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济宁青山羊毛囊不同发育期FGF5基因表达及毛囊体外培养研究

附件第4-5页
英文缩略词第5-9页
中文摘要第9-11页
Abstract第11-12页
1 引言第13-25页
    1.1 FGF5 基因研究进展第13-14页
        1.1.1 FGF 的种类第13-14页
    1.2 皮肤毛囊概述第14-21页
        1.2.1 动物皮肤、被毛的基本结构及其功能第14-15页
        1.2.2 毛囊的基本结构及特点第15页
        1.2.3 毛囊的生长发育周期特征第15-16页
        1.2.4 动物毛囊形态发生的过程第16页
        1.2.5 动物毛囊形态发生的分子机制第16-21页
    1.3 哺乳动物毛色形成第21-23页
        1.3.1 黑色素的性质、形成及功能第21-22页
        1.3.2 哺乳动物毛色形成机制第22-23页
        1.3.3 影响动物黑色素合成的相关基因第23页
    1.4 影响体外培养的毛囊发育的细胞因子研究进展第23-24页
    1.5 实时荧光定量 PCR 技术研究进展第24页
    1.6 本研究的目的和意义第24-25页
2 材料与方法第25-35页
    2.1 实验材料与样本采集第25-26页
    2.2 仪器与试剂第26-29页
        2.2.1 实验用仪器设备第26-27页
        2.2.2 常规分子试剂第27页
        2.2.3 细菌的转化、阳性克隆的筛选所用试剂第27页
        2.2.4 毛囊培养液和主要试剂第27页
        2.2.5 质粒提取用缓冲液和试剂第27-28页
        2.2.6 RT-PCR 和 qRT-PCR 相关试剂第28页
        2.2.7 组织切片试剂第28-29页
    2.3 实验方法第29-35页
        2.3.1 合成并设计引物第29页
        2.3.2 青山羊皮肤组织的 RNA 提取与检测第29-30页
        2.3.3 cDNA 链合成第30-31页
        2.3.4 IGF-1、FGF5 基因 PCR 扩增及检测第31页
        2.3.5 DNA 片段再收集第31-32页
        2.3.6 连接 PCR 产物与载体第32页
        2.3.7 大肠杆菌的转化及测序第32-33页
        2.3.8 荧光定量 PCR第33页
        2.3.9 皮肤组织的石蜡切片与显微观察第33-34页
        2.3.10 完整毛囊的分离第34页
        2.3.11 正交实验设计和分组第34页
        2.3.12 实验数据的统计分析方法第34-35页
3 结果与分析第35-46页
    3.1 济宁青山羊皮肤毛囊形态结构的发育性变化规律第35-38页
        3.1.1 青山羊皮肤组织的发育性变化规律第35-36页
        3.1.2 成年羊皮肤不同部位的组织学变化第36页
        3.1.3 青山羊毛囊的发育性变化规律第36-37页
        3.1.4 成年羊皮肤不同部位毛囊的组织学形态第37-38页
    3.2 青山羊皮肤 IGF-1 基因的差异表达与发育性变化规律第38-39页
        3.2.1 IGF-1 的荧光定量标准曲线与熔解曲线第38页
        3.2.2 青山羊皮肤组织中 IGF-1 基因的差异表达与发育性变化第38-39页
        3.2.3 成年青山羊皮肤不同部位 IGF-1 基因的差异表达第39页
    3.3 IGF-1、FGF5 基因片段扩增第39-41页
    3.4 实时荧光定量 PCR第41页
    3.5 IGF-1 基因在不同时期济宁青山羊皮肤毛囊中的 mRNA 表达差异第41-42页
    3.6 FGF5 基因在不同时期济宁青山羊皮肤毛囊中的 mRNA 表达水平第42-43页
    3.7 体外培养条件下山羊游离毛囊形态的变化第43-44页
    3.8 不同培养温度对山羊游离毛囊体外生长的影响第44-45页
    3.9 添加不同浓度 IGF-1 和 PRL 对体外培养毛囊生长的影响第45-46页
4 讨论第46-49页
    4.1 济宁青山羊成年羊皮肤的组织学结构第46页
    4.2 济宁青山羊毛囊的组织学结构和发育性变化规律第46页
    4.3 关于不同发育阶段和不同时期表达水平 IGF-1 基因的差异表达第46-47页
    4.4 FGF5 基因在不同时期表达水平第47-48页
    4.5 济宁青山羊皮肤毛囊培养条件的优化第48-49页
5 结论第49-51页
参考文献第51-58页
致谢第58-59页
攻读学位期间发表论文情况第59页

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