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松材线虫携带的荧光假单胞菌GcM5-1A过氧化物酶的研究

摘要第1-3页
Abstract第3-7页
引言第7-12页
第一章 荧光假单胞菌GCM5-1A胞外木质素过氧化物酶的初步纯化及性质研究第12-23页
 1 材料与方法第12-16页
   ·材料第12-13页
     ·菌株第12页
     ·主要试剂第12页
     ·主要仪器设备第12-13页
   ·方法第13-16页
     ·细菌培养第13页
     ·黑松愈伤组织培养及黑松愈伤组织悬浮细胞的制备第13-14页
     ·生物活性测定第14页
     ·木质素过氧化物酶的酶活测定及蛋白含量测定第14页
     ·木质素过氧化物酶的分离纯化第14-15页
     ·温度对酶活的影响第15页
     ·酶的热稳定性第15页
     ·pH对酶活的影响第15页
     ·酶的pH稳定性第15页
     ·不同金属离子对酶活的影响第15-16页
     ·抑制剂对酶活的影响第16页
     ·吸收光谱测定第16页
 2 结果与分析第16-23页
   ·GcM5-1A菌株培养液经硫酸铵分级沉淀后各组分的毒性测定及LiP活性分析第16-17页
   ·GcM5-1A菌株胞外木质素过氧化物酶的初步纯化第17-18页
   ·GcM5-1A菌株胞外LiP酶学性质测定第18-23页
     ·温度对酶活力的影响第18页
     ·pH对酶活力的影响第18-19页
     ·酶的温度稳定性第19页
     ·酶的pH稳定性第19-20页
     ·金属离子对酶活的影响第20-21页
     ·抑制剂对酶活的影响第21页
     ·吸收光谱测定第21-23页
第二章 荧光假单胞菌GCM5-1A基因组文库的构建及毒素基因的筛选和克隆表达第23-40页
 1 材料与方法第23-33页
   ·材料第23页
     ·菌株第23页
     ·主要试剂第23页
   ·方法第23-33页
     ·荧光假单胞菌GcM5-1A菌株基因组文库的构建第23-26页
     ·毒素基因的筛选第26-27页
     ·基因序列分析第27页
     ·克隆第27-30页
     ·阳性克隆的扩大培养及目的蛋白的分离纯化第30-31页
     ·黑松切根苗以及愈伤组织悬浮细胞的制备第31-32页
     ·重组蛋白对黑松悬浮细胞的毒性第32页
     ·重组蛋白对黑松切根幼苗的毒性第32页
     ·HPLC分析重组蛋白对黑松松枝提取物的影响第32-33页
 2 结果与分析第33-40页
   ·荧光假单胞菌基因组文库的构建第33页
   ·毒素基因的分离集DNA序列分析第33-35页
   ·毒素基因的克隆、表达与纯化第35-36页
   ·重组蛋白对黑松悬浮细胞及黑松切根苗的毒性测定第36-37页
   ·重组蛋白对黑松切根苗萎蔫率测定第37-38页
   ·HPLC分析重组蛋白对黑松松枝提取物的影响第38-40页
结论第40-41页
参考文献第41-49页
综述第49-72页
 参考文献第64-72页
攻读学位期间的研究成果第72-73页
致谢第73-74页

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