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钛材表面仿生多层结构促骨形成及分子机制研究

中文摘要第3-6页
英文摘要第6-9页
1 绪论第18-34页
    1.1 问题的提出及研究意义第18-19页
    1.2 国内外相关领域的研究现状第19-30页
        1.2.1 骨的形态发生、生长和重塑第20-21页
        1.2.2 骨的基本特征第21-22页
        1.2.3 骨组织的结构组成第22-23页
        1.2.4 骨组织中的细胞第23-24页
        1.2.5 骨损伤的修复过程第24-26页
        1.2.6 骨损伤修复与血管化第26页
        1.2.7 钛-骨组织整合修复早期失败的主要因素第26-27页
        1.2.8 氧化应激与骨损伤修复第27-28页
        1.2.9 钛材表面层层组装改性的研究现状第28-30页
    1.3 研究思路及主要研究内容第30-31页
        1.3.1 本文研究思路第30-31页
        1.3.2 本文研究的主要内容第31页
    1.4 本文的创新点第31-34页
2 基于儿茶酚-壳聚糖(Chi-C)多层结构的构建及其促骨修复研究第34-64页
    2.1 前言第34页
    2.2 实验部分第34-44页
        2.2.1 主要实验设备第34-35页
        2.2.2 主要实验药品及试剂第35-36页
        2.2.3 其他第36页
        2.2.4 材料的制备与表征第36页
        2.2.5 多层膜的构建与表征第36-37页
        2.2.6 成骨细胞的分离培养与鉴定第37页
        2.2.7 细胞活死染色和MTT检测第37-38页
        2.2.8 细胞形态观察第38页
        2.2.9 ALP染色和活性检测第38-40页
        2.2.10 天狼猩红染色和胶原分泌定量检测第40页
        2.2.11 茜素红染色和细胞矿化定量检测第40-41页
        2.2.12 总RNA的提取第41-42页
        2.2.13 qRT-PCR检测第42页
        2.2.14 动物手术及影像学评价;第42-43页
        2.2.15 病理染色与组织形态学统计第43-44页
        2.2.16 血管密度计算第44页
        2.2.17 统计学分析第44页
    2.3 结果与讨论第44-62页
        2.3.1 多层膜的制备与表征第44-47页
        2.3.2 成骨细胞的粘附铺展与增殖评价第47-50页
        2.3.3 成骨细胞的分化第50-56页
        2.3.4 体内成骨特性和骨修复第56-62页
    2.4 本章小结第62-64页
3 Chi-C多层膜结构的抗氧化保护作用和机制研究第64-80页
    3.1 前言第64页
    3.2 实验部分第64-68页
        3.2.1 主要实验设备第64-65页
        3.2.2 主要实验药品及试剂第65页
        3.2.3 其他第65页
        3.2.4 氧化应激模型构建的H2O2浓度筛选第65-66页
        3.2.5 早期细胞粘附第66页
        3.2.6 胞内ROS检测:第66页
        3.2.7 粘附基因的qRT-PCR检测第66-67页
        3.2.8 Western blotting检测第67页
        3.2.9 Chi-C的体内抗氧化特性研究第67页
        3.2.10 统计学分析第67-68页
    3.3 结果与讨论第68-77页
        3.3.1 Chi-C多层膜结构对细胞早期粘附的保护作用第68-72页
        3.3.2 Chi-C多层膜结构对细胞内ROS的清除能力第72-73页
        3.3.3 Chi-C多层膜结构的抗氧化保护作用分子机制第73-77页
    3.4 本章小结第77-80页
4 钛基材表面成骨化和成血管化共调控的体外实验研究第80-106页
    4.1 前言第80页
    4.2 实验部分第80-90页
        4.2.1 主要实验设备第80-81页
        4.2.2 主要实验药品及试剂第81-82页
        4.2.3 其他第82页
        4.2.4 白色脂肪间充质干细胞(Ad-MSC)分离、培养与鉴定第82-83页
        4.2.5 早期细胞粘附第83页
        4.2.6 细胞骨架染色观察第83页
        4.2.7 Ad-MSCs细胞免疫荧光染色第83-84页
        4.2.8 细胞划痕实验第84页
        4.2.9 EdU染色第84-85页
        4.2.10 ALP染色和活性检测第85页
        4.2.11 天狼猩红染色和胶原分泌定量检测第85页
        4.2.12 茜素红染色和细胞矿化定量检测第85页
        4.2.13 HUVECs在基底表面的粘附状态研究第85-86页
        4.2.14 HUVECs细胞划痕实验第86页
        4.2.15 qRT-PCR检测第86页
        4.2.16 ELISA检测第86-87页
        4.2.17 钛基材接种Ad-MSC对HUVEC细胞影响研究第87-88页
        4.2.18 钛基材接种HUVECs对Ad-MSC细胞影响研究第88-89页
        4.2.19 蛋白Western blotting检测第89-90页
        4.2.20 统计学分析第90页
    4.3 结果与讨论第90-105页
        4.3.1 Ad-MSC的原代分离培养、鉴定以及在钛基材表面的成骨分化特性第90-95页
        4.3.2 Ad-MSC的在钛基材表面粘附、铺展和迁移特性研究第95-99页
        4.3.3 HUVECs的在钛基材表面粘附、铺展和迁移特性研究第99-101页
        4.3.4 钛基材表面对内皮细胞和间充质干细胞相互作用的调控机制第101-105页
    4.4 本章小结第105-106页
5 钛基材表面成骨化和成血管化共调控的体内实验研究第106-120页
    5.1 前言第106页
    5.2 实验部分第106-109页
        5.2.1 主要实验设备第106页
        5.2.2 主要实验药品及试剂第106-107页
        5.2.3 其他第107页
        5.2.4 动物手术;第107页
        5.2.5 组织处理第107-108页
        5.2.6 H&E染色第108页
        5.2.7 Masson’s三色染色(Masson’s trichrome staining)第108页
        5.2.8 免疫荧光染色第108-109页
        5.2.9 免疫组织化学染色:第109页
        5.2.10 血管密度计算第109页
        5.2.11 统计学分析第109页
    5.3 结果与讨论第109-117页
        5.3.1 损伤修复部位的细胞增殖与干细胞募集第109-112页
        5.3.2 损伤修复部位的血管化水平第112-115页
        5.3.3 钛材界面的成骨评价第115-117页
    5.4 本章小结第117-120页
6 结论及展望第120-122页
    6.1 结论第120页
    6.2 展望第120-122页
致谢第122-124页
参考文献第124-138页
附录第138-139页
    A.作者在攻读博士学位期间科研及发表的论文第138-139页
    B.作者攻读学位期间参加的科研项目第139页

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