| 中文摘要(一) | 第6-7页 |
| 中文摘要(二) | 第7-8页 |
| Abstract 1 | 第8-10页 |
| Abstract 2 | 第10-12页 |
| 前言 | 第12-17页 |
| 参考文献 | 第14-17页 |
| 第一部分：通心络通过neuregulin-1/ErbB信号通路促进心脏微血管内皮细胞功能 | 第17-55页 |
| 背景 | 第17-18页 |
| 材料与方法 | 第18-42页 |
| 1. 研究路线 | 第18-20页 |
| 1.1. 拟探索的问题 | 第18页 |
| 1.2. 研究路线 | 第18-20页 |
| 2. 实验材料 | 第20-28页 |
| 2.1. 研究对象 | 第20页 |
| 2.2. 实验仪器 | 第20-22页 |
| 2.3. 实验器材 | 第22页 |
| 2.4. 主要实验试剂及配制 | 第22-28页 |
| 3. 实验方法 | 第28-42页 |
| 3.1. SD大鼠各器官组织的取材、固定、包埋、石蜡切片的制作 | 第28-29页 |
| 3.2. vWF与NRG-1免疫荧光共染实验步骤 | 第29-30页 |
| 3.3. 浓度为800μg/ml的通心络超微粉干预液的配制 | 第30-31页 |
| 3.4. 心脏微血管内皮细胞(HCMECs)的复苏、培养、传代、冻存培养和传代 | 第31-34页 |
| 3.5. Neuregulin-1 shRNA慢病毒颗粒的转染、筛选及鉴定 | 第34-35页 |
| 3.6. 细胞蛋白的提取 | 第35页 |
| 3.7. BCA法测量蛋白浓度 | 第35-36页 |
| 3.8. Western Blot方法 | 第36-37页 |
| 3.9. 酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞培养上清中NRG-1的含量 | 第37-39页 |
| 3.10. CCK-8法检测HCMECs体外增殖活力 | 第39-40页 |
| 3.11. 划痕试验检测HCMECs体外迁移能力 | 第40页 |
| 3.12. CCK-8法检测HCMECs缺氧/复氧损伤后细胞的存活率 | 第40-41页 |
| 3.13. TUNEL染色法检测H/R损伤后HCMECs的凋亡 | 第41页 |
| 3.14. 数据统计分析 | 第41-42页 |
| 研究结果 | 第42-50页 |
| 1. Neuregulin-1特异性的表达于心脏微血管内皮细胞及心内膜 | 第42-45页 |
| 2. Neuregulin-1自分泌促进人心脏微血管内皮细胞功能 | 第45-47页 |
| 2.1. 通过转染neuregulin-1 shRNA慢病毒颗粒可有效抑制HCMECs NRG-1的表达 | 第45页 |
| 2.2. Neuregulin-1自分泌促进人心脏微血管内皮细胞体外增殖活力和迁移能力 | 第45-46页 |
| 2.3. Neuregulin-1自分泌促进人心脏微血管内皮细胞抗H/R损伤能力 | 第46-47页 |
| 3. 通心络通过neuregulin-1/ErbB信号通路促进人心脏微血管内皮细胞功能 | 第47-50页 |
| 3.1. 通心络通过neuregulin-1/ErbB信号通路促进人心脏微血管内皮细胞体外增殖活力和迁移能力 | 第47-48页 |
| 3.2. 通心络通过neuregulin-1/ErbB信号通路促进人心脏微血管内皮细胞抗H/R损伤能力 | 第48-50页 |
| 讨论 | 第50-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-55页 |
| 第二部分 ：通心络通过neuregulin-1/ErbB信号通路减轻大鼠急性心梗再灌后心肌无再流和再灌注损伤 | 第55-98页 |
| 背景 | 第55-57页 |
| 材料和方法 | 第57-76页 |
| 1. 实验流程 | 第57-58页 |
| 2. 伦理声明 | 第58页 |
| 3. 主要实验仪器和材料 | 第58-62页 |
| 3.1. 主要实验仪器 | 第58-59页 |
| 3.2. 主要实验器材 | 第59页 |
