摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1 前言 | 第11-19页 |
1.1 卵母细胞在冷冻过程中的损伤机制 | 第11-12页 |
1.2 冷冻保存的方法 | 第12-13页 |
1.2.1 慢速冷冻法(Slow freezing) | 第12页 |
1.2.2 快速冷冻法(Rapid freezing) | 第12页 |
1.2.3 超快速冷冻法(Ultra rapid freezing) | 第12-13页 |
1.2.4 玻璃化冷冻(Vitrification) | 第13页 |
1.3 玻璃化冷冻的原理 | 第13-15页 |
1.3.1 玻璃化冷冻的定义 | 第13页 |
1.3.2 冷冻保护剂的作用 | 第13-14页 |
1.3.3 玻璃化冷冻保护剂的选择 | 第14页 |
1.3.4 玻璃化冷冻载体的选择 | 第14-15页 |
1.4 冷冻对卵母细胞结构的损伤 | 第15-16页 |
1.4.1 冷冻对透明带的损伤 | 第15页 |
1.4.2 冷冻对细胞膜的损伤 | 第15-16页 |
1.4.3 冷冻对细胞骨架的损伤 | 第16页 |
1.5 猪卵母细胞体外受精的研究 | 第16-18页 |
1.5.1 体外受精技术的研究进展 | 第16页 |
1.5.2 卵丘细胞对卵母细胞的作用 | 第16-17页 |
1.5.3 卵丘细胞对卵母细胞受精及后期发育能力的影响 | 第17页 |
1.5.4 精子的体外获能 | 第17-18页 |
1.5.5 影响体外受精效果的因素 | 第18页 |
1.6 本研究的目的与意义 | 第18-19页 |
2 材料方法 | 第19-25页 |
2.1 实验材料 | 第19-21页 |
2.1.1 实验动物 | 第19页 |
2.1.2 主要仪器设备与耗材 | 第19页 |
2.1.3 主要试剂 | 第19-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-23页 |
2.2.1 猪卵母细胞体外成熟 | 第21页 |
2.2.2 猪卵母细胞成熟的外部鉴定 | 第21-22页 |
2.2.3 猪卵母细胞的孤雌激活与培养 | 第22页 |
2.2.4 猪卵母细胞胞质成熟鉴定 | 第22页 |
2.2.5 猪卵母细胞的冷冻与解冻 | 第22-23页 |
2.2.6 猪卵母细胞的存活率检验 | 第23页 |
2.2.7 猪卵母细胞的体外受精 | 第23页 |
2.2.8 实验数据分析 | 第23页 |
2.3 实验设计 | 第23-25页 |
2.3.1 不同冷冻液对卵母细胞的毒性影响 | 第24页 |
2.3.2 不同载体对卵母细胞的冷冻效果的影响 | 第24页 |
2.3.3 冷冻前后卵母细胞皮质颗粒分布的变化 | 第24页 |
2.3.4 卵丘细胞对体外受精效果的影响 | 第24页 |
2.3.5 冷冻对卵母细胞后期发育能力的影响 | 第24-25页 |
3 结果与分析 | 第25-34页 |
3.1 不同冷冻液组的毒性对卵母细胞的影响 | 第25页 |
3.2 不同冷冻液对卵母细胞冷冻后存活率的影响 | 第25-28页 |
3.3 不同载体冷冻后对细胞存活率的影响 | 第28页 |
3.4 冷冻对卵母细胞皮质颗粒分布的影响 | 第28-32页 |
3.5 卵丘细胞对卵母细胞的体外受精的影响 | 第32页 |
3.6 冷冻对卵母细胞后期发育能力的影响 | 第32-34页 |
4 讨论 | 第34-37页 |
4.1 不同冷冻液对卵母细胞的冷冻效果及毒性影响 | 第34页 |
4.2 不同载体对卵母细胞冷冻效果的影响 | 第34-35页 |
4.3 冷冻对卵母细胞皮质颗粒分布的影响 | 第35页 |
4.4 卵丘细胞对卵母细胞的体外受精的影响 | 第35-36页 |
4.5 冷冻对卵母细胞后期发育能力的影响 | 第36-37页 |
5 结论 | 第37-38页 |
致谢 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-44页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第44页 |