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Tollip基因在牛肺泡上皮细胞中抗结核杆菌感染免疫调节功能的研究

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
第一章 结核病及其防治的研究进展第13-24页
    1.1 结核病的研究概况第13-16页
        1.1.1 肺结核简介第13-14页
        1.1.2 抗结核免疫的研究近况第14-16页
    1.2 TLRs 的研究进展第16-18页
        1.2.1 TLRs 的简介第16-17页
        1.2.2 TLRs 结构和分布特点第17页
        1.2.3 TLRs 识别的 PAMP 类型第17页
        1.2.4 TLRs 介导信号传导第17-18页
        1.2.5 TLRs 与结核分枝杆菌感染第18页
    1.3 Tollip 研究进展第18-21页
        1.3.1 Tollip 的结构、表达与降解第18-19页
        1.3.2 Tollip 功能第19-20页
        1.3.3 Tollip 与疾病第20-21页
    1.4 肺泡上皮细胞的研进展第21-24页
        1.4.1 肺泡上皮细胞类型第21页
        1.4.2 AEC 与纤维化第21-22页
        1.4.3 AEC 的增殖和修复第22-23页
        1.4.4 AEC 与结核杆菌第23-24页
第二章 牛胎儿皮肤成纤维细胞和肺泡上皮细胞的分离培养及传代第24-29页
    2.1 材料与方法第24-25页
        2.1.1 实验动物第24页
        2.1.2 实验材料第24-25页
    2.2 实验方法第25-26页
        2.2.1 牛胎儿皮肤成纤维细胞和肺泡上皮细胞的分离和培养第25页
        2.2.2 BFFB 和 BAEC 的传代第25页
        2.2.3 BFFB 和 BAEC 的冻存第25-26页
        2.2.4 BFFB 和 BAEC 的复苏第26页
    2.3 结果第26-27页
        2.3.1 BFFB 的生长特性第26页
        2.3.2 BAEC 的生长特性第26-27页
    2.4 讨论第27-28页
    2.5 小结第28-29页
第三章 Tollip 在牛成纤维细胞、肺泡上皮细胞和不同组织器官中的相对表达情况第29-35页
    3.1 材料与方法第29页
        3.1.1 实验动物和细胞第29页
        3.1.2 实验材料第29页
    3.2 实验方法第29-31页
        3.2.1 牛不同组织器官、成纤维细胞和肺泡上皮细胞总 RNA 的提取和反转录第29-30页
        3.2.2 定量引物设计第30-31页
    3.3 结果第31-33页
        3.3.1 Tollip 在牛胎儿皮肤成纤维细胞和牛肺泡上皮细胞中的表达情况第31-32页
        3.3.2 Tollip 在牛不同组织器官中的相对表达情况第32-33页
    3.4 讨论第33页
    3.5 小结第33-35页
第四章 Tollip 的真核表达载体的构建及验证第35-45页
    4.1 材料与方法第35-37页
        4.1.1 实验细胞第35页
        4.1.2 实验材料第35-37页
    4.2 实验方法第37-42页
        4.2.1 引物设计第37页
        4.2.2 牛 Tollip 基因真核表达载体的构建第37-40页
        4.2.3 细胞转染第40-41页
        4.2.4 实时定量 PCR第41页
        4.2.5 免疫荧光染色第41页
        4.2.6 蛋白免疫印迹第41-42页
    4.3 结果第42-44页
    4.4 讨论第44页
    4.5 小结第44-45页
第五章 牛肺泡上皮细胞中 Tollip 的过表达和干扰对细胞因子表达影响第45-53页
    5.1 材料与方法第45页
        5.1.1 实验细胞第45页
        5.1.2 实验材料第45页
    5.2 实验方法第45-47页
        5.2.1 引物设计第45-46页
        5.2.2 细胞转染第46页
        5.2.3 实时定量 PCR第46-47页
        5.2.4 免疫荧光染色第47页
    5.3 结果第47-51页
        5.3.1 牛肺泡上皮细胞中过表达 Tollip 后对细胞因子的影响第47-48页
        5.3.2 牛肺泡上皮细胞中干扰 Tollip 后对细胞因子的影响第48页
        5.3.3 不同处理对牛肺泡上皮细胞中相关细胞因子表达的影响第48-51页
    5.4 讨论第51页
    5.5 小结第51-53页
全文结论第53-54页
本研究的创新点与进一步研究计划第54-55页
参考文献第55-63页
缩略语简表第63-64页
附录第64-65页
致谢第65-66页
作者简介第66页

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