| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 英文缩略表 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-34页 |
| 1 寄生虫半胱氨酸蛋白酶家族成员分类 | 第16-17页 |
| 1.1 蜱体内的半胱氨酸蛋白酶家族 | 第16-17页 |
| 1.1.1 蜱组织蛋白酶样半胱氨酸蛋白酶（Tick cathepsin-like cysteine proteases） | 第16页 |
| 1.1.2 蜱天冬酰胺内肽酶（Tick asparaginyl endopeptidases） | 第16-17页 |
| 1.1.3 半胱天冬氨酸蛋白酶（Caspases） | 第17页 |
| 1.1.4 自噬相关蛋白酶（autophagy-related proteases） | 第17页 |
| 2 半胱氨酸蛋白酶的功能 | 第17-29页 |
| 2.1 半胱氨酸蛋白酶参与蜱血液消化机制 | 第17-20页 |
| 2.1.1 蜱血红蛋白消化系统组成部分 | 第18-20页 |
| 2.2 蜱血液消化机制具有一定保守性 | 第20-21页 |
| 2.3 血液消化对于病原体传播的影响 | 第21页 |
| 2.4 半胱氨酸蛋白酶家族影响蜱胚胎发育 | 第21-22页 |
| 2.5 半胱天冬氨酸蛋白酶（Caspases）参与免疫反应 | 第22-26页 |
| 2.5.1 半胱天冬氨酸蛋白酶参与细胞凋亡 | 第22-23页 |
| 2.5.2 半胱天冬氨酸蛋白酶参与炎症反应 | 第23-26页 |
| 2.6 半胱氨酸蛋白酶参与自噬反应 | 第26-29页 |
| 2.6.1 自噬作用途径 | 第26-27页 |
| 2.6.2 自噬作用中的蛋白酶 | 第27-28页 |
| 2.6.3 蛋白酶对自噬的抑制作用 | 第28-29页 |
| 3 半胱氨酸蛋白酶之间的相互作用 | 第29-34页 |
| 3.1 半胱天冬氨酸蛋白酶与细胞凋亡（Caspases and apoptosis） | 第29-30页 |
| 3.2 组织蛋白酶B具有一定的调节作用 | 第30-32页 |
| 3.3 半胱氨酸蛋白酶抑制剂（cystatin）调控蛋白酶活性 | 第32-34页 |
| 第二章 吸血前后蜱唾液腺转录组测序、差异表达分析和半胱氨酸蛋白酶基因克隆 | 第34-53页 |
| 2.1 引言 | 第34页 |
| 2.2 实验材料 | 第34页 |
| 2.2.1 实验动物 | 第34页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第34页 |
| 2.2.3 主要仪器 | 第34页 |
| 2.3 实验方法 | 第34-36页 |
| 2.3.1 镰形扇头蜱吸血前后唾液腺总RNA提取 | 第34-35页 |
| 2.3.2 镰形扇头蜱吸血前后唾液腺转录组cDNA文库构建及测序分析 | 第35页 |
| 2.3.3 差异表达库中半胱氨酸蛋白酶基因克隆 | 第35-36页 |
| 2.4 结果分析 | 第36-50页 |
| 2.4.1 转录组数据库和吸血前后差异表达基因分析 | 第36-39页 |
| 2.4.2 半胱氨酸蛋白酶基因克隆和测序鉴定 | 第39-40页 |
| 2.4.3 六种半胱氨酸蛋白酶序列分析 | 第40-46页 |
| 2.4.4 进化树分析 | 第46-50页 |
| 2.5 讨论 | 第50-53页 |
| 第三章 六种半胱氨酸蛋白酶在不同发育阶段和不同组织器官的转录动态检测 | 第53-63页 |
| 3.1 引言 | 第53页 |
| 3.2 实验材料 | 第53页 |
| 3.2.1 实验动物 | 第53页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第53页 |
| 3.2.3 主要仪器 | 第53页 |
