中文摘要 | 第3-4页 |
英文摘要 | 第4-5页 |
英文缩略词 | 第9-11页 |
1 绪论 | 第11-26页 |
1.1 问题的提出及研究意义 | 第11-12页 |
1.2 国内外研究现状 | 第12-24页 |
1.2.1 骨关节炎定义 | 第12页 |
1.2.2 关节软骨的生存环境 | 第12-14页 |
1.2.3 主要危险因素 | 第14-16页 |
1.2.4 病理学改变 | 第16-18页 |
1.2.5 与胞外基质降解有关的信号通路 | 第18-20页 |
1.2.6 相关基因的研究进展 | 第20-24页 |
1.3 研究目的与研究内容 | 第24-25页 |
1.3.1 本文研究的目的 | 第24页 |
1.3.2 本文的主要研究内容 | 第24页 |
1.3.3 技术路线 | 第24-25页 |
1.4 本文的创新之处 | 第25-26页 |
2 SD大鼠关节软骨细胞的培养与鉴定 | 第26-35页 |
2.1 引言 | 第26页 |
2.2 材料与试剂 | 第26-28页 |
2.2.1 实验细胞 | 第26页 |
2.2.2 实验仪器及耗材 | 第26-27页 |
2.2.3 实验试剂 | 第27-28页 |
2.2.4 主要试剂的配制 | 第28页 |
2.3 实验方法 | 第28-31页 |
2.3.1 SD大鼠膝关节软骨细胞的分离与培养 | 第28-30页 |
2.3.2 软骨细胞生长曲线的测定 | 第30页 |
2.3.3 软骨细胞的鉴定 | 第30-31页 |
2.4 实验结果 | 第31-33页 |
2.4.1 软骨细胞生长状态 | 第31页 |
2.4.2 软骨细胞活力的测定 | 第31-32页 |
2.4.3 甲苯胺蓝染色 | 第32页 |
2.4.4 II型胶原免疫荧光染色鉴定 | 第32-33页 |
2.5 分析讨论 | 第33-34页 |
2.6 本章小结 | 第34-35页 |
3 高渗/周期性压应力对软骨细胞的影响 | 第35-52页 |
3.1 引言 | 第35-36页 |
3.2 材料与仪器 | 第36-38页 |
3.2.1 实验细胞 | 第36页 |
3.2.2 实验仪器及耗材 | 第36页 |
3.2.3 实验试剂 | 第36-37页 |
3.2.4 主要试剂配制 | 第37-38页 |
3.3 实验方法 | 第38-44页 |
3.3.1 细胞培养 | 第38页 |
3.3.2 不同渗透压处理 | 第38-39页 |
3.3.3 周期性张应力(CTS)加载 | 第39页 |
3.3.4 实时定量RT-qPCR | 第39-41页 |
3.3.5 蛋白免疫印迹(western blot) | 第41-44页 |
3.3.6 免疫荧光染色(Immunofluorescence) | 第44页 |
3.3.7 数据分析 | 第44页 |
3.4 实验结果 | 第44-50页 |
3.4.1 渗透压对软骨细胞的影响 | 第44-45页 |
3.4.2 渗透压促进软骨细胞各基因的表达 | 第45-47页 |
3.4.3 力学载荷促进软骨细胞各基因的表达 | 第47-50页 |
3.5 分析讨论 | 第50-51页 |
3.6 本章小结 | 第51-52页 |
4 与调控作用相关的信号通路 | 第52-57页 |
4.1 引言 | 第52页 |
4.2 材料与仪器 | 第52-53页 |
4.2.1 实验细胞来源 | 第52页 |
4.2.2 实验仪器及耗材 | 第52页 |
4.2.3 实验试剂 | 第52-53页 |
4.2.4 主要试剂的配制 | 第53页 |
4.3 实验方法 | 第53-54页 |
4.3.1 细胞培养 | 第53页 |
4.3.2 三种抑制剂处理 | 第53-54页 |
4.3.3 实时定量RT-qPCR | 第54页 |
4.3.4 数据分析 | 第54页 |
4.4 实验结果 | 第54-56页 |
4.5 分析讨论 | 第56页 |
4.6 本章小结 | 第56-57页 |
5 结论与展望 | 第57-58页 |
5.1 主要结论 | 第57页 |
5.2 后续展望 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-67页 |
附录 | 第67页 |
A 作者在攻读学位期间参与的科研项目目录 | 第67页 |
B 作者在攻读学位期间发表的论文 | 第67页 |