| 摘要 | 第8-12页 |
| ABSTRACT | 第12-16页 |
| 符号说明 | 第17-19页 |
| 前言 | 第19-21页 |
| 材料和方法 | 第21-34页 |
| 1 实验仪器和材料 | 第21-23页 |
| 1.1 主要仪器 | 第21-22页 |
| 1.2 主要试剂及耗材 | 第22-23页 |
| 2 实验方法 | 第23-34页 |
| 2.1 主要溶液和试剂配制 | 第23-25页 |
| 2.2 细胞培养 | 第25-26页 |
| 2.3 细胞转染 | 第26页 |
| 2.4 逆转录病毒制备和感染 | 第26-27页 |
| 2.5 慢病毒的制备和感染 | 第27页 |
| 2.6 组织和细胞的总RNA提取 | 第27-28页 |
| 2.7 逆转录和实时定量PCR(qRT-PCR) | 第28页 |
| 2.8 总蛋白质提取 | 第28页 |
| 2.9 BCA蛋白质定量检测 | 第28-29页 |
| 2.10 Western Blot | 第29页 |
| 2.11 MTT实验 | 第29-30页 |
| 2.12 细胞划痕实验 | 第30页 |
| 2.13 细胞迁移实验 | 第30页 |
| 2.14 细胞侵袭实验 | 第30页 |
| 2.15 软琼脂糖克隆形成实验 | 第30-31页 |
| 2.16 裸鼠成瘤实验 | 第31页 |
| 2.17 体内转移实验 | 第31-32页 |
| 2.18 HE染色 | 第32页 |
| 2.19 免疫组织化学染色 | 第32-33页 |
| 2.20 ATP检测实验 | 第33页 |
| 2.21 统计学分析 | 第33-34页 |
| 结果 | 第34-39页 |
| 1. ENO1在结肠癌组织中的表达明显升高 | 第34页 |
| 2. ENO1促进结肠癌细胞系HCT116的肿瘤特性 | 第34-36页 |
| 2.1 建立稳定过表达和干扰ENO1基因的HCT116细胞系 | 第34-35页 |
| 2.2 ENO1基因促进结肠癌细胞的增殖和肿瘤形成能力 | 第35页 |
| 2.3 ENO1促进结肠癌细胞的迁移、侵袭及转移能力 | 第35-36页 |
| 3. ENO1通过调控APMK/mTOR信号通路进而促进结肠癌细胞的肿瘤特性 | 第36-39页 |
| 3.1 ENO1促进细胞合成ATP | 第36-37页 |
| 3.2 ENO1通过抑制APMK蛋白质的磷酸化激活mTOR信号通路 | 第37页 |
| 3.3 AICAR和Rapamycin抑制过表达ENO1引起的结肠癌细胞的肿瘤特性 | 第37-39页 |
| 讨论 | 第39-41页 |
| 结论 | 第41-42页 |
| 附图 | 第42-52页 |
| 参考文献 | 第52-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第56-57页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第57页 |
