| 内容摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 引言 | 第8-19页 |
| 1.1 大豆氮素营养研究进展 | 第8-9页 |
| 1.2 氮素利用效率的遗传工程研究 | 第9-17页 |
| 1.2.1 根系结构和活性 | 第9-10页 |
| 1.2.2 硝酸盐和铵转运蛋白超量表达 | 第10页 |
| 1.2.3 控制氮平衡和其他代谢平衡的关键基因的调控 | 第10-11页 |
| 1.2.4 细胞内酸碱平衡 | 第11-12页 |
| 1.2.5 提高产量和氮收获指数以促进氮素的获取和利用 | 第12-17页 |
| 1.3 含有CBS结构域的基因研究概况 | 第17-19页 |
| 1.4 本课题研究目的及意义 | 第19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-25页 |
| 2.1 植物材料和生长环境 | 第19-20页 |
| 2.2 鉴定大豆含CBS结构域蛋白家族的数据库 | 第20页 |
| 2.3 系统发育树,基序识别,基因结构以及染色体定位分析 | 第20-21页 |
| 2.4 RNA提取及基因表达分析 | 第21页 |
| 2.5 原核表达以及Cystathionine β-synthase活性检测 | 第21页 |
| 2.6 GmCBS21基因启动子的克隆及GUS assay分析 | 第21-22页 |
| 2.7 亚细胞定位 | 第22页 |
| 2.8 RNA-seq分析转GmCBS21基因拟南芥 | 第22-23页 |
| 2.9 酵母双杂交文库的构建 | 第23-24页 |
| 2.10 GmCBS21互作蛋白的筛选 | 第24-25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-50页 |
| 3.1 大豆CBS结构域基因家族生物信息学分析 | 第25-32页 |
| 3.1.1 大豆CBS结构域基因家族成员 | 第25-27页 |
| 3.1.2 大豆CBS家族成员系统进化及基因结构分析 | 第27-29页 |
| 3.1.3 大豆CBS家族保守基序分析 | 第29-31页 |
| 3.1.4 大豆CBS家族染色体定位 | 第31-32页 |
| 3.2 GmCBS21基因特征描述 | 第32-38页 |
| 3.2.1 GmCBS21系统发育树分析 | 第32-34页 |
| 3.2.2 GmCBS21的表达模式和亚细胞定位分析 | 第34-37页 |
| 3.2.3 原核表达及cystathionine β-synthase活性检测 | 第37-38页 |
| 3.3 RNA-seq分析转GmCBS21基因拟南芥 | 第38-45页 |
| 3.3.1 测序数据量评估 | 第38-39页 |
| 3.3.2 差异表达基因筛选 | 第39-40页 |
| 3.3.3 Gene Ontology功能显著性富集分析 | 第40-41页 |
| 3.3.4 Pathway显著性富集分析 | 第41-42页 |
| 3.3.5 已知的氮利用相关差异表达基因 | 第42页 |
| 3.3.6 转录因子和激酶在转基因植株中的差异表达 | 第42-45页 |
| 3.3.7 光合作用相关差异表达基因 | 第45页 |
| 3.4 酵母双杂交筛选GmCBS21互作蛋白 | 第45-50页 |
| 3.4.1 酵母双杂交文库的构建 | 第45-47页 |
| 3.4.2 GmCBS21互作蛋白的筛选 | 第47-50页 |
| 4 讨论 | 第50-52页 |
| 4.1 关于CBS结构域基因 | 第50页 |
| 4.2 关于RNA-seq分析转基因植株 | 第50-51页 |
| 4.3 关于酵母双杂交 | 第51-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 6 参考文献 | 第53-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 博士生期间发表的学术论文、专著、重要科研成果 | 第64-65页 |
| 博士后期间发表的学术论文、专著、重要科研成果 | 第65-66页 |
| 个人简历 | 第66-67页 |
