摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
第一章 绪论 | 第14-26页 |
1 问题的提出 | 第14-15页 |
2 转Bt基因作物 | 第15-23页 |
2.1 Bt蛋白简介 | 第15-16页 |
2.2 转Bt基因作物 | 第16-17页 |
2.3 转Bt基因作物对靶标生物影响的研究 | 第17-19页 |
2.4 转Bt基因作物对非靶标生物影响的研究 | 第19-23页 |
3 蜘蛛 | 第23-24页 |
4 转录组高通量测序技术(RNA-seq技术) | 第24-26页 |
第二章 用转录组高通量测序技术鉴定Bt蛋白对拟环纹豹蛛捕食功能及搜寻行为的影响 | 第26-39页 |
1 材料与方法 | 第26-28页 |
1.1 实验用水稻 | 第26页 |
1.2 供试褐飞虱 | 第26页 |
1.3 实验用蜘蛛及其处理 | 第26页 |
1.4 Bt蛋白含量测定 | 第26-27页 |
1.5 捕食功能反应 | 第27页 |
1.6 搜寻反应 | 第27页 |
1.7 转录组测序 | 第27页 |
1.8 qPCR分析(实时荧光定量PCR) | 第27-28页 |
1.9 数据处理 | 第28页 |
2 结果与分析 | 第28-36页 |
2.1 拟环纹豹蛛体内Cry1Ab蛋白含量随天数变化 | 第28-29页 |
2.2 捕食功能反应 | 第29-30页 |
2.3 搜寻反应 | 第30页 |
2.4 转录组Unigene差异分析 | 第30-35页 |
2.5 DEGs基因的qPCR分析 | 第35-36页 |
3 结论与讨论 | 第36-39页 |
第三章 用转录组高通量测序技术鉴定Bt蛋白对拟环纹豹蛛毒腺基因表达的影响 | 第39-48页 |
1 材料与方法 | 第39-41页 |
1.1 实验水稻 | 第39页 |
1.2 稻飞虱养殖 | 第39页 |
1.3 蜘蛛采集和分装 | 第39页 |
1.4 试剂及试剂盒 | 第39-40页 |
1.5 蜘蛛的饲养 | 第40页 |
1.6 Bt蛋白检测 | 第40页 |
1.7 蜘蛛毒腺解剖 | 第40页 |
1.8 RNA的提取 | 第40-41页 |
1.9 RNA质量检测 | 第41页 |
1.10 测序 | 第41页 |
1.11 数据统计 | 第41页 |
2 结果与分析 | 第41-46页 |
2.1 蜘蛛体内Bt蛋白含量 | 第41页 |
2.2 拟环纹豹蛛的毒腺 | 第41页 |
2.3 RNA质量检测 | 第41-42页 |
2.4 差异表达分析 | 第42-46页 |
3 讨论 | 第46-48页 |
第四章 用转录组高通量测序技术鉴定Bt蛋白对拟环纹豹蛛生长发育的影响 | 第48-67页 |
1 材料与方法 | 第49-51页 |
1.1 供试水稻 | 第49页 |
1.2 供试飞虱 | 第49页 |
1.3 供试蜘蛛 | 第49页 |
1.4 CrylAb蛋白检测 | 第49-50页 |
1.5 酶活的测定 | 第50页 |
1.6 转录组分析 | 第50页 |
1.7 qPCR分析 | 第50页 |
1.8 数据分析 | 第50-51页 |
2 结果与分析 | 第51-64页 |
2.1 Cry1Ab蛋白在拟环纹豹蛛体内的生物富集 | 第51页 |
2.2 Cry1Ab蛋白对幼蛛发育历期、存活率和体重增长的影响 | 第51-53页 |
2.3 Cry1Ab蛋白对幼蛛身体发育的影响 | 第53-54页 |
2.4 Cry1Ab蛋白对成蛛体内各组织以及其亚细胞结构中各酶活的影响 | 第54-57页 |
2.5 Cry1Ab蛋白对幼蛛体内各组织及亚细胞结构中各酶活的影响 | 第57-59页 |
2.6 转录组结果分析 | 第59-63页 |
2.7 DEGs基因的qPCR分析 | 第63-64页 |
3. 讨论 | 第64-67页 |
第五章 用转录组高通量测序技术鉴定Bt蛋白对拟环纹豹蛛繁殖的影响 | 第67-80页 |
1 材料与方法 | 第68-70页 |
1.1 水稻 | 第68页 |
1.2 褐飞虱 | 第68页 |
1.3 蜘蛛的饲养 | 第68页 |
1.4 Cry1Ab的检测 | 第68-69页 |
1.5 基因表达分析与功能注释 | 第69页 |
1.6 qPCR检测 | 第69-70页 |
1.7. 数据分析 | 第70页 |
2 结果与分析 | 第70-76页 |
2.1 Cry1Ab蛋白在拟环纹豹蛛体内的富集规律 | 第70-71页 |
2.2 Cry1Ab蛋白对拟环纹豹蛛繁殖能力的影响 | 第71页 |
2.3 基因表达分析 | 第71-75页 |
2.4 卵黄蛋白基因的qPCR分析 | 第75-76页 |
3 讨论 | 第76-80页 |
第六章 结论、创新与展望 | 第80-82页 |
1 结论 | 第80页 |
2 创新点 | 第80-81页 |
3 展望 | 第81-82页 |
参考文献 | 第82-98页 |
附录A:RNA质检结果 | 第98-100页 |
附录B:转录组建库流程及Reads质量预处理 | 第100-103页 |
附录C | 第103-105页 |
致谢 | 第105-106页 |