| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 引言 | 第13-23页 |
| 1.1 细胞死亡 | 第13-14页 |
| 1.1.1 细胞凋亡 | 第13页 |
| 1.1.2 细胞坏死 | 第13-14页 |
| 1.1.3 细胞凋亡与细胞坏死的关系 | 第14页 |
| 1.2 程序性坏死 | 第14-16页 |
| 1.2.1 程序性坏死的特征 | 第14-15页 |
| 1.2.2 程序性坏死的机制 | 第15-16页 |
| 1.3 受体相互作用蛋白 | 第16-18页 |
| 1.3.1 RIP1 | 第16-17页 |
| 1.3.2 RIP2 | 第17页 |
| 1.3.3 RIP3 | 第17页 |
| 1.3.4 RIP4 | 第17-18页 |
| 1.4 苦参碱的抗肿瘤研究 | 第18-21页 |
| 1.4.1 抑制肿瘤细胞增殖和诱导分化 | 第18-19页 |
| 1.4.2 苦参碱诱导肿瘤细胞凋亡 | 第19-20页 |
| 1.4.3 苦参碱对原癌基因及抑癌基因表达的影响 | 第20页 |
| 1.4.4 苦参碱抑制细胞粘附与浸润转移 | 第20-21页 |
| 1.4.5 苦参碱可逆转肿瘤细胞的耐药性 | 第21页 |
| 1.4.6 苦参碱调节肿瘤宿主免疫功能 | 第21页 |
| 1.5 本课题研究的目标、内容与意义 | 第21-23页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第23-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-28页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第23页 |
| 2.1.2 工具酶和抗体 | 第23页 |
| 2.1.3 主要化学试剂和耗材 | 第23-24页 |
| 2.1.4 细胞培养试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第25-26页 |
| 2.1.6 主要溶液配制 | 第26-28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-37页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第28页 |
| 2.2.2 细胞死亡率检测(Annexin V-FITC/PI双染法) | 第28-29页 |
| 2.2.3 细胞全蛋白抽提 | 第29页 |
| 2.2.4 分离抽提细胞核、质和线粒体蛋白 | 第29页 |
| 2.2.5 提取组蛋白 | 第29-30页 |
| 2.2.6 免疫共沉淀 | 第30页 |
| 2.2.7 BCA法测定蛋白浓度 | 第30-31页 |
| 2.2.8 Western Blot | 第31-33页 |
| 2.2.9 质粒的中量提取 | 第33-34页 |
| 2.2.10 脂质体转染 | 第34页 |
| 2.2.11 PCR | 第34-35页 |
| 2.2.12 免疫荧光 | 第35-36页 |
| 2.2.13 细胞内ROS的测定 | 第36页 |
| 2.2.14 数据处理 | 第36-37页 |
| 第三章 实验结果 | 第37-47页 |
| 3.1 苦参碱影响胆管癌细胞QBC939的生物学功能 | 第37-39页 |
| 3.1.1 苦参碱对人胆管癌细胞QBC939死亡率的影响 | 第37页 |
| 3.1.2 苦参碱诱导人胆管癌细胞QBC939的死亡现象不被Caspase抑制剂所抑制 | 第37-38页 |
| 3.1.3 电镜下,苦参碱诱导人胆管癌细胞死亡呈现坏死状态 | 第38-39页 |
| 3.2 苦参碱诱导人胆管癌细胞QBC939发生程序性坏死的分子机制 | 第39-43页 |
| 3.2.1 苦参碱诱导人胆管癌细胞QBC939的坏死能被Nec-1所抑制 | 第39-41页 |
| 3.2.2 苦参碱诱导人胆管癌细胞QBC939在不表达RIP3的情况下RIP1发生磷酸化 | 第41-42页 |
| 3.2.3 苦参碱影响人胆管癌细胞QBC939中MLKL的定位 | 第42-43页 |
| 3.3 苦参碱影响胆管癌细胞中AIF和H2AX的表达 | 第43-45页 |
| 3.3.1 苦参碱对人胆管癌细胞中AIF定位的影响 | 第43-44页 |
| 3.3.2 苦参碱诱导胆管癌细胞中H2AX磷酸化 | 第44页 |
| 3.3.3 苦参碱诱导胆管癌细胞中H2AX磷酸化 | 第44-45页 |
| 3.4 苦参碱诱导人胆管癌细胞程序性坏死伴有ROS的产生 | 第45-47页 |
| 第四章 讨论 | 第47-51页 |
| 第五章 结论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
