 | 第58-62页 |
2.5 小结 | 第62-63页 |
3 RUNX1蛋白对脑死亡大鼠肝脏细胞作用机制的在体实验研究 | 第63-74页 |
3.1 实验材料 | 第63-64页 |
3.1.1 实验动物 | 第63页 |
3.1.2 实验器材 | 第63-64页 |
3.1.3 实验主要试剂 | 第64页 |
3.1.4 实验一般用品 | 第64页 |
3.2 方法 | 第64-67页 |
3.2.1 实验分组 | 第64-65页 |
3.2.2 pEGFP-N1质粒转染大鼠 | 第65-67页 |
3.3 结果 | 第67-70页 |
3.3.1 高压注射质粒转染大鼠尾静脉pEGFP-N1-RUNX1 | 第67页 |
3.3.2 大鼠脑死亡模型建立 | 第67-68页 |
3.3.3 脑死亡后肝脏功能检测 | 第68-69页 |
3.3.4 大鼠脑死亡肝脏形态学检测 | 第69-70页 |
3.3.5 PT-PCR(Real-time PCR)检测mRNA表达 | 第70页 |
3.4 讨论 | 第70-73页 |
3.5 小结 | 第73-74页 |
4 结论 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-82页 |
附录 | 第82-84页 |
综述一 | 第84-102页 |
参考文献 | 第95-102页 |
综述二 | 第102-114页 |
参考文献 | 第108-114页 |
攻读学位期间的主要研究成果 | 第114-116页 |
致谢 | 第116页 |