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拟南芥种子特异表达基因启动子分析

中文摘要第1-11页
Abstract第11-14页
1 前言第14-36页
   ·高等植物启动子的研究进展第14-16页
   ·种子特异启动子研究进展第16-24页
     ·已经克隆的种子特异启动子第16-21页
       ·1.7S 蛋白基因启动子第16-17页
       ·豆球蛋白基因启动子第17页
       ·油棕75 球蛋白启动子第17页
       ·棉花α球蛋白B 基因启动子第17页
       ·醇溶谷蛋白启动子第17-18页
       ·水稻谷蛋白1 基因启动子第18页
       ·USP 启动子第18页
       ·水稻球蛋白启动子第18-19页
       ·玉米球蛋白启动子第19页
       ·gbssI 种子特异启动子第19页
       ·SBE1 启动子第19页
       ·AGP 小亚基基因启动子第19-20页
       ·FAD2 基因启动子第20页
       ·FAE1 基因启动子第20页
       ·2S清蛋白基因启动子第20页
       ·云扁豆蛋白基因启动子第20-21页
     ·种子特异启动子的应用第21-22页
     ·种子特异启动子的结构特点第22-24页
   ·启动子的生物信息学研究第24-35页
     ·生物信息学的研究意义第24-25页
     ·启动子顺式调控元件的生物信息学分析第25-35页
       ·潜在已知顺式调控元件的分析第26页
       ·未知顺式调控元件的预测第26-33页
       ·识别结果的处理第33-35页
     ·生物信息学与实验结合第35页
   ·研究目的与意义第35-36页
2 材料与方法第36-51页
   ·材料第36-38页
     ·植物材料第36页
     ·植物材料培养与处理第36页
     ·菌株和载体第36-37页
     ·酶与各种生化试剂第37页
     ·实验引物第37-38页
   ·实验方法第38-51页
     ·网络资源及数据库第38-39页
     ·植物表达载体的构建第39-45页
       ·拟南芥基因组DNA 的提取(小量法)第39-40页
       ·种子特异启动子序列的扩增第40页
       ·凝胶电泳中DNA 片段的回收第40-41页
       ·DNA 片段与克隆载体的连接第41-42页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第42页
       ·大肠杆菌细胞的转化第42页
       ·质粒DNA 的提取第42-44页
       ·克隆载体的酶切鉴定第44页
       ·拟南芥表达载体的构建第44-45页
     ·植物表达载体的转化第45-46页
       ·根癌农杆菌GV3101 感受态细胞的制备第45页
       ·冻融法转化农杆菌第45页
       ·农杆菌的培养第45页
       ·农杆菌介导转化拟南芥第45-46页
       ·转基因拟南芥的鉴定第46页
     ·转基因植物的GUS 表达分析第46-48页
       ·转基因拟南芥植株GUS 组织化学染色分析第46-47页
       ·转基因拟南芥植株GUS 基因表达的定量分析第47-48页
     ·种子特异基因内源转录水平表达情况第48-51页
       ·TRIZOL 法提取RNA第48页
       ·去除基因组DNA第48-49页
       ·RNA 反转录第49页
       ·real-timePCR 检测第49-51页
3 结果与分析第51-66页
   ·拟南芥种子特异表达基因的信息学分析第51-53页
     ·种子特异表达基因的获得、筛选第51-52页
       ·Genevestigator 芯片数据获得拟南芥种子特异表达基因第51-52页
       ·UniGene 去除假阳性基因第52页
     ·种子特异表达基因启动子序列分析第52-53页
   ·启动子实验分析第53-56页
     ·拟南芥转化载体的构建第53页
     ·转基因拟南芥植株的获得第53-54页
     ·转基因拟南芥组织化学染色第54-55页
     ·转基因拟南芥GUS 活性的测定第55-56页
   ·基因内源表达分析第56-57页
   ·启动子缺失分析结果第57-62页
     ·启动子缺失载体构建、转基因植株获得第57-58页
     ·启动子缺失组织化学染色第58-62页
   ·生物信息学方法预测顺式调控元件第62-66页
     ·YME3.0 的模体预测第62页
     ·Mobydick 的模体预测第62页
     ·Weeder 的模体预测第62-63页
     ·Bioprospector 的模体预测第63-64页
     ·基序预测结果分析第64-66页
4 讨论第66-70页
   ·生物芯片信息可以辅助启动子实验研究第66-67页
   ·调控元件对种子特异启动子功能的意义第67页
   ·预测程序对未知元件的发现有指导作用第67-70页
5 结论第70-71页
参考文献第71-81页
附录第81-84页
致谢第84-85页
攻读学位期间发表论文情况第85页

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