致谢 | 第4-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
1. 文献综述 | 第8-18页 |
1.1 Exendin-4简介 | 第8-12页 |
1.2 Ⅱ型糖尿病的发病机理 | 第12-13页 |
1.2.1 胰岛素抵抗 | 第12页 |
1.2.2 胰岛β细胞功能障碍 | 第12页 |
1.2.3 胰高血糖素与胰岛素相互调节 | 第12-13页 |
1.2.4 中枢神经系统调节 | 第13页 |
1.3 目前治疗Ⅱ型糖尿病的药物及手段 | 第13-16页 |
1.3.1 治疗Ⅱ型糖尿病的药物 | 第14-15页 |
1.3.2 治疗Ⅱ型糖尿病的手段 | 第15-16页 |
1.4 GLP-1类似物Exendin-4的研究进展 | 第16-18页 |
1.4.1 GLP-1 | 第16-17页 |
1.4.2 Exendin-4 | 第17-18页 |
2. 引言 | 第18-20页 |
3. 材料与方法 | 第20-31页 |
3.1 材料、试剂与仪器 | 第20-21页 |
3.1.1 菌株与重组表达质粒 | 第20页 |
3.1.2 培养基 | 第20页 |
3.1.3 试剂 | 第20页 |
3.1.4 主要仪器 | 第20页 |
3.1.5 实验动物 | 第20-21页 |
3.2 实验方法 | 第21-31页 |
3.2.1 制备菌种 | 第21-22页 |
3.2.2 诱导表达 | 第22页 |
3.2.3 重组Exendin-4的纯化与鉴定 | 第22-23页 |
3.2.4 Exendin-4体内半衰期测定 | 第23-28页 |
3.2.5 重组和化合Exendin-4标准曲线设计和体外稳定性测定 | 第28-30页 |
3.2.6 Exendin-4二级结构测定 | 第30-31页 |
4. 结果与分析 | 第31-45页 |
4.1 pET-32a(+)- Exendin-4质粒的PCR检测 | 第31页 |
4.2 Trx-Exendin-4融合蛋白的表达 | 第31-32页 |
4.3 Trx-Exendin-4和Exendin-4 的纯化 | 第32-33页 |
4.4 RP-HPLC对肠激酶缓冲液中的Exendin-4纯度分析 | 第33-35页 |
4.5 MALDI-TOF-MS对Exendin-4质的鉴定结果 | 第35-36页 |
4.6 Exendin-4体内半衰期测定 | 第36-42页 |
4.7 重组和化合Exendin-4在人体外血浆中的稳定性比较研究 | 第42页 |
4.8 Exendin-4二级结构测定 | 第42-45页 |
5. 结论与讨论 | 第45-47页 |
5.1 结论 | 第45页 |
5.2 讨论 | 第45-47页 |
参考文献 | 第47-53页 |
ABSTRACT | 第53页 |