| 3.3 实验方法 | 第53-55页 |
| 3.3.1 镰形扇头蜱不同发育阶段和成蜱不同组织器官总RNA提取 | 第53-54页 |
| 3.3.2 第一链cDNA合成 | 第54页 |
| 3.3.3 荧光定量PCR（qPCR）检测六种半胱氨酸蛋白酶在镰形扇头蜱不同发育阶段和成蜱不同组织器官的转录水平 | 第54-55页 |
| 3.3.4 统计学分析 | 第55页 |
| 3.4 结果分析 | 第55-61页 |
| 3.4.1 六种半胱氨酸蛋白酶在不同发育阶段的转录水平检测 | 第55-59页 |
| 3.4.2 六种半胱氨酸蛋白酶在成蜱不同组织器官的转录水平检测 | 第59-61页 |
| 3.5 讨论 | 第61-63页 |
| 第四章 镰形扇头蜱半胱氨酸蛋白酶的活性分析和免疫鉴定 | 第63-77页 |
| 4.1 引言 | 第63页 |
| 4.2 材料与方法 | 第63-67页 |
| 4.2.1 实验动物 | 第63页 |
| 4.2.2 主要生物学试剂 | 第63页 |
| 4.2.3 实验方法 | 第63-67页 |
| 4.3 结果分析 | 第67-75页 |
| 4.3.1 CATB，CATL，ATG4B，ATG4D和CASP1重组蛋白表达纯化 | 第67-69页 |
| 4.3.2 重组半胱氨酸蛋白酶活性鉴定 | 第69-73页 |
| 4.3.3 镰形扇头蜱成蜱唾液腺和中肠免疫组化结果 | 第73-74页 |
| 4.3.4 成蜱全蜱天然蛋白Western Blot鉴定结果 | 第74-75页 |
| 4.4 讨论 | 第75-77页 |
| 第五章 半胱氨酸蛋白酶在蜱体内相互关系探究 | 第77-85页 |
| 5.1 引言 | 第77页 |
| 5.2 材料与方法 | 第77-79页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第77-78页 |
| 5.2.2 实验方法 | 第78-79页 |
| 5.3 结果分析 | 第79-83页 |
| 5.3.1 双链RNA（dsRNA）的合成 | 第79页 |
| 5.3.2 六种半胱氨酸蛋白酶在若蜱中干扰效果分析 | 第79-83页 |
| 5.4 讨论 | 第83-85页 |
| 第六章 半胱氨酸蛋白酶在唾液腺细胞凋亡中的作用机制探究 | 第85-97页 |
| 6.1 引言 | 第85页 |
| 6.2 材料与方法 | 第85-87页 |
| 6.2.1 实验材料 | 第85-86页 |
| 6.2.2 实验方法 | 第86-87页 |
| 6.3 结果分析 | 第87-94页 |
| 6.3.1 镰形扇头蜱上体 1-7 天唾液腺解剖观察 | 第87页 |
| 6.3.2 上体 1-7 天镰形扇头蜱成蜱唾液腺TUNEL染色结果 | 第87-88页 |
| 6.3.3 镰形扇头蜱成蜱上体 1-7 天的唾液腺AnnexinⅤ流式检测 | 第88-89页 |
| 6.3.4 CASP1干扰后上体 1-7 天的镰形扇头蜱雌蜱唾液腺形态变化 | 第89-90页 |
| 6.3.5 CASP1干扰后上体 1-7 天雌蜱唾液腺中6种半胱氨酸蛋白酶转录水平动态变化 | 第90-91页 |
| 6.3.6 CASP1干扰后上体 1-7 天雌蜱唾液腺中6种半胱氨酸蛋白酶蛋白水平动态变化 | 第91-92页 |
| 6.3.7 CASP1干扰后镰形扇头蜱上体 1-7 天雌蜱唾液腺TUNEL检测 | 第92-94页 |
| 6.3.8 Annexin Ⅴ-PI流式细胞术检测CASP1干扰后镰形扇头蜱上体 1-7 天雌蜱唾液腺细胞凋亡分析 | 第94页 |
| 6.4 讨论 | 第94-97页 |
| 第七章 全文总结 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-116页 |
| 致谢 | 第116-117页 |
| 作者简历 | 第117页 |
