中文摘要 | 第3-5页 |
英文摘要 | 第5-6页 |
英汉缩略词表 | 第9-11页 |
1 绪论 | 第11-22页 |
1.1 问题的提出及研究意义 | 第11-20页 |
1.1.1 问题的提出 | 第11-19页 |
1.1.2 研究意义 | 第19-20页 |
1.2 本文研究的目的和研究内容 | 第20-22页 |
1.2.1 本文研究的目的 | 第20页 |
1.2.2 本文研究的主要内容 | 第20-21页 |
1.2.3 技术路线 | 第21-22页 |
2 不同刚度脱细胞基质的制备及表征 | 第22-51页 |
2.1 引言 | 第22页 |
2.2 实验材料 | 第22-28页 |
2.2.1 实验细胞和实验动物 | 第22页 |
2.2.2 主要仪器设备及耗材 | 第22-24页 |
2.2.3 主要试剂与配制方法 | 第24-28页 |
2.3 实验方法 | 第28-40页 |
2.3.1 过表达与干扰LOX慢病毒载体构建与包装 | 第28-30页 |
2.3.2 MDA-MB-231 细胞培养 | 第30-31页 |
2.3.3 慢病毒转染MDA-MB-231 细胞 | 第31页 |
2.3.4 LOX基因表达的qPCR检测 | 第31-34页 |
2.3.5 LOX蛋白表达的Western blot检测 | 第34-36页 |
2.3.6 脱细胞基质的制备 | 第36-37页 |
2.3.7 脱细胞基质表征 | 第37-39页 |
2.3.8 SEM观察基质显微结构 | 第39-40页 |
2.3.9 基质力学性能测定 | 第40页 |
2.3.10 数据分析 | 第40页 |
2.4 实验结果 | 第40-48页 |
2.4.1 慢病毒载体转染MDA-MB-231 后细胞形态变化及荧光差异 | 第40-41页 |
2.4.2 MDA-MB-231 细胞LOX基因和蛋白表达 | 第41-42页 |
2.4.3 肿瘤组织的生长与获取 | 第42-44页 |
2.4.4 组织学染色 | 第44-45页 |
2.4.5 DNA含量 | 第45-46页 |
2.4.6 显微结构及孔隙率 | 第46-47页 |
2.4.7 力学性能 | 第47-48页 |
2.5 分析讨论 | 第48-50页 |
2.6 本章小结 | 第50-51页 |
3 不同刚度脱细胞基质对MDA-MB-231 生物学行为的影响 | 第51-59页 |
3.1 引言 | 第51页 |
3.2 实验材料 | 第51-52页 |
3.2.1 实验细胞 | 第51页 |
3.2.2 主要仪器设备及耗材 | 第51页 |
3.2.3 主要试剂与配制方法 | 第51-52页 |
3.3 实验方法 | 第52-53页 |
3.3.1 细胞培养 | 第52页 |
3.3.2 细胞种入脱细胞基质 | 第52页 |
3.3.3 细胞活性检测 | 第52页 |
3.3.4 Live/dead染色 | 第52页 |
3.3.5 细胞浸润 | 第52页 |
3.3.6 EMT相关基因表达的qPCR检测 | 第52-53页 |
3.3.7 数据分析 | 第53页 |
3.4 实验结果 | 第53-56页 |
3.4.1 细胞活性 | 第53-54页 |
3.4.2 细胞浸润 | 第54-55页 |
3.4.3 不同刚度支架上EMT相关基因的表达 | 第55-56页 |
3.5 分析讨论 | 第56-58页 |
3.6 本章小结 | 第58-59页 |
4 结论与展望 | 第59-60页 |
4.1 本文研究的主要结论 | 第59页 |
4.2 后续工作及展望 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-68页 |
附录 | 第68页 |
A作者在攻读学位期间发表的论文目录 | 第68页 |
B作者在攻读学位期间参与的科研项目目录 | 第68页 |