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Irisin对脂肪细胞的脂解和自分泌作用及其与PCOS患者骨密度和身体成分的关联性研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
英文缩略词及中文对照第8-16页
第1章 研究背景第16-38页
    1.1 脂肪细胞第16-24页
        1.1.1 脂肪细胞的分类第16-19页
        1.1.2 脂肪细胞分泌的脂肪因子第19-22页
        1.1.3 脂肪细胞的脂质降解第22-23页
        1.1.4 脂毒性第23-24页
    1.2 Irisin第24-33页
        1.2.1 Irisin的发现及命名第24-25页
        1.2.2 Irisin的结构和分布第25-26页
        1.2.3 Irisin的功能第26-30页
        1.2.4 Irisin与疾病的联系第30-33页
    1.3 骨代谢第33-34页
        1.3.1 骨代谢标志物第33页
        1.3.2 骨密度测量方法第33-34页
    1.4 多囊卵巢综合征第34-35页
        1.4.1 多囊卵巢综合征中的肥胖第34-35页
        1.4.2 多囊卵巢综合征中的胰岛素抵抗第35页
        1.4.3 多囊卵巢综合症中的心血管疾病第35页
    1.5 课题立项依据及研究内容第35-38页
第2章 GST-irisin的原核表达与纯化以及在脂肪细胞中的分子作用机理研究第38-76页
    2.1 序言第38-39页
    2.2 实验材料与设备第39-43页
        2.2.1 实验材料第39-42页
        2.2.2 实验仪器第42-43页
    2.3 实验方法第43-56页
        2.3.1 Irisin蛋白的基因序列合成第43-44页
        2.3.2 Irisin蛋白的基因序列的验证第44-45页
        2.3.3 PCR片段和pGEX-4T-1 质粒双酶切及连接第45-46页
        2.3.4 大肠杆菌感受态细胞的制备第46页
        2.3.5 重组质粒pGEX-4T1irisin的转化与筛选第46-47页
        2.3.6 重组质粒pGEX-4T-1–irisin的提取与鉴定第47页
        2.3.7 GST-irisin融合蛋白的诱导表达第47-48页
        2.3.8 GST-irisin融合蛋白的纯化、鉴定以及GST酶活性测定第48页
        2.3.9 GST-irisin融合蛋白的酶切第48页
        2.3.10 GST-irisin对 3T3-L1细胞的毒性测定第48-49页
        2.3.11 3T3-L1细胞的培养与诱导第49-50页
        2.3.12 3T3-L1成熟脂肪细胞的油红O实验第50页
        2.3.13 3T3-L1成熟脂肪细胞培养基的甘油含量测定第50页
        2.3.14 3T3-L1成熟脂肪细胞培养基的葡萄糖实验测定第50-51页
        2.3.15 3T3-L1成熟脂肪细胞培养基中的irisin含量测定第51页
        2.3.16 与脂解以及irisin相关的基因的Real-time PCR实验第51-54页
        2.3.17 与脂解以及irisin相关的蛋白的Western Blotting实验第54-56页
    2.4 数据整理与分析第56页
    2.5 实验结果第56-70页
        2.5.1 Irisin蛋白的基因序列的验证第56-57页
        2.5.2 重组质粒pGEX-4T-1–irisin构建第57-60页
        2.5.3 GST-irisin融合蛋白的表达、鉴定及纯化第60-61页
        2.5.4 GST-irisin对 3T3-L1细胞的毒性测定第61-62页
        2.5.5 GST-irisin对 3T3-L1脂肪细胞“棕色化”作用的鉴定第62-64页
        2.5.6 GST-irisin对 3T3-L1脂肪细胞脂质积累的作用第64-66页
        2.5.7 GST-irisin对 3T3-L1脂肪细胞脂质降解的作用第66-68页
        2.5.8 GST-irisin对 3T3-L1脂肪细胞的自分泌作用第68-69页
        2.5.9 GST-irisin对 3T3-L1脂肪细胞培养基中葡萄糖浓度的影响第69-70页
    2.6 讨论第70-74页
    2.7 小结第74-76页
第3章 Irisin在多囊卵巢综合症患者中与骨密度和身体成分的关系研究第76-94页
    3.1 序言第76-77页
    3.2 研究资料第77页
        3.2.1 PCOS的诊断标准第77页
        3.2.2 选取对象资料第77页
    3.3 实验试剂与仪器第77-78页
        3.3.1 实验试剂第77-78页
        3.3.2 实验仪器第78页
    3.4 实验方法第78-81页
        3.4.1 人体测量学指标的测定第78-79页
        3.4.2 性激素水平以及糖脂代谢测定第79页
        3.4.3 血清irisin和脂联素的测定第79-81页
        3.4.4 体脂含量及身体成分指标的测定第81页
        3.4.5 骨代谢标准物的测定第81页
    3.5 数据整理与分析第81页
    3.6 实验结果第81-89页
        3.6.1 PCOS组与健康对照组人体测量学指标比较第81-82页
        3.6.2 PCOS组与健康对照组糖脂代谢指标比较第82-83页
        3.6.3 PCOS组与健康对照组性激素指标比较第83-84页
        3.6.4 PCOS组与健康对照组骨密度指标比较第84-85页
        3.6.5 PCOS组与健康对照组身体成分各指标比较第85-87页
        3.6.6 PCOS组、糖尿病组和健康对照组血清中irisin浓度的比较第87-88页
        3.6.7 PCOS组、糖尿病组和健康对照组血清中脂联素浓度的比较第88-89页
    3.7 相关性分析第89-91页
    3.8 讨论第91-93页
    3.9 小结第93-94页
参考文献第94-126页
附录一 溶液配方第126-129页
附录二 生工合成的irisin基因序列报告单第129-130页
在学期间所取得的科研成果第130-131页
致谢第131页

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