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猪MII期卵母细胞冷冻及体外受精的研究

摘要第8-9页
Abstract第9-10页
1 前言第11-19页
    1.1 卵母细胞在冷冻过程中的损伤机制第11-12页
    1.2 冷冻保存的方法第12-13页
        1.2.1 慢速冷冻法(Slow freezing)第12页
        1.2.2 快速冷冻法(Rapid freezing)第12页
        1.2.3 超快速冷冻法(Ultra rapid freezing)第12-13页
        1.2.4 玻璃化冷冻(Vitrification)第13页
    1.3 玻璃化冷冻的原理第13-15页
        1.3.1 玻璃化冷冻的定义第13页
        1.3.2 冷冻保护剂的作用第13-14页
        1.3.3 玻璃化冷冻保护剂的选择第14页
        1.3.4 玻璃化冷冻载体的选择第14-15页
    1.4 冷冻对卵母细胞结构的损伤第15-16页
        1.4.1 冷冻对透明带的损伤第15页
        1.4.2 冷冻对细胞膜的损伤第15-16页
        1.4.3 冷冻对细胞骨架的损伤第16页
    1.5 猪卵母细胞体外受精的研究第16-18页
        1.5.1 体外受精技术的研究进展第16页
        1.5.2 卵丘细胞对卵母细胞的作用第16-17页
        1.5.3 卵丘细胞对卵母细胞受精及后期发育能力的影响第17页
        1.5.4 精子的体外获能第17-18页
        1.5.5 影响体外受精效果的因素第18页
    1.6 本研究的目的与意义第18-19页
2 材料方法第19-25页
    2.1 实验材料第19-21页
        2.1.1 实验动物第19页
        2.1.2 主要仪器设备与耗材第19页
        2.1.3 主要试剂第19-21页
    2.2 实验方法第21-23页
        2.2.1 猪卵母细胞体外成熟第21页
        2.2.2 猪卵母细胞成熟的外部鉴定第21-22页
        2.2.3 猪卵母细胞的孤雌激活与培养第22页
        2.2.4 猪卵母细胞胞质成熟鉴定第22页
        2.2.5 猪卵母细胞的冷冻与解冻第22-23页
        2.2.6 猪卵母细胞的存活率检验第23页
        2.2.7 猪卵母细胞的体外受精第23页
        2.2.8 实验数据分析第23页
    2.3 实验设计第23-25页
        2.3.1 不同冷冻液对卵母细胞的毒性影响第24页
        2.3.2 不同载体对卵母细胞的冷冻效果的影响第24页
        2.3.3 冷冻前后卵母细胞皮质颗粒分布的变化第24页
        2.3.4 卵丘细胞对体外受精效果的影响第24页
        2.3.5 冷冻对卵母细胞后期发育能力的影响第24-25页
3 结果与分析第25-34页
    3.1 不同冷冻液组的毒性对卵母细胞的影响第25页
    3.2 不同冷冻液对卵母细胞冷冻后存活率的影响第25-28页
    3.3 不同载体冷冻后对细胞存活率的影响第28页
    3.4 冷冻对卵母细胞皮质颗粒分布的影响第28-32页
    3.5 卵丘细胞对卵母细胞的体外受精的影响第32页
    3.6 冷冻对卵母细胞后期发育能力的影响第32-34页
4 讨论第34-37页
    4.1 不同冷冻液对卵母细胞的冷冻效果及毒性影响第34页
    4.2 不同载体对卵母细胞冷冻效果的影响第34-35页
    4.3 冷冻对卵母细胞皮质颗粒分布的影响第35页
    4.4 卵丘细胞对卵母细胞的体外受精的影响第35-36页
    4.5 冷冻对卵母细胞后期发育能力的影响第36-37页
5 结论第37-38页
致谢第38-39页
参考文献第39-44页
攻读学位期间发表的学术论文第44页

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