致谢 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
第一章 绪论 | 第15-63页 |
1.1 引言 | 第15-16页 |
1.2 微藻油脂代谢途径 | 第16-24页 |
1.2.1 甘油三酯(TAG)的生物合成途径 | 第16-17页 |
1.2.2 Kennedy途径强化TAG生物合成 | 第17-24页 |
1.3 微藻遗传转化 | 第24-35页 |
1.3.1 遗传转化方法 | 第25-27页 |
1.3.2 选择标记与启动子 | 第27-31页 |
1.3.3 蛋白表达的影响因素 | 第31-35页 |
1.4 富油微藻培养 | 第35-41页 |
1.4.1 培养装置选择 | 第35-37页 |
1.4.2 二氧化碳去除 | 第37-38页 |
1.4.3 油脂富集 | 第38-41页 |
1.5 微藻油脂提取技术 | 第41-43页 |
1.5.1 亚临界水或乙醇萃取法 | 第42页 |
1.5.2 原位油脂萃取法 | 第42-43页 |
1.5.3 膜基油脂萃取法 | 第43页 |
1.6 本研究课题的提出 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-63页 |
第二章 小球藻油脂积累的代谢网络分析 | 第63-75页 |
2.1 引言 | 第63-64页 |
2.2 材料与方法 | 第64-67页 |
2.2.1 代谢网络的重建 | 第64-65页 |
2.2.2 网络分析的算法 | 第65-67页 |
2.2.3 网络分析内容 | 第67页 |
2.3 结果与讨论 | 第67-72页 |
2.3.1 自养代谢网络的建立 | 第67-68页 |
2.3.2 环境压力对代谢流分布的影响 | 第68-69页 |
2.3.3 淀粉合成途径与TAG合成途径的竞争 | 第69页 |
2.3.4 TAG合成途径与生物质合成途径的对比 | 第69-72页 |
2.3.5 CASOP分析结果 | 第72页 |
2.4 小结 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-75页 |
第三章 小球藻的分离、纯化与鉴定 | 第75-93页 |
3.1 引言 | 第75页 |
3.2 材料与方法 | 第75-82页 |
3.2.1 藻种及培养条件 | 第75-76页 |
3.2.2 小球藻的分离与纯化 | 第76-78页 |
3.2.3 小球藻基因组DNA的提取 | 第78-80页 |
3.2.4 小球藻rbcL基因的扩增与进化树分析 | 第80-82页 |
3.2.5 小球藻的保藏 | 第82页 |
3.3 结果与讨论 | 第82-91页 |
3.3.1 小球藻无菌培养体系建立 | 第82-86页 |
3.3.2 小球藻DNA提取方法比较 | 第86-88页 |
3.3.3 小球藻藻种鉴定与系统进化分析 | 第88-91页 |
3.4 小结 | 第91-92页 |
参考文献 | 第92-93页 |
第四章 外源DGAT基因转化普通小球藻 | 第93-119页 |
4.1 引言 | 第93页 |
4.2 材料与方法 | 第93-105页 |
4.2.1 DGAT基因来源与穿梭质粒构建 | 第93-100页 |
4.2.2 农杆菌介导转化普通小球藻 | 第100-103页 |
4.2.3 藻落PCR条件优化 | 第103-105页 |
4.2.4 普通小球藻转化子稳定性监测 | 第105页 |
4.3 结果与讨论 | 第105-116页 |
4.3.1 pBI121-DGAT构建与农杆菌转化 | 第105-110页 |
4.3.2 藻菌共培养体系选择 | 第110页 |
4.3.3 普通小球藻转化 | 第110-112页 |
4.3.4 藻落PCR条件选择 | 第112-113页 |
4.3.5 转化子鉴定与稳定性监测 | 第113-116页 |
4.4 小结 | 第116页 |
参考文献 | 第116-119页 |
第五章 高浓二氧化碳驯化与油脂富集 | 第119-141页 |
5.1 引言 | 第119页 |
5.2 材料与方法 | 第119-126页 |
5.2.1 总脂与中性脂测定 | 第119-122页 |
5.2.2 气升式光生物反应器装置 | 第122-124页 |
5.2.3 驯化与产油指标测定 | 第124-126页 |
5.3 结果与讨论 | 第126-139页 |
5.3.1 油脂测定方法比较 | 第126-130页 |
5.3.2 驯化与产油结果分析 | 第130-139页 |
5.4 小结 | 第139页 |
参考文献 | 第139-141页 |
第六章 膜基萃取普通小球藻油脂 | 第141-161页 |
6.1 引言 | 第141页 |
6.2 材料与方法 | 第141-145页 |
6.2.1 普通小球藻破碎方法 | 第141-143页 |
6.2.2 中空纤维膜性能测定与组件制备 | 第143页 |
6.2.3 实验装置示意图 | 第143-144页 |
6.2.4 水相及有机相中油脂含量测定 | 第144-145页 |
6.3 结果与讨论 | 第145-159页 |
6.3.1 细胞破碎方法选择 | 第145-148页 |
6.3.2 中空纤维膜组件选择 | 第148-151页 |
6.3.3 有机萃取剂选择 | 第151-154页 |
6.3.4 膜基萃取条件优化 | 第154-156页 |
6.3.5 浓缩藻液萃取 | 第156-159页 |
6.4 小结 | 第159-160页 |
参考文献 | 第160-161页 |
第七章 结论与展望 | 第161-165页 |
7.1 全文主要结论 | 第161-162页 |
7.2 主要创新点 | 第162-163页 |
7.3 不足与展望 | 第163-165页 |
附录 | 第165-169页 |
作者简介 | 第169-170页 |