| 符号说明 | 第4-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第13-28页 |
| 1.1 花粉的发育 | 第13-14页 |
| 1.2 雌雄配子体的相互作用 | 第14-17页 |
| 1.2.1 花粉在柱头上的黏附和水合 | 第14页 |
| 1.2.2 花粉在柱头上的萌发和花粉管极性生长 | 第14-15页 |
| 1.2.3 花粉管导向胚珠 | 第15-16页 |
| 1.2.4 雌雄配子识别与融合 | 第16-17页 |
| 1.3 硫氧还蛋白还原酶(NTR)和谷胱甘肽还原酶(GR)的相关研究 | 第17-26页 |
| 1.3.1 植物中的硫氧还蛋白依赖的氧化还原系统 | 第18-22页 |
| 1.3.1.1 TRX的还原 | 第18-19页 |
| 1.3.1.2 TRX的功能研究 | 第19-21页 |
| 1.3.1.3 NTR的研究 | 第21-22页 |
| 1.3.2 植物中的谷氧还蛋白依赖的氧化还原系统 | 第22-24页 |
| 1.3.2.1 谷胱甘肽的合成、还原和定位 | 第22-23页 |
| 1.3.2.2 GRX的功能研究 | 第23-24页 |
| 1.3.3 胞质和线粒体中TRX、GRX和GSSG的还原途径 | 第24-26页 |
| 1.3.3.1 GRX还原TRX | 第24-25页 |
| 1.3.3.2 TRX还原GSSG | 第25页 |
| 1.3.3.3 非典型的还原 | 第25-26页 |
| 1.3.4 硫氧还蛋白和谷氧还蛋白依赖的氧化还原系统与ROS的关系 | 第26页 |
| 1.3.4.1 植物发育过程中的ROS | 第26页 |
| 1.3.4.2 ROS的清除 | 第26页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第26-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-46页 |
| 2.1 实验材料 | 第28-29页 |
| 2.1.1 植物材料及生长条件 | 第28页 |
| 2.1.2 菌株及载体 | 第28页 |
| 2.1.3 各种酶和生化试剂 | 第28页 |
| 2.1.4 引物及序列 | 第28-29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-46页 |
| 2.2.1 表达载体的构建 | 第29-34页 |
| 2.2.1.1 引物设计 | 第29页 |
| 2.2.1.2 PCR扩增目的片段 | 第29-30页 |
| 2.2.1.3 琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物并回收 | 第30页 |
| 2.2.1.4 目的片段连接克隆载体 | 第30页 |
| 2.2.1.5 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第30-31页 |
| 2.2.1.6 转化大肠杆菌感受态细胞 | 第31页 |
| 2.2.1.7 菌落PCR鉴定 | 第31-32页 |
| 2.2.1.8 大肠杆菌质粒的提取 | 第32页 |
| 2.2.1.9 目的片段与表达质粒的酶切连接 | 第32-33页 |
| 2.2.1.10 表达质粒的酶切验证 | 第33-34页 |
| 2.2.2 拟南芥的种子处理、培养与鉴定 | 第34-37页 |
| 2.2.2.1 拟南芥的种子处理 | 第34页 |
| 2.2.2.2 拟南芥总DNA的提取 | 第34-35页 |
| 2.2.2.3 拟南芥基因组DNA的鉴定 | 第35页 |
| 2.2.2.4 拟南芥总RNA的提取 | 第35-36页 |
| 2.2.2.5 拟南芥RNA的反转录 | 第36-37页 |
| 2.2.3 农杆菌转化拟南芥 | 第37-38页 |
| 2.2.3.1 农杆菌感受态细胞(GV3101)的转化 | 第37页 |
| 2.2.3.2 农杆菌转化拟南芥 | 第37-38页 |
| 2.2.4 花粉的扫描电镜观察 | 第38-39页 |
| 2.2.5 花粉的DAPI染色 | 第39页 |
| 2.2.6 花粉的亚历山大染色 | 第39页 |
| 2.2.7 花粉的FDA染色 | 第39-40页 |
| 2.2.8 花粉的体外萌发 | 第40页 |
| 2.2.9 花粉的苯胺蓝染色 | 第40-41页 |
| 2.2.10 花粉的纤维素S4B染色 | 第41-42页 |
| 2.2.11 花粉的线粒体MitoTracker?DeepRedFM染色 | 第42页 |
| 2.2.12 花粉的CM-H2DCFDA染色 | 第42页 |
| 2.2.13 花粉ROS染色的定量统计分析 | 第42-43页 |
| 2.2.14 酵母筛库 | 第43-46页 |
| 2.2.14.1 酵母单转 | 第43-44页 |
| 2.2.14.2 酵母筛库 | 第44-46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-59页 |
| 3.1 gr1ntra双突变体的获得 | 第46-47页 |
| 3.2 gr1ntra双突变体遗传分析 | 第47-48页 |
| 3.2.1 gr1ntra双突变体的分离比异常 | 第47-48页 |
| 3.2.2 gr1ntra双突变体的雄配子传递效率降低 | 第48页 |
| 3.3 gr1ntra双突变体花粉发育的表型分析 | 第48-51页 |
| 3.3.1 gr1ntra双突变体的花粉外形没有明显异常 | 第48-49页 |
| 3.3.2 gr1ntra双突变体的花粉细胞核数目没有明显异常 | 第49-50页 |
| 3.3.3 gr1ntra双突变体的花粉活力没有明显异常 | 第50-51页 |
| 3.4 gr1ntra双突变体雄配子体功能分析 | 第51-56页 |
| 3.4.1 gr1ntra双突变体的花粉水合没有明显异常 | 第52页 |
| 3.4.2 gr1ntra双突变体的花粉体外萌发没有明显异常 | 第52-53页 |
| 3.4.3 gr1ntra双突变体的花粉功能异常 | 第53-54页 |
| 3.4.4 gr1ntra双突变体的花粉管生长异常 | 第54-56页 |
| 3.5 gr1ntra双突变体花粉管生长异常的机理研究 | 第56-58页 |
| 3.5.1 gr1ntra双突变体花粉壁纤维素积累正常 | 第56页 |
| 3.5.2 gr1ntra双突变体花粉线粒体异常 | 第56-57页 |
| 3.5.3 gr1ntra双突变体花粉活性氧水平升高 | 第57-58页 |
| 3.6 NTRA互作蛋白的筛选 | 第58-59页 |
| 4 讨论 | 第59-61页 |
| 5 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
