| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第1章 绪论 | 第9-27页 |
| 1.1 微粒体的功能化及研究进展 | 第9-15页 |
| 1.1.1 微粒体的简介 | 第9-11页 |
| 1.1.1.1 微粒体概念及形成过程 | 第9页 |
| 1.1.1.2 微粒体的结构 | 第9-10页 |
| 1.1.1.3 微粒体的分离方法 | 第10-11页 |
| 1.1.2 微粒体的功能化修饰及研究现状 | 第11-15页 |
| 1.1.2.1 微粒体的功能 | 第11页 |
| 1.1.2.2 微粒体的功能化修饰及研究进展 | 第11-15页 |
| 1.2 生物正交反应在活细胞标记中的应用 | 第15-19页 |
| 1.2.1 生物正交 | 第15-19页 |
| 1.2.1.1 酮基/醛基与亲核试剂（包括羟胺和肼）的反应 | 第16-17页 |
| 1.2.1.2 斯陶丁格连接反应 | 第17页 |
| 1.2.1.3 氰亚胺与烯环加成 | 第17-18页 |
| 1.2.1.4 叠氮与炔基的点击加成反应 | 第18页 |
| 1.2.1.5 四嗪连接反应 | 第18-19页 |
| 1.3 生物大分子的生物功能化修饰及应用 | 第19-24页 |
| 1.3.1 蛋白质的生物功能化修饰 | 第19-21页 |
| 1.3.1.1 末端残基特异性修饰 | 第20-21页 |
| 1.3.1.2 位点特异性修饰 | 第21页 |
| 1.3.2 聚糖的生物功能化修饰 | 第21-22页 |
| 1.3.3 脂质生物功能化修饰 | 第22-23页 |
| 1.3.4 核酸标记 | 第23-24页 |
| 1.4 课题研究的内容及意义 | 第24-27页 |
| 1.4.1 研究内容 | 第24-25页 |
| 1.4.2 研究意义 | 第25-27页 |
| 第2章 实验部分 | 第27-36页 |
| 2.1 实验材料、试剂与仪器 | 第27-28页 |
| 2.2 实验操作 | 第28-36页 |
| 2.2.1 细胞的培养 | 第28-29页 |
| 2.2.1.1 CAL-7 细胞的传代 | 第28页 |
| 2.2.1.2 CAL-27 细胞的冻存与复苏 | 第28-29页 |
| 2.2.2 炔基胆碱及叠氮甲硫氨酸对CAL-27 细胞的功能化修饰及毒性检测 | 第29-30页 |
| 2.2.2.1 CCK-8 试剂盒检测炔基胆碱及叠氮甲硫氨酸对CAL-27 细胞的毒性 | 第29-30页 |
| 2.2.2.2 炔基胆碱及叠氮甲硫氨酸对CAL-27 细胞的功能化修饰 | 第30页 |
| 2.2.2.3 CAL-27 细胞的双功能化修饰及验证 | 第30页 |
| 2.2.3 微粒体的获取与分离纯化 | 第30-31页 |
| 2.2.3.1 刺激CAL-27 细胞分泌微粒体 | 第30-31页 |
| 2.2.3.2 微粒体的分离纯化 | 第31页 |
| 2.2.4 微粒体的电镜观察 | 第31页 |
| 2.2.5 包被玻片 | 第31-32页 |
| 2.2.6 微粒体的功能化修饰验证 | 第32-33页 |
| 2.2.6.1 微粒体的玻片荧光共定位 | 第32-33页 |
| 2.2.6.2 流式检测微粒体的功能化修饰 | 第33页 |
| 2.2.7 抗体的DBCO化修饰与验证 | 第33-34页 |
| 2.2.7.1 抗体的DBCO化修饰 | 第33页 |
| 2.2.7.2 抗体的DBCO化验证 | 第33-34页 |
| 2.2.7.3 DBCO化的抗体功能完整性验证 | 第34页 |
| 2.2.8 双功能化修饰的微粒体与DBCO化的抗体连接 | 第34-35页 |
| 2.2.9 带有抗体的微粒体以及紫杉醇毒性检测 | 第35页 |
| 2.2.10 微粒体载药进行治疗 | 第35-36页 |
| 2.9.10.1 微粒体载药 | 第35页 |
| 2.9.10.2 微粒体载药 | 第35-36页 |
| 3 微粒体的功能化修饰及靶向给药 | 第36-49页 |
| 3.1 结果与讨论 | 第36-47页 |
| 3.1.1 炔基胆碱或者叠氮甲硫氨酸标记CAL-27 细胞 | 第37-38页 |
| 3.1.2 炔基胆碱以及AHA对CAL-27 细胞活性的影响 | 第38-39页 |
| 3.1.3 利用PCho和AHA对CAL-7 进行双功能基团标记 | 第39页 |
| 3.1.4 微粒体及功能化修饰微粒体的形态结构 | 第39-40页 |
| 3.1.5 炔基化或叠氮化修饰微粒体的荧光标记 | 第40-43页 |
| 3.1.6 基于具有双功能化修饰的微粒体与抗体连接及靶向给药 | 第43-47页 |
| 3.1.6.1 MCF-7 抗体的DBCO化修饰 | 第43-44页 |
| 3.1.6.2 抗体成功DBCO修饰的验证 | 第44-45页 |
| 3.1.6.3 DBCO化修饰不影响MCF-7 抗体的功能验证 | 第45-46页 |
| 3.1.6.4 紫杉醇及抗体化修饰微粒体的毒性测定 | 第46页 |
| 3.1.6.5 抗体化修饰的微粒体的载药 | 第46-47页 |
| 3.1.6.6 载药杀伤细胞实验 | 第47页 |
| 3.2 小结 | 第47-49页 |
| 结论与展望 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 攻读学位期间发表论文与研究成果清单 | 第64页 |
