| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第13-20页 |
| 1.1 青枯雷尔氏菌概况 | 第13-14页 |
| 1.1.1 青枯病的发生与危害 | 第13页 |
| 1.1.2 青枯雷尔氏菌侵染特性 | 第13-14页 |
| 1.1.3 植物发病症状 | 第14页 |
| 1.2 青枯雷尔氏菌全基因组学 | 第14-15页 |
| 1.3 青枯雷尔氏菌致病机理 | 第15-16页 |
| 1.4 青枯雷尔氏菌的致病因子 | 第16-18页 |
| 1.4.1 胞外多糖 | 第16-17页 |
| 1.4.2 Ⅲ型分泌系统 | 第17页 |
| 1.4.3 细胞壁降解酶 | 第17-18页 |
| 1.5 植物青枯病的防治 | 第18-19页 |
| 1.5.1 农业防治 | 第18页 |
| 1.5.2 化学防治 | 第18页 |
| 1.5.3 生物防治 | 第18-19页 |
| 1.6 本研究的目的及意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第20页 |
| 2.1.2 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.3 培养基 | 第20-21页 |
| 2.1.4 试剂与仪器 | 第21-22页 |
| 2.1.5 引物 | 第22页 |
| 2.2 青枯雷尔氏菌FJAT-91基因组测序与分析 | 第22-23页 |
| 2.2.1 基因组DNA的提取 | 第22-23页 |
| 2.2.2 基因组DNA质量检测 | 第23页 |
| 2.2.3 基因组测序及组装 | 第23页 |
| 2.2.4 基因组功能注释 | 第23页 |
| 2.2.5 比较基因组学 | 第23页 |
| 2.3 重组质粒载体的构建 | 第23-26页 |
| 2.3.1 质粒DNA提取 | 第23-24页 |
| 2.3.2 PCR扩增DNA片段 | 第24页 |
| 2.3.3 DNA片段/质粒载体双酶切 | 第24页 |
| 2.3.4 DNA片段和质粒载体连接 | 第24-25页 |
| 2.3.5 重组质粒转化感受态大肠杆菌DH5α | 第25页 |
| 2.3.6 阳性克隆的PCR验证 | 第25页 |
| 2.3.7 阳性克隆的酶切验证 | 第25-26页 |
| 2.4 epsD缺失突变株的构建 | 第26-27页 |
| 2.4.1 青枯雷尔氏菌感受态的制备 | 第26页 |
| 2.4.2 电转化 | 第26页 |
| 2.4.3 突变株的筛选 | 第26-27页 |
| 2.5 epsD回复突变株构建 | 第27页 |
| 2.6 青枯雷尔氏菌弱化指数测定 | 第27页 |
| 2.7 青枯雷尔氏菌菌体形态 | 第27页 |
| 2.8 青枯雷尔氏菌生长曲线测定 | 第27-28页 |
| 2.9 青枯雷尔氏菌胞外多糖含量测定 | 第28页 |
| 2.10 高效离子交换色谱分离青枯雷尔氏菌 | 第28-29页 |
| 2.11 青枯雷尔氏菌运动性检测 | 第29页 |
| 2.12 青枯雷尔氏菌定殖能力测定 | 第29页 |
| 2.13 青枯雷尔氏菌致病性生物测定 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-51页 |
| 3.1 青枯雷尔氏菌基因组 | 第30-36页 |
| 3.1.1 DNA质量分析 | 第30页 |
| 3.1.2 基因组基本特征 | 第30-32页 |
| 3.1.3 基因注释 | 第32-35页 |
| 3.1.4 比较基因组学研究 | 第35页 |
| 3.1.5 epsD基因生物信息学分析 | 第35-36页 |
| 3.2 青枯雷尔氏菌epsD缺失突变株的构建 | 第36-41页 |
| 3.2.1 epsD基因重组质粒的构建 | 第36-39页 |
| 3.2.2 epsD基因缺失突变株的构建 | 第39-41页 |
| 3.3 青枯雷尔氏菌epsD回复突变株的构建 | 第41-42页 |
| 3.4 青枯雷尔氏菌epsD缺失突变株弱化指数变化 | 第42-43页 |
| 3.5 青枯雷尔氏菌菌体形态变化 | 第43-44页 |
| 3.6 青枯雷尔氏菌epsD缺失突变株生长速率变化 | 第44页 |
| 3.7 胞外多糖含量测定 | 第44-45页 |
| 3.8 高效离子交换色谱分离 | 第45-46页 |
| 3.9 青枯雷尔氏菌epsD缺失突变株运动能力变化 | 第46-48页 |
| 3.10 青枯雷尔氏菌epsD缺失突变株定殖能力变化 | 第48-49页 |
| 3.11 青枯雷尔氏菌epsD缺失突变株致病力变化 | 第49-51页 |
| 4 讨论与展望 | 第51-55页 |
| 4.1 小结 | 第51页 |
| 4.2 讨论 | 第51-54页 |
| 4.3 展望 | 第54-55页 |
| 5 参考文献 | 第55-61页 |
| 攻读学位期间的学术论文与研究成果 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
