| 中文摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 中英文缩略语表 | 第11-14页 |
| 前言 | 第14-18页 |
| 实验材料与方法 | 第18-53页 |
| 实验材料 | 第18-32页 |
| 一、常用试剂 | 第18页 |
| 二、抗体 | 第18页 |
| 三、工具酶、分子量标准及试剂盒 | 第18-19页 |
| 四、细胞株 | 第19页 |
| 五、质粒载体 | 第19-23页 |
| 六、引物 | 第23-25页 |
| 七、实验仪器 | 第25-27页 |
| 八、实验分析软件 | 第27页 |
| 九、实验常用试剂及其配制方法 | 第27-32页 |
| 实验方法 | 第32-53页 |
| (一) 细胞复苏、培养、传代及冻存 | 第32-33页 |
| (二) 细胞瞬时转染与稳定细胞系的构建 | 第33-34页 |
| (三) 全细胞的RNA提取 | 第34-35页 |
| (四) siRNA构建退火反应 | 第35页 |
| (五) 基因组DNA提取方法 | 第35页 |
| (六) 全细胞蛋白的提取 | 第35-36页 |
| (七) 质粒克隆实验 | 第36-42页 |
| (八) RT-PCR实验(参照Takara一步法RT-PCR试剂盒说明书) | 第42-43页 |
| (九) 实时定量real-time qRT-PCR实验 | 第43页 |
| (十) Western Blotting蛋白免疫印迹实验 | 第43-46页 |
| (十一) 考马斯亮蓝染色 | 第46-47页 |
| (十二) Dual-Luciferase双荧光素酶报告基因实验(参照Promega试剂盒说明书) | 第47-48页 |
| (十三) IFN-β ELISA干扰素酶联免疫吸附实验 | 第48-49页 |
| (十四) VLP孵育实验 | 第49页 |
| (十五) 免疫荧光实验 | 第49-50页 |
| (十六) 蛋白免疫共沉淀CO-IP实验 | 第50-53页 |
| 实验结果 | 第53-86页 |
| 一 SARS-CoV冠状病毒M基因诱导HEK293T细胞干扰素基因表达上调 | 第53-57页 |
| 二 SARS-CoV冠状病毒M基因激活IFN-β信号通路依赖于TBK1、IRF3 | 第57-61页 |
| 三 SARS-CoV冠状病毒M基因在HEK293T细胞系中更倾向于激活TLR介导的信号通路 | 第61-63页 |
| 四 SARS-CoV冠状病毒M基因与TLRs受体通路中Myd88、TRAM衔接蛋白相互作用检测 | 第63-64页 |
| 五 SARS-CoV冠状病毒M基因在小鼠永生化骨髓巨噬细胞中通过靶向TLR受体介导的相关通路活化IFN-β表达通路 | 第64-67页 |
| 六 SARS-CoV冠状病毒M基因对A549细胞及Vero细胞干扰素β启动子表达的影响 | 第67-68页 |
| 七 SARS-CoV冠状病毒M基因通过蛋白水平发挥诱导IFN-β表达的作用 | 第68-71页 |
| 八 SARS-CoV冠状病毒M蛋白泛素化修饰探究 | 第71-75页 |
| 九 SARS-CoV冠状病毒M蛋白可作为胞内的病原相关分子模式激活IFN-β的表达 | 第75-78页 |
| 十 SARS-CoV冠状病毒M蛋白诱导IFN-β产生并不依赖于TRAF3 | 第78-82页 |
| 十一 SARS-CoV冠状病毒携带M突变体(V68A)不能诱导感染细胞IFN-β的表达 | 第82-84页 |
| 十二 SARS-CoV冠状病毒M蛋白缺失突变体对HEK293T细胞干扰素β启动子表达的影响 | 第84-86页 |
| 讨论 | 第86-90页 |
| 小结 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-95页 |
| 文献综述 天然免疫系统中的模式识别受体 | 第95-121页 |
| 参考文献 | 第112-121页 |
| 发表文章 | 第121-122页 |
| 致谢 | 第122-123页 |
