摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
缩写名词表 | 第8-9页 |
1 前言 | 第9-15页 |
1.1 脂肪酸合成代谢途径 | 第9-11页 |
1.2 脂肪酸合成中关键酶的特性 | 第11-12页 |
1.3 酮脂酰-ACP还原酶(KAR)的研究进展 | 第12-13页 |
1.4 脂肪酸合成的其它相关酶的研究进展 | 第13-14页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第14-15页 |
2 材料与方法 | 第15-22页 |
2.1 实验材料 | 第15-18页 |
2.1.1 植物材料 | 第15页 |
2.1.2 菌株和载体 | 第15页 |
2.1.3 主要试剂 | 第15-16页 |
2.1.4 常用仪器 | 第16-17页 |
2.1.5 所用引物 | 第17-18页 |
2.2 实验方法 | 第18-22页 |
2.2.1 全长cDNA的克隆及载体构建和转化 | 第18页 |
2.2.2 原核蛋白的表达、纯化及体外酶活分析 | 第18-19页 |
2.2.3 水稻突变体材料鉴定 | 第19-20页 |
2.2.4 植物RNA提取、半定量RT-PCR及Real-time PCR分析 | 第20页 |
2.2.5 提取植物叶片的脂肪酸含量的分析 | 第20-21页 |
2.2.6 农杆菌介导转化烟草 | 第21页 |
2.2.7 水稻组织中丙二醛含量的测定 | 第21-22页 |
3 结果与分析 | 第22-38页 |
3.1 生物信息学分析 | 第22-24页 |
3.2 KAR1表达谱分析 | 第24-25页 |
3.3 KAR1全长cDNA的克隆 | 第25页 |
3.4 KAR1蛋白纯化及活性分析 | 第25-26页 |
3.5 KAR1-GFP载体构建、转化及表达量分析 | 第26-27页 |
3.6 KAR1亚细胞定位观察 | 第27-28页 |
3.7 KAR1突变体分离鉴定 | 第28-29页 |
3.8 KAR1-OE载体构建、转化苗鉴定及表达量分析 | 第29-30页 |
3.9 KAR1-RNAi载体构建、转化及表达量分析 | 第30-31页 |
3.10 KAR1缺失对种子中的脂质代谢的影响 | 第31-32页 |
3.11 正常条件下KAR1超表达和RNAi对脂质代谢的影响 | 第32-33页 |
3.12 KAR1缺失在正常条件对磷脂和糖脂没有明显影响 | 第33-35页 |
3.13 水稻不同条件处理下的表达谱分析 | 第35页 |
3.14 KAR1响应热激处理 | 第35-36页 |
3.15 热激处理下KAR1对脂质代谢的影响 | 第36-38页 |
4 讨论 | 第38-40页 |
5 参考文献 | 第40-45页 |
致谢 | 第45页 |