| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6页 |
| 第1章 绪论 | 第9-23页 |
| 1.1 微重力及其生物学效应研究 | 第9-17页 |
| 1.1.1 微重力简介 | 第9页 |
| 1.1.2 模拟微重力及其研究方法 | 第9-11页 |
| 1.1.3 微重力对生命体的影响 | 第11-14页 |
| 1.1.4 微重力对细胞的影响 | 第14-17页 |
| 1.2 cep135的研究现状 | 第17-20页 |
| 1.2.1 中心体简介 | 第17-18页 |
| 1.2.2 cep135的结构和功能 | 第18-20页 |
| 1.3 microRNA对表达调控的影响 | 第20-21页 |
| 1.3.1 microRNA简介 | 第20-21页 |
| 1.3.2 microRNA对转录后的调控 | 第21页 |
| 1.4 本课题组前期研究 | 第21-22页 |
| 1.5 本研究的目的及意义 | 第22-23页 |
| 第2章 材料与方法 | 第23-44页 |
| 2.1 实验材料 | 第23页 |
| 2.2 实验设备及试剂 | 第23-26页 |
| 2.2.1 实验设备 | 第23页 |
| 2.2.2 实验耗材及试剂 | 第23-26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-43页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第26-29页 |
| 2.3.2 RCCS清洗灭菌 | 第29页 |
| 2.3.3 细胞模拟微重力处理 | 第29-31页 |
| 2.3.4 细胞周期测定 | 第31-32页 |
| 2.3.5 cep135的实时荧光定量PCR检测 | 第32-36页 |
| 2.3.6 microRNA的实时荧光定量PCR检测 | 第36-38页 |
| 2.3.7 蛋白质免疫印迹实验 | 第38-41页 |
| 2.3.8 MLTC-1细胞转染 | 第41页 |
| 2.3.9 双荧光素酶基因报告检测 | 第41-43页 |
| 2.3.10 统计学分析方法 | 第43页 |
| 2.4 技术路线 | 第43-44页 |
| 第3章 结果与讨论 | 第44-59页 |
| 3.1 模拟微重力对Jurkat细胞cep135表达的影响 | 第44-50页 |
| 3.1.1 模拟微重力对Jurkat细胞cep135mRNA表达的影响 | 第44-48页 |
| 3.1.2 模拟微重力对Jurkat细胞CEP135蛋白表达的影响 | 第48-50页 |
| 3.2 模拟微重力对Jurkat细胞hsa-miR-22表达的影响 | 第50-51页 |
| 3.2.1 hsa-miR-22序列的获得 | 第50页 |
| 3.2.2 模拟微重力对Jurkat细胞hsa-miR-22表达的影响 | 第50-51页 |
| 3.3 hsa-miR-22与cep135的靶向关系的确认 | 第51-56页 |
| 3.3.1 hsa-miR-22与cep135的靶向关系预测 | 第51-52页 |
| 3.3.2 双荧光素酶表达载体质粒的构建 | 第52-53页 |
| 3.3.3 共转染实验条件优化 | 第53-54页 |
| 3.3.4 双荧光素酶基因报告活性检测 | 第54-56页 |
| 3.4 模拟微重力对Jurkat细胞周期的影响及其调控机制 | 第56-59页 |
| 3.4.1 模拟微重力对Jurkat细胞周期的影响 | 第56-57页 |
| 3.4.2 模拟微重力对Jurkat细胞周期阻滞的调控机制 | 第57-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 附录A 质粒中野生型和突变型cep135基因3'UTR序列 | 第68-69页 |
| 附录B 转染条件的探索 | 第69-72页 |
| 附录C 模拟微重力对Jurkat细胞周期的影响 | 第72-73页 |
| 攻读学位期间公开发表论文 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 作者简介 | 第75页 |
