| 符号说明 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-26页 |
| 1.1 种子的发育过程 | 第11-17页 |
| 1.1.1 胚乳的发育 | 第12页 |
| 1.1.2 种皮的发育 | 第12-13页 |
| 1.1.3 胚的发育 | 第13-14页 |
| 1.1.4 胚、胚乳之间的相互作用 | 第14-15页 |
| 1.1.5 胚乳和种皮的相互作用 | 第15-17页 |
| 1.2 种子发育大小的调控 | 第17-23页 |
| 1.2.1 影响胚发育的途径 | 第17页 |
| 1.2.2 影响胚乳发育的途径 | 第17-19页 |
| 1.2.3 影响种皮发育的途径 | 第19-22页 |
| 1.2.4 其他途径(生长素) | 第22-23页 |
| 1.3 HRD3A在植物发育中的作用 | 第23-24页 |
| 1.3.1 HRD3A参与内质网胁迫反应 | 第23-24页 |
| 1.3.2 HRD1/HRD3A复合体的物理结构 | 第24页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第24-26页 |
| 2 实验材料与方法 | 第26-41页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-27页 |
| 2.1.1 植物材料及生长条件 | 第26页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第26页 |
| 2.1.3 酶、生化试剂 | 第26-27页 |
| 2.1.3.1 酶及试剂盒 | 第26页 |
| 2.1.3.2 生化试剂 | 第26-27页 |
| 2.1.4 PCR引物合成 | 第27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-41页 |
| 2.2.1 突变体的鉴定 | 第27-28页 |
| 2.2.1.1 SDS法提取拟南芥的基因组DNA | 第27-28页 |
| 2.2.1.2 PCR扩增 | 第28页 |
| 2.2.2 突变体植株中相关基因的RT-PCR | 第28-31页 |
| 2.2.2.1 总RNA的提取 | 第28-30页 |
| 2.2.2.2 检测所提RNA的质量和浓度 | 第30页 |
| 2.2.2.3 RNA反转录cDNA第一链的合成 | 第30-31页 |
| 2.2.2.4 RT-PCR反应 | 第31页 |
| 2.2.3 构建转基因表达载体 | 第31-36页 |
| 2.2.3.1 设计PCR引物 | 第31-32页 |
| 2.2.3.2 PCR扩增目的基因片段 | 第32页 |
| 2.2.3.3 DNA目的片段的回收 | 第32-33页 |
| 2.2.3.4 连接克隆载体与DNA目的片段 | 第33页 |
| 2.2.3.5 Inoue法制备大肠杆菌感受态细胞 | 第33-34页 |
| 2.2.3.6 转化大肠杆菌感受态细胞 | 第34页 |
| 2.2.3.7 大肠杆菌的菌落PCR验证 | 第34-35页 |
| 2.2.3.8 DNA序列的测定 | 第35页 |
| 2.2.3.9 质粒DNA的提取 | 第35页 |
| 2.2.3.10 质粒DNA的酶切 | 第35-36页 |
| 2.2.3.11 连接目的DNA片段与质粒DNA片段 | 第36页 |
| 2.2.4 农杆菌浸染法介导的拟南芥遗传转化 | 第36-38页 |
| 2.2.4.1 根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备 | 第36-37页 |
| 2.2.4.2 根癌农杆菌GV3101感受态细胞的转化 | 第37页 |
| 2.2.4.3 农杆菌介导的拟南芥遗传转化 | 第37-38页 |
| 2.2.5 拟南芥的种植 | 第38页 |
| 2.2.5.1 拟南芥种子的处理 | 第38页 |
| 2.2.5.2 拟南芥苗期管理 | 第38页 |
| 2.2.6 HRD3A基因在拟南芥种子发育过程中的组织定位 | 第38-40页 |
| 2.2.6.1 GUS染色 | 第39页 |
| 2.2.6.2 DIC观察拟南芥基因HRD3A在种子发育过程中的表达 | 第39-40页 |
| 2.2.7 RNA文库的构建 | 第40页 |
| 2.2.8 Illumina测序 | 第40页 |
| 2.2.9 差异表达基因GO功能分析 | 第40页 |
| 2.2.10 基因表达量分析 | 第40-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-58页 |
| 3.1 hrd3a的表型分析 | 第41-46页 |
| 3.1.1 hrd3a突变体的鉴定 | 第41页 |
| 3.1.2 hrd3a突变体表型分析 | 第41-44页 |
| 3.1.3 hrd3a-1突变体的表型互补 | 第44-46页 |
| 3.2 HRD3A的组织表达分析 | 第46-47页 |
| 3.3 hrd3a-1变突体细胞变小 | 第47-49页 |
| 3.4 HRD3A通过母性组织影响种子大小 | 第49-50页 |
| 3.5 hrd3a-1突变体种子中差异表达基因的分析 | 第50-58页 |
| 3.5.1 hrd3a-1转录组测序分析 | 第50-53页 |
| 3.5.2 hrd3a-1种子中差异表达基因的功能分类分析 | 第53-58页 |
| 3.5.2.1 hrd3a-1突变体KEGGpathway分析 | 第55-56页 |
| 3.5.2.2 HRD3A调控生长素响应因子ARF家族成员的转录 | 第56页 |
| 3.5.2.3 HRD3A调控细胞色素家族成员的转录 | 第56-58页 |
| 4 讨论 | 第58-60页 |
| 5 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
