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TMEM67在隐性多囊肾发生发展中的相关分子机制的研究

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
缩略语/符号说明第11-12页
前言第12-16页
    研究现状、成果第12-14页
    研究目的、方法第14-16页
一、常染色体隐性遗传性多囊肾小鼠模型的鉴定第16-26页
    1.1 对象和方法第18-22页
        1.1.1 实验材料第18-19页
        1.1.2 主要试剂第19-22页
    1.2 结果第22-24页
        1.2.1 野生型小鼠PCR结果测序第22页
        1.2.2 常染色体隐性遗传性多囊肾小鼠模型的鉴定第22-24页
    1.3 讨论第24-26页
二、pFlag-CMV-TMEM67载体的构建第26-56页
    2.1 对象和方法第26-36页
        2.1.1 实验材料第26-27页
        2.1.2 实验仪器第27页
        2.1.3 实验试剂及配制第27-28页
        2.1.4 实验方法和步骤第28-36页
    2.2 结果第36-54页
        2.2.1 总RNA的提取第36页
        2.2.2 PCR cDNA第一条链的合成第36页
        2.2.3 TMEM67全长的cDNA的克隆第36页
        2.2.4 PCR纯化试剂盒纯化cDNA的PCR产物第36页
        2.2.5 酶切cDNA得到TMEM67全长DNA片段第36-37页
        2.2.6 酶切质粒PFlag-CMV-ErbB4,得到空载体第37页
        2.2.7 将TMEM67FL连接到空载体pFlag-CMV第37页
        2.2.8 将TMEM67FL-pFlag-CMV转化至感受态细胞中第37页
        2.2.9 挑40个单菌落第37页
        2.2.10 酶切40管质粒第37-38页
        2.2.11 选取其中4个质粒做转化第38页
        2.2.12 挑单菌落第38页
        2.2.13 粗提质粒第38-39页
        2.2.14 双酶切并测序第39-54页
    2.3 讨论第54-56页
三、TMEM67蛋白在信号通路中研究第56-80页
    3.1 对象和方法第56-66页
        3.1.1 细胞系第56页
        3.1.2 主要仪器设备第56-57页
        3.1.3 实验试剂及配制第57-60页
        3.1.4 实验方法和步骤第60-66页
    3.2 实验结果第66-73页
    3.3 讨论第73-80页
四、组织芯片筛查常染色体隐性多囊肾的差异基因第80-106页
    4.1 对象和方法第80-87页
        4.1.1 组织来源第80页
        4.1.2 实验仪器第80-81页
        4.1.3 实验试剂第81-82页
        4.1.4 实验耗材第82页
        4.1.5 实验方法和步骤第82-86页
        4.1.6 Real time PCR检测Affymetrix 430 2.0数据的准确性第86-87页
    4.2 实验结果第87-102页
    4.3 讨论第102-106页
全文结论第106-108页
论文创新点第108-109页
参考文献第109-117页
发表论文和参加科研情况说明第117-118页
综述 多囊肾病的研究进展第118-132页
    综述参考文献第126-132页
致谢第132页

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