| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩略词及中文对照 | 第8-16页 |
| 第1章 研究背景 | 第16-38页 |
| 1.1 脂肪细胞 | 第16-24页 |
| 1.1.1 脂肪细胞的分类 | 第16-19页 |
| 1.1.2 脂肪细胞分泌的脂肪因子 | 第19-22页 |
| 1.1.3 脂肪细胞的脂质降解 | 第22-23页 |
| 1.1.4 脂毒性 | 第23-24页 |
| 1.2 Irisin | 第24-33页 |
| 1.2.1 Irisin的发现及命名 | 第24-25页 |
| 1.2.2 Irisin的结构和分布 | 第25-26页 |
| 1.2.3 Irisin的功能 | 第26-30页 |
| 1.2.4 Irisin与疾病的联系 | 第30-33页 |
| 1.3 骨代谢 | 第33-34页 |
| 1.3.1 骨代谢标志物 | 第33页 |
| 1.3.2 骨密度测量方法 | 第33-34页 |
| 1.4 多囊卵巢综合征 | 第34-35页 |
| 1.4.1 多囊卵巢综合征中的肥胖 | 第34-35页 |
| 1.4.2 多囊卵巢综合征中的胰岛素抵抗 | 第35页 |
| 1.4.3 多囊卵巢综合症中的心血管疾病 | 第35页 |
| 1.5 课题立项依据及研究内容 | 第35-38页 |
| 第2章 GST-irisin的原核表达与纯化以及在脂肪细胞中的分子作用机理研究 | 第38-76页 |
| 2.1 序言 | 第38-39页 |
| 2.2 实验材料与设备 | 第39-43页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第39-42页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第42-43页 |
| 2.3 实验方法 | 第43-56页 |
| 2.3.1 Irisin蛋白的基因序列合成 | 第43-44页 |
| 2.3.2 Irisin蛋白的基因序列的验证 | 第44-45页 |
| 2.3.3 PCR片段和pGEX-4T-1 质粒双酶切及连接 | 第45-46页 |
| 2.3.4 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第46页 |
| 2.3.5 重组质粒pGEX-4T1irisin的转化与筛选 | 第46-47页 |
| 2.3.6 重组质粒pGEX-4T-1–irisin的提取与鉴定 | 第47页 |
| 2.3.7 GST-irisin融合蛋白的诱导表达 | 第47-48页 |
| 2.3.8 GST-irisin融合蛋白的纯化、鉴定以及GST酶活性测定 | 第48页 |
| 2.3.9 GST-irisin融合蛋白的酶切 | 第48页 |
| 2.3.10 GST-irisin对 3T3-L1细胞的毒性测定 | 第48-49页 |
| 2.3.11 3T3-L1细胞的培养与诱导 | 第49-50页 |
| 2.3.12 3T3-L1成熟脂肪细胞的油红O实验 | 第50页 |
| 2.3.13 3T3-L1成熟脂肪细胞培养基的甘油含量测定 | 第50页 |
| 2.3.14 3T3-L1成熟脂肪细胞培养基的葡萄糖实验测定 | 第50-51页 |
| 2.3.15 3T3-L1成熟脂肪细胞培养基中的irisin含量测定 | 第51页 |
| 2.3.16 与脂解以及irisin相关的基因的Real-time PCR实验 | 第51-54页 |
| 2.3.17 与脂解以及irisin相关的蛋白的Western Blotting实验 | 第54-56页 |
| 2.4 数据整理与分析 | 第56页 |
| 2.5 实验结果 | 第56-70页 |
| 2.5.1 Irisin蛋白的基因序列的验证 | 第56-57页 |
| 2.5.2 重组质粒pGEX-4T-1–irisin构建 | 第57-60页 |
| 2.5.3 GST-irisin融合蛋白的表达、鉴定及纯化 | 第60-61页 |
| 2.5.4 GST-irisin对 3T3-L1细胞的毒性测定 | 第61-62页 |
| 2.5.5 GST-irisin对 3T3-L1脂肪细胞“棕色化”作用的鉴定 | 第62-64页 |
| 2.5.6 GST-irisin对 3T3-L1脂肪细胞脂质积累的作用 | 第64-66页 |
| 2.5.7 GST-irisin对 3T3-L1脂肪细胞脂质降解的作用 | 第66-68页 |
| 2.5.8 GST-irisin对 3T3-L1脂肪细胞的自分泌作用 | 第68-69页 |
| 2.5.9 GST-irisin对 3T3-L1脂肪细胞培养基中葡萄糖浓度的影响 | 第69-70页 |
| 2.6 讨论 | 第70-74页 |
| 2.7 小结 | 第74-76页 |
| 第3章 Irisin在多囊卵巢综合症患者中与骨密度和身体成分的关系研究 | 第76-94页 |
| 3.1 序言 | 第76-77页 |
| 3.2 研究资料 | 第77页 |
| 3.2.1 PCOS的诊断标准 | 第77页 |
| 3.2.2 选取对象资料 | 第77页 |
| 3.3 实验试剂与仪器 | 第77-78页 |
| 3.3.1 实验试剂 | 第77-78页 |
| 3.3.2 实验仪器 | 第78页 |
| 3.4 实验方法 | 第78-81页 |
| 3.4.1 人体测量学指标的测定 | 第78-79页 |
| 3.4.2 性激素水平以及糖脂代谢测定 | 第79页 |
| 3.4.3 血清irisin和脂联素的测定 | 第79-81页 |
| 3.4.4 体脂含量及身体成分指标的测定 | 第81页 |
| 3.4.5 骨代谢标准物的测定 | 第81页 |
| 3.5 数据整理与分析 | 第81页 |
| 3.6 实验结果 | 第81-89页 |
| 3.6.1 PCOS组与健康对照组人体测量学指标比较 | 第81-82页 |
| 3.6.2 PCOS组与健康对照组糖脂代谢指标比较 | 第82-83页 |
| 3.6.3 PCOS组与健康对照组性激素指标比较 | 第83-84页 |
| 3.6.4 PCOS组与健康对照组骨密度指标比较 | 第84-85页 |
| 3.6.5 PCOS组与健康对照组身体成分各指标比较 | 第85-87页 |
| 3.6.6 PCOS组、糖尿病组和健康对照组血清中irisin浓度的比较 | 第87-88页 |
| 3.6.7 PCOS组、糖尿病组和健康对照组血清中脂联素浓度的比较 | 第88-89页 |
| 3.7 相关性分析 | 第89-91页 |
| 3.8 讨论 | 第91-93页 |
| 3.9 小结 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-126页 |
| 附录一 溶液配方 | 第126-129页 |
| 附录二 生工合成的irisin基因序列报告单 | 第129-130页 |
| 在学期间所取得的科研成果 | 第130-131页 |
| 致谢 | 第131页 |
