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通过沉默GA20-ox基因获矮化苹果植株的研究

摘要第11-13页
Abstract第13-14页
第一章 文献综述第15-27页
    1.1 促使果树矮化的途径第15-16页
        1.1.1 利用矮化砧木第15页
        1.1.2 利用短枝型品种第15页
        1.1.3 栽培措施控制树体第15-16页
        1.1.4 利用生长调节剂第16页
    1.2 果树致矮与植物内源激素第16-17页
    1.3 赤霉素(GA)与果树矮化第17-21页
        1.3.1 赤霉素及其生物学功能第17页
        1.3.2 与GA相关的植物矮化突变体第17-18页
        1.3.3 赤霉素(GA)生物合成途径第18-19页
        1.3.4 赤霉素生物合成途径中的关键酶第19-21页
    1.4 RNA干扰第21-23页
        1.4.1 基因沉默第21页
        1.4.2 RNAi技术简介第21页
        1.4.3 RNA干扰的作用原理第21-22页
        1.4.4 sRNA(small RNA)传递与RNAi第22-23页
    1.5 苹果转基因研究进展第23-24页
    1.6 苹果再生性研究第24-25页
    1.7 组织培养微嫁接技术第25-26页
    1.8 本研究的目的和意义第26-27页
第二章 平邑甜茶离体培养与微嫁接研究第27-40页
    2.1 材料与方法第27-29页
        2.1.1 材料第27页
        2.1.2 方法第27-29页
    2.2 结果与分析第29-38页
        2.2.1 平邑甜茶无菌培养物建立与增殖培养第29-32页
        2.2.2 平邑甜茶试管苗生根培养第32-34页
        2.2.3 平邑甜茶微嫁接技术研究第34-38页
    2.3 讨论第38-39页
        2.3.1 苹果组织培养第38页
        2.3.2 微嫁接操作与绑缚材料第38-39页
        2.3.3 微嫁接与细胞分裂素第39页
        2.3.4 微嫁接与生根第39页
    2.4 小结第39-40页
第三章 平邑甜茶叶片离体再生不定芽研究第40-51页
    3.1 材料与方法第40-41页
        3.1.1 材料第40页
        3.1.2 方法第40-41页
    3.2 结果与分析第41-47页
        3.2.1 不同细胞分裂素对平邑甜茶叶片再生频率的影响第41-42页
        3.2.2 不用叶片接种方式对对平邑甜茶叶片再生的影响第42-43页
        3.2.3 不同暗培养时间对平邑甜茶叶片再生的影响第43-45页
        3.2.4 不同叶片苗龄对平邑甜茶叶片再生的影响第45-46页
        3.2.5 不同抗生素对再生植株的影响第46-47页
        3.2.6 GA对再生植株伸长的影响第47页
    3.3 讨论第47-49页
        3.3.1 暗培养对再生的影响第47-48页
        3.3.2 不同类型外植体再生频率对比第48页
        3.3.3 细胞分裂素与苹果再生第48-49页
        3.3.4 抗生素与苹果再生第49页
    3.4 小结第49-51页
第四章 苹果GA20-ox基因干扰载体构建第51-63页
    4.1 材料与方法第51-55页
        4.1.1 材料第51页
        4.1.2 方法第51-55页
    4.2 结果与分析第55-60页
        4.2.1 苹果GA20-ox基因片段的分离第55-56页
        4.2.2 RNA干扰载体的构建第56-59页
        4.2.3 pRNAi-GA20ox转化根癌农杆菌第59-60页
    4.3 讨论第60-61页
        4.3.1 基因沉默效率第60-61页
        4.3.2 植物表达载体的选择第61页
        4.3.3 苹果GA20-ox基因的克隆第61页
    4.4 小结第61-63页
第五章 苹果GA20-ox基因沉默植株获得及矮化效应分析第63-81页
    5.1 材料与方法第63-67页
        5.1.1 材料第63-64页
        5.1.2 方法第64-67页
    5.2 结果分析第67-78页
        5.2.1 卡那霉素抗性植株的获得第67-70页
        5.2.2 抗性植株的PCR检测第70-71页
        5.2.3 GA20-ox基因系表达水平分析第71页
        5.2.4 转基因植株的表型第71-73页
        5.2.5 转基因植株GA含量测定第73-77页
        5.2.6 转基因植株的致矮效应第77-78页
    5.3 讨论第78-80页
        5.3.1 苹果遗传转化频率第78-79页
        5.3.2 赤霉素与苹果矮化第79页
        5.3.3 赤霉素与营养生长第79页
        5.3.4 sRNA传递第79-80页
    5.4 小结第80-81页
第六章 结论及创新点第81-82页
参考文献第82-91页
附录第91-93页
致谢第93-94页
攻读博士期间发表的论文第94页

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