| 符号说明 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第12-19页 |
| 1.1 鸡球虫病的危害 | 第12页 |
| 1.2 鸡球虫病原特性 | 第12-13页 |
| 1.3 球虫的免疫原性 | 第13-14页 |
| 1.4 柔嫩艾美耳球虫微线及微线蛋白 | 第14-15页 |
| 1.5 柔嫩艾美尔球虫 EtMIC-1 和 EtMIC-2 研究进展 | 第15-18页 |
| 1.6 柔嫩艾美耳球虫内生性发育不同阶段的划分 | 第18页 |
| 1.7 本研究的目的与意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-39页 |
| 2.1 材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 虫种及细胞 | 第19页 |
| 2.1.2 试验动物 | 第19页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.4 质粒及受体菌 | 第20页 |
| 2.1.5 主要设备及仪器 | 第20页 |
| 2.2 方法 | 第20-39页 |
| 2.2.1 主要试剂配制 | 第20-24页 |
| 2.2.2 EtMIC1 和 EtMIC2 的克隆构建与原核表达 | 第24-29页 |
| 2.2.3 EtMic1 和 EtMic2 重组蛋白的表达和纯化 | 第29-32页 |
| 2.2.4 EtMic1 和 EtMic2 蛋白单克隆抗体的制备 | 第32-35页 |
| 2.2.5 EtMic1 和 EtMic2 蛋白单克隆抗体的鉴定与应用 | 第35-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-50页 |
| 3.1 EtMIC1 和 EtMIC2 基因的克隆 | 第39-42页 |
| 3.1.1 EtMIC1 和 EtMIC2 基因片段的 PCR 扩增 | 第39-40页 |
| 3.1.2 pET-30a (+)-EtMIC1 和 pET-30a (+)-EtMIC2 质粒转化 top10 后菌落 PCR 结果 | 第40-41页 |
| 3.1.3 重组质粒酶切鉴定结果 | 第41-42页 |
| 3.2 EtMIC1 和 EtMIC2 基因的表达与蛋白纯化 | 第42-43页 |
| 3.2.1 EtMIC1 和 EtMIC2 基因的表达与蛋白纯化 | 第42-43页 |
| 3.2.2 原核表达 EtMIC1 和 EtMIC2 蛋白的浓度测定 | 第43页 |
| 3.3 EtMIC1 和 EtMIC2 蛋白单克隆抗体的制备 | 第43-44页 |
| 3.3.1 小鼠血清抗体效价的测定 | 第43页 |
| 3.3.2 杂交瘤细胞的筛选 | 第43-44页 |
| 3.4 单克隆抗体的鉴定 | 第44-47页 |
| 3.4.1 单克隆抗体效价的测定 | 第44页 |
| 3.4.2 单克隆抗体的亚型鉴定 | 第44页 |
| 3.4.3 单克隆抗体的特异性鉴定 | 第44-47页 |
| 3.5 EtMIC1 和 EtMIC2 蛋白在球虫内生性发育阶段表达的动态变化 | 第47-50页 |
| 3.5.1 单抗检测 | 第47-49页 |
| 3.5.2 Western blot 检测 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 6 参考文献 | 第54-60页 |
| 7 致谢 | 第60-61页 |
| 8 硕士期间论文发表情况 | 第61页 |
