| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 上篇 文献综述 | 第12-31页 |
| 1 广藿香种质资源研究进展 | 第12-20页 |
| 1.1 道地性研究 | 第12-15页 |
| 1.1.1 性状和显微鉴别 | 第12-13页 |
| 1.1.2 分子鉴别 | 第13-14页 |
| 1.1.3 指纹图谱鉴别 | 第14-15页 |
| 1.2 组织培养与快速繁殖 | 第15-16页 |
| 1.3 药理作用研究 | 第16-18页 |
| 1.3.1 调节胃肠道功能 | 第16页 |
| 1.3.2 抗病原微生物作用 | 第16-17页 |
| 1.3.3 抗疟原虫作用 | 第17页 |
| 1.3.4 其他作用 | 第17-18页 |
| 1.4 广藿香挥发油 | 第18-20页 |
| 1.4.1 挥发油的提取 | 第18-19页 |
| 1.4.2 挥发油成分影响因素 | 第19-20页 |
| 1.4.3 广藿香挥发油的分布 | 第20页 |
| 2 诱变技术在植物育种中的应用 | 第20-26页 |
| 2.1 秋水仙素在植物诱变育种的应用 | 第21-24页 |
| 2.1.1 秋水仙素化学诱变作用机理 | 第21页 |
| 2.1.2 诱导材料的选取 | 第21-22页 |
| 2.1.2.1 愈伤组织 | 第21页 |
| 2.1.2.2 从生芽 | 第21-22页 |
| 2.1.2.3 种子 | 第22页 |
| 2.1.2.4 叶片 | 第22页 |
| 2.1.2.5 茎尖 | 第22页 |
| 2.1.2.6 其他诱导材料 | 第22页 |
| 2.1.3 诱导方法 | 第22-23页 |
| 2.1.3.1 滴液法 | 第22-23页 |
| 2.1.3.2 琼脂法 | 第23页 |
| 2.1.3.3 浸渍法和混培法 | 第23页 |
| 2.1.4 影响染色体加倍的因素 | 第23-24页 |
| 2.1.4.1 秋水仙素处理浓度与处理时间 | 第23-24页 |
| 2.1.4.2 温度 | 第24页 |
| 2.2 EMS化学诱变作用机理 | 第24-26页 |
| 2.2.1 EMS诱变的剂量 | 第24-25页 |
| 2.2.2 EMS诱变的材料 | 第25页 |
| 2.2.2.1 EMS处理种子 | 第25页 |
| 2.2.2.2 其它材料 | 第25页 |
| 2.2.3 EMS诱变与离体培养结合 | 第25-26页 |
| 3 分子标记技术 | 第26-29页 |
| 3.1 分子标记技术的基本概念与优点 | 第26-27页 |
| 3.2 DNA分子标记技术的归类 | 第27-28页 |
| 3.2.1 基于Southern杂交的分子标记技术 | 第27-28页 |
| 3.2.2 基于PCR的分子标记技术 | 第28页 |
| 3.2.3 ISSR分子标记及其特点 | 第28页 |
| 3.3 ISSR分子标记在植物遗传多样性及亲缘关系分析上的应用 | 第28-29页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第29-30页 |
| 5 技术路线 | 第30-31页 |
| 下篇 广藿香无菌苗的秋水仙素和EMS诱变及突变体植株遗传多样性的ISSR分析 | 第31-75页 |
| 1 广藿香无菌材料的构建、无菌苗组培快繁与移栽技术 | 第31-37页 |
| 1.1 材料与办法 | 第31-33页 |
| 1.1.1 材料 | 第31页 |
| 1.1.2 主要化学试剂 | 第31页 |
| 1.1.3 组织培养主要仪器设备 | 第31页 |
| 1.1.4 培养基配方 | 第31页 |
| 1.1.4.1 愈伤组织诱导培养基 | 第31页 |
| 1.1.4.2 丛生芽诱导培养基 | 第31页 |
| 1.1.4.3 丛生芽增殖培养基的基本成分 | 第31页 |
| 1.1.4.4 丛生芽生根培养基的基本成分 | 第31页 |
| 1.1.5 实验方法 | 第31-33页 |
| 1.1.5.1 无菌材料的建立 | 第31-32页 |
| 1.1.5.2 广藿香丛生芽最适增殖培养基的筛选 | 第32-33页 |
| 1.1.5.3 广藿香丛生芽最适生根培养基的筛选 | 第33页 |
| 1.1.5.4 广藿香组培苗的移栽 | 第33页 |
| 1.2 结果与分析 | 第33-36页 |
| 1.2.1 无菌材料的建立与增殖结果 | 第33-34页 |
| 1.2.2 不同6-BA浓度对广藿香丛生芽增殖与生长发育的影响 | 第34-35页 |
| 1.2.3 不同IBA浓度对广藿香无菌苗生根和植株生长发育的影响 | 第35-36页 |
| 1.2.4 广藿香组培苗移栽成活情况 | 第36页 |
| 1.3 结论 | 第36-37页 |
| 2 广藿香丛生芽秋水仙素半致死剂量的测定 | 第37-39页 |
| 2.1 材料与方法 | 第37-38页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第37页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第37页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第37页 |
| 2.1.4 实验方法 | 第37-38页 |
| 2.1.4.1 培养基的配制与灭菌条件 | 第37页 |
| 2.1.4.2 秋水仙素处理广藿香丛生芽 | 第37-38页 |
| 2.1.4.3 培养条件 | 第38页 |
| 2.2 结果与分析 | 第38-39页 |
