| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| Abbreviation | 第12-14页 |
| 第一部分 绪论 | 第14-20页 |
| 1.1 肺癌的研究现状 | 第14页 |
| 1.2 巨噬细胞与肺癌的发生 | 第14-15页 |
| 1.3 新生血管与肿瘤的进展 | 第15-17页 |
| 1.4 自噬与肺癌的恶化 | 第17-20页 |
| 第二部分 巨噬细胞极化对LLC细胞作用研究 | 第20-36页 |
| 2.1 前言 | 第20-21页 |
| 2.2 实验材料 | 第21-23页 |
| 2.2.1 试剂材料 | 第21页 |
| 2.2.2 试剂配制 | 第21-22页 |
| 2.2.3 实验细胞 | 第22-23页 |
| 2.2.4 实验动物 | 第23页 |
| 2.2.5 主要仪器 | 第23页 |
| 2.3 实验方法 | 第23-26页 |
| 2.3.1 腹腔巨噬细胞分离与纯化 | 第23页 |
| 2.3.2 巨噬细胞极化及收集巨噬细胞极化条件培养基 | 第23-24页 |
| 2.3.3 流式细胞术（FCM）检测巨噬细胞表型 | 第24页 |
| 2.3.4 巨噬细胞吞噬LLC细胞实验 | 第24页 |
| 2.3.5 MTT法检测细胞增殖实验 | 第24-25页 |
| 2.3.6 PCNA免疫荧光法检测细胞增殖实验 | 第25页 |
| 2.3.7 细胞划痕实验 | 第25页 |
| 2.3.8 Transwell实验 | 第25-26页 |
| 2.3.9 统计学分析 | 第26页 |
| 2.4 实验结果 | 第26-34页 |
| 2.4.1 小鼠腹腔巨噬细胞诱导前后形态变化 | 第26页 |
| 2.4.2 巨噬细胞极化 | 第26-27页 |
| 2.4.3 巨噬细胞吞噬LLC细胞实验 | 第27-28页 |
| 2.4.4 巨噬细胞极化条件培养基对LLC细胞增殖的影响 | 第28-31页 |
| 2.4.5 巨噬细胞极化条件培养基对LLC细胞迁移能力的影响 | 第31-32页 |
| 2.4.6 巨噬细胞极化条件培养基对LLC细胞侵袭能力的影响 | 第32-34页 |
| 2.5 实验小结 | 第34-36页 |
| 第三部分 巨噬细胞极化对体外新生血管的影响 | 第36-42页 |
| 3.1 前言 | 第36页 |
| 3.2 实验材料 | 第36-37页 |
| 3.2.1 试剂材料 | 第36页 |
| 3.2.2 实验动物 | 第36-37页 |
| 3.2.3 实验细胞 | 第37页 |
| 3.2.4 实验仪器 | 第37页 |
| 3.3 实验方法 | 第37-38页 |
| 3.3.1 MTT法检测HUVEC细胞增殖 | 第37页 |
| 3.3.2 PCNA免疫荧光法检测HUVEC细胞增殖 | 第37页 |
| 3.3.3 伊文斯兰渗出法检测HUVEC细胞通透性 | 第37页 |
| 3.3.4 鸡胚尿囊膜（CAM）法检测巨噬细胞对体外血管生成的影响 | 第37-38页 |
| 3.3.5 统计学分析 | 第38页 |
| 3.4 实验结果 | 第38-41页 |
| 3.4.1 巨噬细胞极化对HUVEC细胞增殖的影响 | 第38-39页 |
| 3.4.2 伊文斯兰渗出法检测HUVEC细胞体外通透性 | 第39-40页 |
| 3.4.3 鸡胚尿囊膜实验检测巨噬细胞对新生血管的影响 | 第40-41页 |
| 3.5 实验小结 | 第41-42页 |
| 第四部分 巨噬细胞极化对HUVEC细胞自噬的影响 | 第42-58页 |
| 4.1 前言 | 第42-43页 |
| 4.2 实验材料 | 第43页 |
| 4.2.1 实验试剂 | 第43页 |
| 4.2.2 实验细胞 | 第43页 |
| 4.2.3 实验仪器 | 第43页 |
| 4.3 实验方法 | 第43-45页 |
| 4.3.1 AO染色检测HUVEC细胞自噬小体形成 | 第43-44页 |
| 4.3.2 免疫荧光检测HUVEC自噬相关蛋白表达 | 第44页 |
| 4.3.3 DQ-Green BSA检测溶酶体活性 | 第44页 |
| 4.3.4 HUVEC细胞中NO含量检测 | 第44-45页 |
| 4.3.5 HUVEC细胞中ROS含量检测 | 第45页 |
| 4.3.6 AO/EB染色检测HUVEC细胞凋亡 | 第45页 |
| 4.4 实验结果 | 第45-56页 |
| 4.4.1 AO染色检测HUVEC细胞自噬小体形成 | 第45-47页 |
| 4.4.2 LC3-B蛋白形成检测 | 第47-48页 |
| 4.4.3 P62蛋白降解检测 | 第48-50页 |
| 4.4.4 DQ-Green BSA检测自噬降解情况 | 第50-51页 |
| 4.4.5 AO/EB检测HUVEC细胞凋亡 | 第51-53页 |
| 4.4.6 DAF-2DA检测HUVEC细胞NO生成 | 第53-54页 |
| 4.4.7 DCF-DA检测HUVEC细胞内ROS生成 | 第54-56页 |
| 4.5 实验小结 | 第56-58页 |
| 第五部分 巨噬细胞对体内肺癌模型发展的影响 | 第58-78页 |
| 5.1 前言 | 第58-59页 |
| 5.2 实验材料 | 第59-61页 |
| 5.2.1 实验试剂 | 第59页 |
| 5.2.2 实验试剂配制 | 第59-60页 |
| 5.2.3 实验动物 | 第60页 |
| 5.2.4 实验仪器 | 第60-61页 |
| 5.3 实验方法 | 第61-66页 |
| 5.3.1 小鼠肺组织中巨噬细胞表型检测 | 第61-62页 |
| 5.3.2 肺癌组织HE染色 | 第62-63页 |
| 5.3.3 免疫组化法检测肺组织中P62、LC3-B、CD31蛋白表达 | 第63-64页 |
| 5.3.4 Western Blot方法 | 第64-66页 |
| 5.4 实验结果 | 第66-77页 |
| 5.4.1 乌拉坦诱导对小鼠体征的影响 | 第66-68页 |
| 5.4.2 乌拉坦诱导对小鼠血清中 5-HIAA水平的影响 | 第68页 |
| 5.4.3 乌拉坦诱导对小鼠肺泡细胞中巨噬细胞表型的影响 | 第68-70页 |
| 5.4.4 药物干预对乌拉坦诱导的小鼠肺癌模型的病理特征的影响 | 第70-71页 |
| 5.4.5 乌拉坦诱导对小鼠肺组织自噬相关蛋白表达的影响 | 第71-72页 |
| 5.4.6 药物干预对乌拉坦诱导小鼠肺新生血管的影响 | 第72-74页 |
| 5.4.7 药物干预对乌拉坦诱导小鼠肺血管通透性的影响 | 第74页 |
| 5.4.8 药物干预对乌拉坦诱导小鼠肺重量和肿瘤数的影响 | 第74-77页 |
| 5.5 实验小结 | 第77-78页 |
| 第六部分 讨论 | 第78-80页 |
| 第七部分 实验结论 | 第80-82页 |
| 第八部分 论文创新点 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-92页 |
| 致谢 | 第92-94页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第94-95页 |
