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微藻高油脂的生物合成与膜基萃取研究

致谢第5-6页
摘要第6-8页
ABSTRACT第8-10页
第一章 绪论第15-63页
    1.1 引言第15-16页
    1.2 微藻油脂代谢途径第16-24页
        1.2.1 甘油三酯(TAG)的生物合成途径第16-17页
        1.2.2 Kennedy途径强化TAG生物合成第17-24页
    1.3 微藻遗传转化第24-35页
        1.3.1 遗传转化方法第25-27页
        1.3.2 选择标记与启动子第27-31页
        1.3.3 蛋白表达的影响因素第31-35页
    1.4 富油微藻培养第35-41页
        1.4.1 培养装置选择第35-37页
        1.4.2 二氧化碳去除第37-38页
        1.4.3 油脂富集第38-41页
    1.5 微藻油脂提取技术第41-43页
        1.5.1 亚临界水或乙醇萃取法第42页
        1.5.2 原位油脂萃取法第42-43页
        1.5.3 膜基油脂萃取法第43页
    1.6 本研究课题的提出第43-44页
    参考文献第44-63页
第二章 小球藻油脂积累的代谢网络分析第63-75页
    2.1 引言第63-64页
    2.2 材料与方法第64-67页
        2.2.1 代谢网络的重建第64-65页
        2.2.2 网络分析的算法第65-67页
        2.2.3 网络分析内容第67页
    2.3 结果与讨论第67-72页
        2.3.1 自养代谢网络的建立第67-68页
        2.3.2 环境压力对代谢流分布的影响第68-69页
        2.3.3 淀粉合成途径与TAG合成途径的竞争第69页
        2.3.4 TAG合成途径与生物质合成途径的对比第69-72页
        2.3.5 CASOP分析结果第72页
    2.4 小结第72-73页
    参考文献第73-75页
第三章 小球藻的分离、纯化与鉴定第75-93页
    3.1 引言第75页
    3.2 材料与方法第75-82页
        3.2.1 藻种及培养条件第75-76页
        3.2.2 小球藻的分离与纯化第76-78页
        3.2.3 小球藻基因组DNA的提取第78-80页
        3.2.4 小球藻rbcL基因的扩增与进化树分析第80-82页
        3.2.5 小球藻的保藏第82页
    3.3 结果与讨论第82-91页
        3.3.1 小球藻无菌培养体系建立第82-86页
        3.3.2 小球藻DNA提取方法比较第86-88页
        3.3.3 小球藻藻种鉴定与系统进化分析第88-91页
    3.4 小结第91-92页
    参考文献第92-93页
第四章 外源DGAT基因转化普通小球藻第93-119页
    4.1 引言第93页
    4.2 材料与方法第93-105页
        4.2.1 DGAT基因来源与穿梭质粒构建第93-100页
        4.2.2 农杆菌介导转化普通小球藻第100-103页
        4.2.3 藻落PCR条件优化第103-105页
        4.2.4 普通小球藻转化子稳定性监测第105页
    4.3 结果与讨论第105-116页
        4.3.1 pBI121-DGAT构建与农杆菌转化第105-110页
        4.3.2 藻菌共培养体系选择第110页
        4.3.3 普通小球藻转化第110-112页
        4.3.4 藻落PCR条件选择第112-113页
        4.3.5 转化子鉴定与稳定性监测第113-116页
    4.4 小结第116页
    参考文献第116-119页
第五章 高浓二氧化碳驯化与油脂富集第119-141页
    5.1 引言第119页
    5.2 材料与方法第119-126页
        5.2.1 总脂与中性脂测定第119-122页
        5.2.2 气升式光生物反应器装置第122-124页
        5.2.3 驯化与产油指标测定第124-126页
    5.3 结果与讨论第126-139页
        5.3.1 油脂测定方法比较第126-130页
        5.3.2 驯化与产油结果分析第130-139页
    5.4 小结第139页
    参考文献第139-141页
第六章 膜基萃取普通小球藻油脂第141-161页
    6.1 引言第141页
    6.2 材料与方法第141-145页
        6.2.1 普通小球藻破碎方法第141-143页
        6.2.2 中空纤维膜性能测定与组件制备第143页
        6.2.3 实验装置示意图第143-144页
        6.2.4 水相及有机相中油脂含量测定第144-145页
    6.3 结果与讨论第145-159页
        6.3.1 细胞破碎方法选择第145-148页
        6.3.2 中空纤维膜组件选择第148-151页
        6.3.3 有机萃取剂选择第151-154页
        6.3.4 膜基萃取条件优化第154-156页
        6.3.5 浓缩藻液萃取第156-159页
    6.4 小结第159-160页
    参考文献第160-161页
第七章 结论与展望第161-165页
    7.1 全文主要结论第161-162页
    7.2 主要创新点第162-163页
    7.3 不足与展望第163-165页
附录第165-169页
作者简介第169-170页

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