| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第1章 绪论 | 第10-18页 |
| 1.1 旱稻 | 第10-12页 |
| 1.1.1 旱稻的优势 | 第10页 |
| 1.1.2 盐碱胁迫在植物生理方面的影响 | 第10-11页 |
| 1.1.3 旱稻的抗旱性 | 第11-12页 |
| 1.1.4 旱稻的耐盐性 | 第12页 |
| 1.2 LEA蛋白 | 第12-13页 |
| 1.2.1 LEA蛋白定义 | 第12页 |
| 1.2.2 LEA蛋白与植物的抗旱性 | 第12-13页 |
| 1.2.3 8981 基因 | 第13页 |
| 1.3 Southern杂交技术 | 第13-15页 |
| 1.3.1 Southern杂交的原理 | 第13页 |
| 1.3.2 Southern杂交的技术的研究现状 | 第13-14页 |
| 1.3.3 Southern杂交的技术优化 | 第14-15页 |
| 1.4 TAIL-PCR | 第15页 |
| 1.5 课题来源 | 第15-16页 |
| 1.6 研究内容和目的 | 第16-18页 |
| 1.6.1 研究内容 | 第16页 |
| 1.6.2 研究目的 | 第16-18页 |
| 第2章 转基因植株候选纯合体的筛选 | 第18-26页 |
| 2.1 概述 | 第18页 |
| 2.2 实验材料、试剂、设备及仪器 | 第18-19页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第18页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第18页 |
| 2.2.3 主要设备及仪器 | 第18-19页 |
| 2.3 实验方法 | 第19-21页 |
| 2.3.1 转基因植株除草剂抗性筛选 | 第19页 |
| 2.3.2 质粒的提取 | 第19-20页 |
| 2.3.3 单株旱稻DNA的提取 | 第20页 |
| 2.3.4 PCR鉴定 | 第20-21页 |
| 2.4 实验结果 | 第21-24页 |
| 2.4.1 质粒提取的结果 | 第21-22页 |
| 2.4.2 抗除草剂抗性筛选 | 第22-23页 |
| 2.4.3 PCR的鉴定结果 | 第23-24页 |
| 2.5 讨论 | 第24-25页 |
| 2.6 本章小结 | 第25-26页 |
| 第3章 抗逆性鉴定及突变体筛选 | 第26-32页 |
| 3.1 概述 | 第26-27页 |
| 3.2 主要实验材料、试剂及仪器 | 第27页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第27页 |
| 3.2.2 主要实验试剂 | 第27页 |
| 3.2.3 主要实验仪器 | 第27页 |
| 3.3 实验方法 | 第27-28页 |
| 3.3.1 转基因株系的耐盐筛选 | 第27页 |
| 3.3.2 转基因株系的抗旱筛选 | 第27页 |
| 3.3.3 抗除草剂极限实验 | 第27-28页 |
| 3.4 实验结果 | 第28-30页 |
| 3.4.1 获得耐盐株系 | 第28页 |
| 3.4.2 获得抗旱株系 | 第28页 |
| 3.4.3 抗除草剂极限实验结果 | 第28-29页 |
| 3.4.4 突变体筛选 | 第29-30页 |
| 3.5 讨论 | 第30-31页 |
| 3.6 本章小结 | 第31-32页 |
| 第4章 Southern杂交技术 | 第32-48页 |
| 4.1 概述 | 第32页 |
| 4.2 实验材料、试剂及仪器 | 第32-34页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第32-33页 |
| 4.2.2 主要实验试剂 | 第33-34页 |
| 4.2.3 实验仪器 | 第34页 |
| 4.3 实验方法 | 第34-40页 |
| 4.3.1 DNA的提取 | 第34-35页 |
| 4.3.2 酶切 | 第35-36页 |
| 4.3.3 琼脂糖凝胶电泳 | 第36页 |
| 4.3.4 转膜 | 第36-37页 |
| 4.3.5 杂交 | 第37-40页 |
| 4.3.6 洗膜 | 第40页 |
| 4.4 实验结果 | 第40-44页 |
| 4.4.1 DNA定量结果 | 第40-41页 |
| 4.4.2 酶切及转膜结果 | 第41页 |
| 4.4.3 DNA上样量大小的选择 | 第41-42页 |
| 4.4.4 探针标记效率 | 第42页 |
| 4.4.5 严谨洗涤时间的选择 | 第42-43页 |
| 4.4.6 8981 株系的Southern杂交结果 | 第43-44页 |
| 4.5 讨论 | 第44-46页 |
| 4.5.1 DNA样品提取质量对杂交结果的影响 | 第44页 |
| 4.5.2 酶切体系对杂交结果的影响 | 第44页 |
| 4.5.3 基因组DNA酶切产物的电泳 | 第44-45页 |
| 4.5.4 探针标记效率的影响因素 | 第45页 |
| 4.5.5 杂交背景的影响因素 | 第45页 |
| 4.5.6 杂交条件的控制 | 第45页 |
| 4.5.7 洗涤时间的控制 | 第45-46页 |
| 4.5.8 杂交膜的保存 | 第46页 |
| 4.6 本章小结 | 第46-48页 |
| 第5章 TAIL-PCR分析目的基因的插入位点 | 第48-60页 |
| 5.1 概述 | 第48页 |
| 5.2 实验材料、试剂与仪器设备 | 第48-49页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第48页 |
| 5.2.2 实验试剂 | 第48页 |
| 5.2.3 实验仪器 | 第48-49页 |
| 5.3 实验方法 | 第49-50页 |
| 5.3.1 特异引物的设计 | 第49页 |
| 5.3.2 兼并引物的合成 | 第49页 |
| 5.3.3 反应体系的构建 | 第49-50页 |
| 5.3.4 反应程序 | 第50页 |
| 5.4 实验结果 | 第50-57页 |
| 5.5 讨论 | 第57-58页 |
| 5.6 本章小结 | 第58-60页 |
| 结论 | 第60-62页 |
| 附录 | 第62-66页 |
| 参考文献 | 第66-70页 |
| 致谢 | 第70页 |