| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第11-19页 |
| 1.1 体细胞克隆概述 | 第11-15页 |
| 1.1.1 体细胞克隆现状及存在问题 | 第11-12页 |
| 1.1.2 细胞核重新编程概述 | 第12-13页 |
| 1.1.3 影响体细胞克隆效率因素 | 第13-15页 |
| 1.2 组蛋白乙酰化研究概况 | 第15-17页 |
| 1.2.1 组蛋白乙酰基转移酶 | 第15页 |
| 1.2.2 组蛋白去乙酰化酶 | 第15-16页 |
| 1.2.3 组蛋白去乙酰化酶抑制剂 | 第16-17页 |
| 1.3 组蛋白乙酰化与细胞核重新编程 | 第17页 |
| 1.4 本实验目的和意义 | 第17-19页 |
| 2 材料方法 | 第19-27页 |
| 2.1 实验药品和主要仪器 | 第19页 |
| 2.1.1 实验药品 | 第19页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第19页 |
| 2.2 实验动物 | 第19-20页 |
| 2.3 主要溶液配制 | 第20-21页 |
| 2.4 原代胎儿成纤维细胞的获得和原代培养 | 第21页 |
| 2.4.1. 组织块培养法 | 第21页 |
| 2.5 成纤维细胞的传代、冻存及复苏 | 第21-22页 |
| 2.5.1 成纤维细胞的传代 | 第21-22页 |
| 2.5.2 牛成纤维细胞的冻存 | 第22页 |
| 2.5.3 牛成纤维细胞的复苏 | 第22页 |
| 2.6 细胞计数与生长曲线的测定 | 第22-23页 |
| 2.6.1 细胞计数 | 第22-23页 |
| 2.6.2 测细胞生长曲线 | 第23页 |
| 2.7 MTT法测细胞活力 | 第23页 |
| 2.8 核型分析 | 第23-24页 |
| 2.9 细胞周期的测定 | 第24页 |
| 2.10 REAL-TIME PCR | 第24-26页 |
| 2.10.1 总RNA的提取 | 第24-25页 |
| 2.10.2 反转录 | 第25页 |
| 2.10.3 Real-Time PCR | 第25-26页 |
| 2.11 数据统计分析 | 第26-27页 |
| 3 结果 | 第27-36页 |
| 3.1 组蛋白乙酰化酶抑制剂对牛成纤维细胞增殖的影响 | 第27-29页 |
| 3.1.1 TSA处理组生长曲线的测定 | 第27-28页 |
| 3.1.2 VPA处理组生长曲线的测定 | 第28-29页 |
| 3.2 TSA和VPA处理后对牛胎儿成纤维细胞形态的影响 | 第29-31页 |
| 3.3 TSA和VPA处理时间对牛成纤维细胞细胞活力的影响 | 第31-32页 |
| 3.4 TSA和VPA处理对牛纤维细胞染色体整倍性的影响 | 第32-33页 |
| 3.5 TSA和VPA对细胞周期的影响 | 第33-34页 |
| 3.6 TSA和VPA对牛成纤维细胞转录因子的影响 | 第34-36页 |
| 4 讨论 | 第36-39页 |
| 4.1 TSA和VPA对牛成纤维细胞体外生长的影响 | 第36-37页 |
| 4.2 TSA和VPA处理对牛成纤维细胞细胞周期的影响 | 第37页 |
| 4.3 TSA和VPA处理对牛成纤维细胞细胞转录因子表达的影响 | 第37-39页 |
| 5 结论 | 第39-40页 |
| 致谢 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-49页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第49页 |
