| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 文献综述 | 第13-19页 |
| 第一章 PU.1 调控脂肪细胞分化 | 第13-15页 |
| 1.1 PU.1 基因综述 | 第13-14页 |
| 1.2 PU.1 抑制脂肪细胞分化 | 第14页 |
| 1.3 PU.1 基因的双向转录 | 第14-15页 |
| 第二章 AS lncRNA 的作用机制 | 第15-19页 |
| 2.1 AS lncRNA 概述 | 第15-16页 |
| 2.2 AS lncRNA 的生物学功能 | 第16页 |
| 2.2.1 AS-S 自身调控 | 第16页 |
| 2.2.2 对基因转录的动态调控 | 第16页 |
| 2.2.3 参与多种复合物的形成 | 第16页 |
| 2.3 AS lncRNA 的作用机制 | 第16-19页 |
| 2.3.1 AS lncRNA 与转录起始 | 第17页 |
| 2.3.2 AS lncRNA 的共转录调节 | 第17页 |
| 2.3.3 AS lncRNA 的转录后调节 | 第17-19页 |
| 实验研究 | 第19-41页 |
| 前言 | 第19-20页 |
| 第三章 猪 PU.1AS lncRNA 的鉴定和表达谱分析 | 第20-27页 |
| 3.1 实验材料 | 第20页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第20页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第20页 |
| 3.2 实验方法 | 第20-23页 |
| 3.2.1 猪组织样品的采集 | 第20页 |
| 3.2.2 猪前体脂肪细胞的分离 | 第20页 |
| 3.2.3 组织、细胞样品总 RNA 的提取 | 第20页 |
| 3.2.4 链特异 PT-PCR | 第20-21页 |
| 3.2.5 总 RNA 的反转录 | 第21-22页 |
| 3.2.6 实时定量 PCR | 第22页 |
| 3.2.7 组织、细胞总蛋白的提取和 Western Blotting | 第22页 |
| 3.2.8 数据分析 | 第22-23页 |
| 3.3 结果与分析 | 第23-26页 |
| 3.3.1 链特异 RT-PCR 鉴定猪 PU.1 AS lncRNA | 第23-25页 |
| 3.3.2 猪 PU.1 AS lncRNA 在猪各组织中广泛表达 | 第25页 |
| 3.3.3 PU.1 AS lncRNA 下调 PU.1 蛋白水平 | 第25-26页 |
| 3.4 讨论 | 第26-27页 |
| 第四章 PU.1AS lncRNA 促进猪前体脂肪细胞生脂 | 第27-35页 |
| 4.1 实验材料 | 第27页 |
| 4.1.1 实验动物 | 第27页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第27页 |
| 4.2 实验方法 | 第27-29页 |
| 4.2.1 猪组织样品的采集 | 第27页 |
| 4.2.2 猪前体脂肪细胞的分离与培养 | 第27-28页 |
| 4.2.3 猪前体脂肪细胞诱导分化 | 第28页 |
| 4.2.4 慢病毒干扰载体构建、包装与侵染 | 第28页 |
| 4.2.5 油红 O 染色 | 第28页 |
| 4.2.6 细胞样品总 RNA 的提取 | 第28页 |
| 4.2.7 总 RNA 的反转录 | 第28页 |
| 4.2.8 实时定量 PCR | 第28-29页 |
| 4.2.9 细胞总蛋白的提取和 Western Blotting | 第29页 |
| 4.2.10 核酸酶保护分析 | 第29页 |
| 4.2.11 数据分析 | 第29页 |
| 4.3 结果与分析 | 第29-34页 |
| 4.3.1 PU.1 S、AS 有效慢病毒干扰载体的获取 | 第29-31页 |
| 4.3.2 干扰 PU.1 AS lncRNA 抑制脂肪细胞分化 | 第31页 |
| 4.3.3 干扰 PU.1 AS lncRNA 调节成脂相关基因 | 第31-32页 |
| 4.3.4 PU.1 AS lncRNA 通过抑制 mRNA 翻译调控成脂分化 | 第32-34页 |
| 4.4 讨论 | 第34-35页 |
| 第五章 PU.1AS lncRNA 在活体斑马鱼早期适应性免疫的作用 | 第35-41页 |
| 5.1 实验材料 | 第35页 |
| 5.1.1 实验动物 | 第35页 |
| 5.1.2 实验试剂 | 第35页 |
| 5.2 实验方法 | 第35-36页 |
| 5.2.1 斑马鱼饲养 | 第35页 |
| 5.2.2 慢病毒干扰载体构建、注射与样品采集 | 第35-36页 |
| 5.2.3 肾脏涂片制作与观察 | 第36页 |
| 5.2.4 总 RNA 的提取 | 第36页 |
| 5.2.5 链特异 RT-PCR | 第36页 |
| 5.2.6 总 RNA 的反转录 | 第36页 |
| 5.2.7 实时定量 PCR | 第36页 |
| 5.2.8 在线预测软件 | 第36页 |
| 5.2.9 核酸酶保护分析 | 第36页 |
| 5.2.10 数据分析 | 第36页 |
| 5.3 结果与分析 | 第36-40页 |
| 5.3.1 斑马鱼 PU.1 AS lncRNA 的鉴定 | 第36-38页 |
| 5.3.2 活体注射 PU.1 AS lncRNA 促进早期适应性免疫基因的表达 | 第38-39页 |
| 5.3.3 干扰 PU.1 AS lncRNA 和 PU.1 mRNA 下调彼此的水平 | 第39-40页 |
| 5.4 讨论 | 第40-41页 |
| 结论 | 第41页 |
| 创新点 | 第41页 |
| 进一步研究内容 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-46页 |
| 附录 | 第46-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简介 | 第59-60页 |
