四川地区鸭肝炎病毒流行病学调查
| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-29页 |
| 1 鸭病毒性肝炎的历史与分布 | 第14-15页 |
| 1.1 Ⅰ型鸭肝炎病毒的历史与分布 | 第14页 |
| 1.2 Ⅱ型鸭肝炎病毒的历史与分布 | 第14页 |
| 1.3 Ⅲ型鸭肝炎病毒的历史与分布 | 第14页 |
| 1.4 新型鸭肝炎病毒的历史与分布 | 第14-15页 |
| 1.5 鸭肝炎病毒的变异性 | 第15页 |
| 2 病原学 | 第15-16页 |
| 2.1 分类地位及形态结构 | 第15页 |
| 2.2 鸭肝炎病毒的培养特性 | 第15-16页 |
| 2.3 鸭肝炎病毒的生物学特 | 第16页 |
| 2.4 鸭肝炎病毒的理化特性 | 第16页 |
| 3 流行病学 | 第16-17页 |
| 4 发病机理 | 第17页 |
| 5 临床症状 | 第17页 |
| 6 病理变化 | 第17-18页 |
| 7 诊断 | 第18-24页 |
| 7.1 电镜检测 | 第18页 |
| 7.2 血清保护实验 | 第18-19页 |
| 7.3 中和试验 | 第19页 |
| 7.4 琼脂扩散试验 | 第19-20页 |
| 7.5 血凝试验 | 第20-21页 |
| 7.6 荧光抗体法 | 第21页 |
| 7.7 酶联免疫吸附试验 | 第21-23页 |
| 7.7.1 间接ELISA | 第22页 |
| 7.7.2 斑点ELISA | 第22-23页 |
| 7.7.3 双抗夹心ELISA | 第23页 |
| 7.7.4 单克隆抗体捕捉法ELISA | 第23页 |
| 7.8 其他方法 | 第23-24页 |
| 8 分子生物学研究基础 | 第24-25页 |
| 9 PCR技术的研究进展 | 第25-26页 |
| 9.1 PCR技术的基本原理 | 第26页 |
| 9.2 逆转录PCR | 第26页 |
| 10 RT-PCR技术在鸭肝炎病毒中的应用 | 第26-28页 |
| 11 研究意义 | 第28-29页 |
| 第二章 四川地区鸭肝炎病毒分离及鉴定 | 第29-38页 |
| 1 材料 | 第29页 |
| 1.1 病料 | 第29页 |
| 1.2 实验动物及鸡胚 | 第29页 |
| 1.3 试剂 | 第29页 |
| 1.4 主要仪器 | 第29页 |
| 2 方法 | 第29-32页 |
| 2.1 病毒分离 | 第30页 |
| 2.1.1 样品与处理 | 第30页 |
| 2.1.2 病毒的分离 | 第30页 |
| 2.2 病毒鉴定 | 第30-32页 |
| 2.2.1 动物回归试验 | 第30-31页 |
| 2.2.2 鸭肝炎病毒分离株的毒力测定 | 第31页 |
| 2.2.3 分离毒血凝性测定 | 第31页 |
| 2.2.4 RT-PCR鉴定 | 第31-32页 |
| 3 试验结果 | 第32-35页 |
| 3.1 鸡胚接种 | 第32页 |
| 3.2 动物回归试验结果 | 第32-33页 |
| 3.3 鸭肝炎病毒分离株的毒力测定 | 第33-34页 |
| 3.4 分离毒血凝性测定 | 第34-35页 |
| 3.5 RT-PCR鉴定 | 第35页 |
| 3.5.1 目的片断的扩增 | 第35页 |
| 3.5.2 目的片段序列测定结果分析 | 第35页 |
| 4 讨论 | 第35-38页 |
| 4.1 病毒分离途径的选择 | 第35-36页 |
| 4.2 病毒的分离 | 第36页 |
| 4.3 病毒致病性研究及病理变化研究 | 第36页 |
| 4.4 扩增产物 | 第36-37页 |
| 4.5 RT-PCR检测 | 第37-38页 |
| 第三章 鸭肝炎病毒结构基因VP1的克隆及序列分析 | 第38-58页 |
| 1 材料 | 第38页 |
| 1.1 毒株 | 第38页 |
| 1.2 试剂 | 第38页 |
| 1.3 主要仪器 | 第38页 |
| 2 方法 | 第38-40页 |
| 2.1 PCR扩增试验及序列测序 | 第38-40页 |
| 2.1.1 引物设计 | 第38-39页 |
| 2.1.2 样品RNA的提取 | 第39页 |
| 2.1.3 RT-PCR | 第39-40页 |
| 2.1.4 RT-PCR产物鉴定 | 第40页 |
| 2.1.5 基因序列的测定 | 第40页 |
| 3 实验结果 | 第40-56页 |
| 3.1 目的片断序列测定结果 | 第40-44页 |
| 3.2 VP1基因序列分析 | 第44-56页 |
| 3.2.1 核苷酸序列同源性分析 | 第44页 |
| 3.2.2 核苷酸变异位点分析 | 第44-50页 |
| 3.2.3 氨基酸序列同源性分析 | 第50-51页 |
| 3.2.4 氨基酸变异位点分析 | 第51-52页 |
| 3.2.5 抗原指数分析 | 第52-54页 |
| 3.2.6 DHV遗传进化分析 | 第54-56页 |
| 4 讨论 | 第56-58页 |
| 4.1 Ⅰ型DHV VP1基因的克隆及测序分析 | 第56页 |
| 4.2 结构蛋白VP1的抗原性 | 第56-57页 |
| 4.3 DHV基因的研究前景 | 第57-58页 |
| 第四章 全文结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-67页 |
| 附录一:版图 | 第67-69页 |
| 附录二:序列分析用到的毒株基本情况 | 第69-70页 |
| 附录三:主要溶液配制方法 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
