| 摘要 | 第7-8页 |
| ABSTRACT | 第8页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-23页 |
| 1.1 病原真菌核盘菌的研究进展 | 第10-13页 |
| 1.1.1 核盘菌的危害 | 第10页 |
| 1.1.2 核盘菌的致病机理 | 第10-12页 |
| 1.1.3 核盘菌的生物防治 | 第12-13页 |
| 1.2 盾壳霉的研究进展 | 第13-18页 |
| 1.2.1 盾壳霉的分布及生物学特性 | 第13-14页 |
| 1.2.2 盾壳霉防治核盘菌的机理 | 第14-15页 |
| 1.2.3 盾壳霉的应用 | 第15-16页 |
| 1.2.4 盾壳霉的分子生物学研究进展 | 第16-18页 |
| 1.3 端粒酶逆转录酶的研究进展 | 第18-21页 |
| 1.3.1 端粒的结构和功能 | 第18-19页 |
| 1.3.2 端粒酶和端粒酶逆转录酶 | 第19-20页 |
| 1.3.3 端粒酶逆转录酶在多细胞真核生物中的研究进展 | 第20页 |
| 1.3.4 端粒酶逆转酶在单细胞真核生物中的研究进展 | 第20-21页 |
| 1.3.5 端粒长度的检测技术 | 第21页 |
| 1.4 研究目的及意义 | 第21-23页 |
| 第二章 基因CmTERT突变体的生物学功能研究 | 第23-44页 |
| 2.1 试验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 菌株 | 第23页 |
| 2.1.2 载体 | 第23页 |
| 2.1.3 培养基 | 第23-24页 |
| 2.1.4 试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第25页 |
| 2.2 方法 | 第25-33页 |
| 2.2.1 基因CmTERT的克隆 | 第25-27页 |
| 2.2.1.1 DNA的提取 | 第25页 |
| 2.2.1.2 总RNA的提取 | 第25-26页 |
| 2.2.1.3 cDNA的合成 | 第26页 |
| 2.2.1.4 CmTERT基因全长和CDS克隆 | 第26-27页 |
| 2.2.2 盾壳霉基因CmTERT表达动态分析 | 第27页 |
| 2.2.3 基因CmTERT的敲除 | 第27-31页 |
| 2.2.3.1 同源重组的原理 | 第27-28页 |
| 2.2.3.2 PCR扩增获得目标基因的上下游序列和HYG片段 | 第28页 |
| 2.2.3.3 融合片段的获得 | 第28-29页 |
| 2.2.3.4 UHY和YGD测序验证 | 第29页 |
| 2.2.3.5 盾壳霉ZS-1 原生质体的制备 | 第29-30页 |
| 2.2.3.6 PEG介导的原生质体转化 | 第30页 |
| 2.2.3.7 CmTERT敲除转化子的验证 | 第30-31页 |
| 2.2.4 盾壳霉菌株的生物学表型观察 | 第31-33页 |
| 2.2.4.1 盾壳霉菌株的菌落形态特征观察 | 第31页 |
| 2.2.4.2 盾壳霉菌株的菌丝尖端观察 | 第31页 |
| 2.2.4.3 盾壳霉菌株的生长速度测定 | 第31-32页 |
| 2.2.4.4 盾壳霉菌株的产孢量测定 | 第32页 |
| 2.2.4.5 盾壳霉菌株的生物学产量测定 | 第32页 |
| 2.2.4.6 盾壳霉菌株抗生能力的测定 | 第32页 |
| 2.2.4.7 盾壳霉菌株寄生菌核能力的测定 | 第32-33页 |
| 2.2.4.8 NBT染色检测活性氧含量 | 第33页 |
| 2.3 结果与分析 | 第33-43页 |
| 2.3.1 ZS-1TN4685 T-DNA插入位点处基因的序列分析 | 第33-35页 |
| 2.3.2 CmTERT基因表达动态分析 | 第35页 |
| 2.3.3 CmTERT敲除转化子的获得与验证 | 第35-38页 |
| 2.3.3.1 CmTERT上游片段U和下游片段D及潮霉素基因的获得 | 第35-36页 |
| 2.3.3.2 融合片段UHY和YGD的获得 | 第36页 |
| 2.3.3.3 CmTERT敲除转化子的PCR验证 | 第36-38页 |
| 2.3.4 CmTERT敲除转化子的生物学表型 | 第38-43页 |
| 2.3.4.1 CmTERT敲除转化子的菌落形态 | 第38页 |
| 2.3.4.2 CmTERT敲除转化子的菌丝尖端形态 | 第38-39页 |
| 2.3.4.3 CmTERT敲除转化子的生长速率 | 第39-40页 |
| 2.3.4.4 CmTERT敲除转化子的分生孢子形成 | 第40页 |
| 2.3.4.5 CmTERT敲除转化子的生物学产量 | 第40-41页 |
| 2.3.4.6 CmTERT敲除转化子的抗生能力 | 第41页 |
| 2.3.4.7 CmTERT敲除转化子寄生菌核的能力 | 第41-42页 |
| 2.3.4.8 CmTERT敲除转化子中的ROS含量 | 第42-43页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第43-44页 |
| 第三章 总结与展望 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-57页 |
| 附录一 | 第57-58页 |
| 附录二 | 第58-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
