| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第11-17页 |
| 1.1 关于大豆疫霉根腐病 | 第11-13页 |
| 1.1.1 大豆疫霉根腐病的情况和它在世界上的危害 | 第11页 |
| 1.1.2 大豆疫霉菌基本情况的研究 | 第11-12页 |
| 1.1.3 有关大豆疫霉菌致病性的相关研究 | 第12页 |
| 1.1.4 大豆疫霉根腐病抗病基因的寻找以及研究 | 第12页 |
| 1.1.5 大豆疫霉根腐病的抗病育种研究 | 第12-13页 |
| 1.2 乙烯循环的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.3 EIN3基因的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.3.1 EIN3基因的结构 | 第14页 |
| 1.3.2 EIN3转录因子的功能 | 第14-15页 |
| 1.3.2.1 EIN3能够参加乙烯循环的信号传递 | 第14页 |
| 1.3.2.2 EIN3能够调控植物的“三重反应” | 第14-15页 |
| 1.3.2.3 EIN3能够调控植物的许多生育期 | 第15页 |
| 1.3.2.4 EIN3能够影响不同途径的交叉 | 第15页 |
| 1.4 研究的目的及意义 | 第15-16页 |
| 1.5 技术路线 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-27页 |
| 2.1 实验材料及试剂 | 第17页 |
| 2.1.1 品种和菌种 | 第17页 |
| 2.1.2 菌种和载体 | 第17页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-27页 |
| 2.2.1 材料的培养与处理 | 第17-18页 |
| 2.2.2 大豆总RNA的提取集cDNA的合成 | 第18页 |
| 2.2.2.1 大豆总RNA的提取 | 第18页 |
| 2.2.2.2 cDNA白勺合成 | 第18页 |
| 2.2.4 EIN3-1、EIN3-2全长cDNA序列的获得及生物信息学分析 | 第18页 |
| 2.2.5 对EIN3基因进行克隆 | 第18-21页 |
| 2.2.6 EIN3基因表达模式分析 | 第21-22页 |
| 2.2.7 EIN3-1、EIN3-2基因基因的亚细胞定位观察 | 第22-24页 |
| 2.2.8 植物表达载体的构建 | 第24页 |
| 2.2.9 烟草遗传转化及功能分析 | 第24-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-47页 |
| 3.1 大豆总RNA的提取 | 第27页 |
| 3.2 EIN3基因序列的生物信息学分析 | 第27-34页 |
| 3.2.1 EIN3-1、E-3-2基因编码蛋白质性质和功能分析 | 第30-32页 |
| 3.2.2 EIN3-1基因与EIN3-2和其它物种的同源性分析 | 第32-34页 |
| 3.3 EIN3-1、EIN3-2基因表达模式分析 | 第34-36页 |
| 3.3.1 EIN3-1、EIN3-2基因在不同激素处理条件下表达分析 | 第35-36页 |
| 3.4 EIN3-1、EIN3-2基因的亚细胞定位研究 | 第36-39页 |
| 3.4.1 目的基因的PCR扩增 | 第36-37页 |
| 3.4.2 重组表达载体的构建 | 第37-38页 |
| 3.4.3 荧光显微镜观察洋葱表皮 | 第38-39页 |
| 3.5 植物过量表达载体PCAMBIA3301-EIN3的构建 | 第39-41页 |
| 3.5.1 pCAMBIA3301-EIN3-1、pCAMBIA3301-EIN3-2重组载体的构建 | 第40页 |
| 3.5.2 重组载体转化农杆菌 | 第40-41页 |
| 3.6 烟草的遗传转化及功能分析 | 第41-44页 |
| 3.6.1 烟草的遗传转化 | 第41-42页 |
| 3.6.2 转基因烟草的PCR检测 | 第42页 |
| 3.6.3 转基因烟草的抗性鉴定 | 第42-44页 |
| 3.7 大豆的遗传转化及相关功能分析 | 第44-47页 |
| 3.7.1 利用子叶节法进行大豆的遗传转化 | 第44-45页 |
| 3.7.2 T_1代转基因植株的PCR检测 | 第45页 |
| 3.7.3 转基因大豆的Southern杂交检测 | 第45页 |
| 3.7.4 离体叶片接种法鉴定T_1代转基因大豆的抗病性 | 第45-47页 |
| 4 讨论 | 第47-49页 |
| 4.1 EIN3基因的研究 | 第47页 |
| 4.2 乙烯循环与植物胁迫反应 | 第47-48页 |
| 4.3 EIN3-1基因与EIN3-2基因的比较 | 第48页 |
| 4.4 关于后续工作 | 第48-49页 |
| 5 结论 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第58页 |