| 3.3. 主要实验药品及配制 | 第59页 |
| 3.4. 主要实验试剂及配制 | 第59-62页 |
| 4. 实验方法及步骤 | 第62-76页 |
| 4.1 大鼠急性心梗(1小时)/再灌注(24小时)模型的建立及取材(急性期实验) | 第62-65页 |
| 4.2. 大鼠急性心梗(1小时)/再灌注(4周)模型的建立及取材(慢性期实验) | 第65-66页 |
| 4.3. 石蜡切片的制作 | 第66页 |
| 4.4. 苏木素-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE染色) | 第66-67页 |
| 4.5. 马松(Masson)染色 | 第67-68页 |
| 4.6. 免疫组织化学染色 | 第68-69页 |
| 4.7. 免疫荧光染色 | 第69页 |
| 4.8. 透射电镜标本制作及观察 | 第69-70页 |
| 4.9. 心肌组织含水量的测定 | 第70-71页 |
| 4.10. 5%组织匀浆的提取 | 第71页 |
| 4.11. 组织总RNA的提取 | 第71页 |
| 4.12. 实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测NRG-1、VE-cadherin、IL-1β、TNF-α在心脏各区域mRNA的表达 | 第71-73页 |
| 4.13. ELISA法检测血清及组织匀浆中NRG-1的表达 | 第73-75页 |
| 4.14. 实验动物排除标准 | 第75页 |
| 4.15. 数据统计分析 | 第75-76页 |
| 研究结果 | 第76-94页 |
| 一、急性期实验研究结果 | 第76-91页 |
| 1. AMI前15分钟预给予低负荷剂量的TXL可有效减小心肌缺血再灌注损伤,缩小心肌无再流面积和梗死面积 | 第76-77页 |
| 2. AMI前15分钟预给予低负荷剂量的TXL可有效改善急性心肌缺血再灌后急性期心功能 | 第77-79页 |
| 4. 通心络显著促进neuregulin-1的分泌 | 第79-80页 |
| 5. 心肌不同区域病理形态学观察 | 第80-89页 |
| 6. 各部位心肌组织含水量的测定以及VE-cadherin、TNF-α、IL-1β的表达 | 第89页 |
| 7. 各部位心肌组织neuregulin-1 mRNA及蛋白的表达 | 第89-90页 |
| 8. 各组动物心肌组织HE染色及Masson染色结果 | 第90页 |
| 9. 各组动物心肌组织CD45及CD68染色结果 | 第90-91页 |
| 二、慢性期实验研究结果 | 第91-94页 |
| 1. TXL显著减小AMI再灌注后远期的胶原面积 | 第91页 |
| 2. TXL显著改善AMI再灌注后远期心功能 | 第91-92页 |
| 3. TXL持续促进AMI再灌注后Neuregulin-1的分泌 | 第92-94页 |
| 讨论 | 第94-95页 |
| 1. TXL能有效减轻大鼠AMI再灌后心肌无再流和再灌注损伤,缩小梗死面积,该保护作用部分通过neuregulin-1/ErbB信号通路 | 第94页 |
| 2. 微血管内皮屏障破坏是心肌无再流区最显著的病理学特征,也是AMI再灌后心肌无再流发生的重要机制 | 第94-95页 |
| 结论 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-98页 |
| 论文综述 远隔缺血处理在心肌缺血再灌注损伤领域的研究进展 | 第98-107页 |
| 一、研究历史 | 第98-99页 |
| 二、保护机制 | 第99-100页 |
| 三、临床研究 | 第100-101页 |
| (1) 远隔缺血预处理(RIPC) | 第100-101页 |
| (2) 远隔缺血同处理(RIPerC) | 第101页 |
| (3) 远隔缺血后处理(RIPostC) | 第101页 |
| 四、总结与展望 | 第101-103页 |
| 参考文献 | 第103-107页 |
| 缩略语表 | 第107-108页 |
| 个人简历 | 第108-109页 |
| 致谢 | 第109-111页 |