| 2.2.1 不同浓度秋水仙素不同处理时间对广藿香丛生芽存活率的影响 | 第38页 |
| 2.2.2 秋水仙素处理后对广藿香植株表形性状的影响 | 第38-39页 |
| 3 广藿香丛生芽EMS半致死剂量的测定 | 第39-45页 |
| 3.1 材料与方法 | 第39-40页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第39页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第39页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第39-40页 |
| 3.1.4 实验方法 | 第40页 |
| 3.1.4.1 培养基的配制与灭菌条件 | 第40页 |
| 3.1.4.2 试剂配制 | 第40页 |
| 3.1.4.3 EMS处理广藿香丛生芽 | 第40页 |
| 3.2 结果与分析 | 第40-45页 |
| 3.2.1 不同浓度EMS和不同处理时间对广藿香植株生根时间和生根率的影响 | 第40-41页 |
| 3.2.2 广藿香丛生芽半致死剂量的确定 | 第41-42页 |
| 3.2.3 EMS处理对广藿香植株性状的影响 | 第42-45页 |
| 4 利用单因子和正交设计双重实验方法优化广藿香ISSR-PCR实验体系 | 第45-58页 |
| 4.1 材判与办法 | 第45-49页 |
| 4.1.1 供试材料 | 第45页 |
| 4.1.2 试剂及其配制 | 第45-46页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第46页 |
| 4.1.4 实验方法 | 第46-49页 |
| 4.1.4.1 广藿香DNA的提取 | 第46-47页 |
| 4.1.4.2 单因子试验 | 第47页 |
| 4.1.4.3 ISSR-PCR反应因素水平的正交设计 | 第47-48页 |
| 4.1.4.4 两种优化体系的比较 | 第48页 |
| 4.1.4.5 退火温度和循环次数的确定 | 第48页 |
| 4.1.4.6 不同引物退火温度的确定及其筛选 | 第48-49页 |
| 4.2 结果与分析 | 第49-58页 |
| 4.2.1 广藿香DNA提取 | 第49-50页 |
| 4.2.2 单因子试验结果分析 | 第50-53页 |
| 4.2.2.1 模板DNA用量对ISSR-PCR反应的影响 | 第50页 |
| 4.2.2.2 Mg~(2+)浓度对ISSR-PCR反应的的影响 | 第50-51页 |
| 4.2.2.3 引物浓度对ISSR-PCR反应的影响 | 第51-52页 |
| 4.2.2.4 TaqDNA聚合酶的用量对ISSR-PCR反应的影响 | 第52页 |
| 4.2.2.5 dNTPs浓度对ISSR-PCR反应的影响 | 第52-53页 |
| 4.2.3 PCR正交设计直观分析 | 第53-55页 |
| 4.2.4 两种优化体系的比较 | 第55页 |
| 4.2.5 不同退火温度对广藿香ISSR-PCR扩增的影响 | 第55-56页 |
| 4.2.6 循环次数对广藿香ISSR-PCR扩增的影响 | 第56页 |
| 4.2.7 ISSR引物的筛选及最佳退火温度的确定 | 第56-58页 |
| 5 秋水仙素和EMS诱变后广藿香植株ISSR遗传多样性分析 | 第58-72页 |
| 5.1 材料与方法 | 第58-59页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第58页 |
| 5.1.2 仪器与试剂 | 第58页 |
| 5.1.3 方法 | 第58-59页 |
| 5.1.3.1 诱变后广藿香植株DNA的提取 | 第58页 |
| 5.1.3.2 诱变植株无菌苗的移栽与苗圃管理 | 第58-59页 |
| 5.1.3.3 PCR扩增反应 | 第59页 |
| 5.1.3.4 扩增产物的检测 | 第59页 |
| 5.1.3.5 诱变植株的ISSR遗传多样性分析 | 第59页 |
| 5.1.3.6 PCR扩增谱带的统计和分析 | 第59页 |
| 5.1.3.7 对诱变后的广藿香植株进行表形观察 | 第59页 |
| 5.2 结果与分析 | 第59-72页 |
| 5.2.1 DNA质量检测 | 第59-62页 |
| 5.2.2 秋水仙素索诱变植株ISSR-PCR遗传多样性分析 | 第62-66页 |
| 5.2.2.1 秋水仙素诱变植株ISSR扩增结果 | 第62-63页 |
| 5.2.2.2 秋水仙素诱变植株ISSR遗传多样性分析 | 第63-66页 |
| 5.2.2.3 秋水仙素诱变后植株表形观察 | 第66页 |
| 5.2.3 EMS诱变植株ISSR-PCR遗传多样性分析 | 第66-72页 |
| 5.2.3.1 EMS诱变植株ISSR扩增结果 | 第66-67页 |
| 5.2.3.2 EMS诱变植株ISSR遗传多样性分析 | 第67-70页 |
| 5.2.3.3 EMS诱变后植株表形观察 | 第70-72页 |
| 6 讨论 | 第72-74页 |
| 6.1 组织培养与人工诱变相结合培育新品种 | 第72页 |
| 6.2 不同植物不同器官对诱变剂的敏感性 | 第72页 |
| 6.3 关于诱变剂的种类及诱变效果 | 第72-73页 |
| 6.4 ISSR实验条件优化 | 第73页 |
| 6.5 关于ISSR分析的可靠性问题 | 第73-74页 |
| 6.6 关于广藿香诱变苗的嵌合体问题 | 第74页 |
| 7 结论 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
