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根癌农杆菌介导的GUS基因转化除虫菊再生体系的建立

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
缩写词(Abbreviation)第10-11页
1 前言第11-22页
    1.1 组织培养研究进展第11-16页
        1.1.1 除虫菊组培快繁研究第12-14页
        1.1.2 除虫菊再生研究第14-16页
    1.2 关于植物遗传转化第16-21页
        1.2.1 基因枪介导法第16-17页
        1.2.2 原生质体介导法第17页
        1.2.3 花粉管通道法第17-18页
        1.2.4 农杆菌介导法第18-20页
        1.2.5 植物原位转化的方法第20-21页
    1.3 本研究的目的和意义第21-22页
2 材料与方法第22-32页
    2.1 除虫菊再生体系的建立第22-24页
        2.1.1 试验材料第22页
            2.1.1.1 植物材料第22页
            2.1.1.2 培养基第22页
            2.1.1.3 培养条件第22页
        2.1.2 试验方法第22-24页
            2.1.2.1 除虫菊无菌苗体系的建立第22页
            2.1.2.2 6-BA和IBA不同浓度配比对除虫菊叶片再生的影响第22-23页
            2.1.2.3 暗培养时间对除虫菊‘No.39’基因型叶片再生的影响第23-24页
            2.1.2.4 AgNO_3对除虫菊‘No.39’基因型叶片再生的影响第24页
            2.1.2.5 不同基因型对除虫菊直接再生的影响第24页
    2.2 除虫菊遗传转化体系的建立第24-32页
        2.2.1 试验材料第24-27页
            2.2.2.1 植物材料第24页
            2.2.2.2 根癌农杆菌菌株及质粒第24-25页
            2.2.2.3 分子生物学试剂第25页
            2.2.2.4 主要仪器和设备第25页
            2.2.2.5 培养基及添加成分第25-26页
            2.2.2.6 常用溶液第26-27页
        2.2.2 试验方法第27-31页
            2.2.2.1 根癌农杆菌的活化及工程菌液的制备第27页
            2.2.2.2 卡那霉素浓度和暗培养时间的影响第27-28页
            2.2.2.3 头孢霉素浓度的影响第28-29页
            2.2.2.4 预培养和侵染时间的影响第29-30页
            2.2.2.5 抗性苗叶片和整株的染色第30页
            2.2.2.6 抗性苗叶片DNA的提取第30页
            2.2.2.7 抗性苗叶片PCR的检测第30-31页
        2.2.3 数据统计及分析第31-32页
3 结果与分析第32-42页
    3.1 除虫菊叶片再生体系的建立第32-35页
        3.1.1 6-BA和IBA不同浓度配比对除虫菊‘No.39’叶片再生的影响第32-33页
        3.1.2 暗培养时间对除虫菊‘No.39’基因型叶片再生的影响第33页
        3.1.3 AgNO_3对除虫菊‘No.39’基因型叶片再生的影响第33-34页
        3.1.4 不同的基因型对除虫菊再生的影响第34-35页
    3.2 除虫菊遗传转化体系的建立第35-42页
        3.2.1 卡那霉素浓度和暗培养时间对除虫菊遗传转化的影响第35-37页
        3.2.2 头孢霉素浓度对除虫菊遗传转化的影响第37-38页
        3.2.3 预培养时间和侵染时间对除虫菊遗传转化的影响第38-40页
        3.2.4 抗性苗叶片的PCR检测第40页
        3.2.5 抗性苗叶片的GUS染色结果第40-42页
4 结论与讨论第42-45页
    4.1 除虫菊‘No.39’基因型再生体系的优化第42-43页
        4.1.1 6-BA和IBA不同浓度对除虫菊‘No.39’基因型叶片再生的影响.第42页
        4.1.2 暗培养时间对除虫菊‘No.39’基因型叶片再生的影响第42-43页
        4.1.3 AgNO_3对除虫菊‘No.39’基因型叶片再生的影响第43页
    4.2 除虫菊遗传转化体系的建立第43-45页
        4.2.1 选择压的影响第43页
        4.2.2 预培养和侵染时间的影响第43-44页
        4.2.3 抗性筛选出现假阳性的原因第44-45页
参考文献第45-54页
致谢第54页

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