| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 引言 | 第15-22页 |
| 1.1 激发子的研究现状 | 第15-16页 |
| 1.2 激发子诱导植物免疫反应模式 | 第16-17页 |
| 1.3 激发子诱导植物获得抗病性的机制 | 第17-18页 |
| 1.4 细胞壁降解酶类激发子的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.5 ITRAQ技术 | 第19页 |
| 1.6 灰葡萄孢菌与植物互作特性 | 第19-20页 |
| 1.7 BCGS1研究背景 | 第20页 |
| 1.8 研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 1.9 技术路线 | 第21-22页 |
| 第二章 BcGs1诱导番茄对灰霉病的抗病性 | 第22-26页 |
| 2.1 实验材料 | 第22页 |
| 2.1.1 试验菌株 | 第22页 |
| 2.1.2 实验仪器与试剂 | 第22页 |
| 2.1.3 数据分析工具与方法 | 第22页 |
| 2.2 蛋白 BcGs1 的制备与活性检测 | 第22-23页 |
| 2.3 蛋白浓度检测 | 第23页 |
| 2.4 BCGS1诱导番茄对灰葡萄孢菌的抗性测定 | 第23页 |
| 2.5 结果与分析 | 第23-25页 |
| 2.5.1 BcGs1蛋白纯化与活性检测 | 第23-24页 |
| 2.5.2 BcGs1诱导番茄抗病性最佳诱导时间 | 第24-25页 |
| 2.6 结果与讨论 | 第25-26页 |
| 第三章 蛋白BcGs1的糖苷酶活性及功能域鉴定 | 第26-39页 |
| 3.1 实验材料 | 第26-27页 |
| 3.1.1 仪器和试剂 | 第26页 |
| 3.1.2 菌株与载体 | 第26-27页 |
| 3.1.3 培养基与试剂配方 | 第27页 |
| 3.2 实验方法 | 第27-33页 |
| 3.2.1 BcGs1酶活性检测 | 第27页 |
| 3.2.2 葡萄糖标准曲线的绘制 | 第27-28页 |
| 3.2.3 BcGs1蛋白的酶活性测定 | 第28页 |
| 3.2.4 瞬时表达载体的构建 | 第28-31页 |
| 3.2.5 原核表达体系的构建 | 第31-33页 |
| 3.3 结果与分析 | 第33-38页 |
| 3.3.1 蛋白BcGs1酶活性检测 | 第33-34页 |
| 3.3.2 构建了蛋白BcGs1、GH15、CBM20的瞬时表达载体 | 第34-35页 |
| 3.3.3 不同蛋白瞬时表达与Western blot验证 | 第35-36页 |
| 3.3.4 成功构建pET-30a-GH15原核表达载体 | 第36页 |
| 3.3.5 蛋白GH15表达纯化和Western blot检测 | 第36-37页 |
| 3.3.6 GH15蛋白活性检测 | 第37-38页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第38-39页 |
| 第四章 BcGs1诱导番茄抗病性的蛋白质组学分析 | 第39-50页 |
| 4.1 实验材料 | 第39-40页 |
| 4.1.1 供试植株 | 第39页 |
| 4.1.2 仪器与试剂 | 第39页 |
| 4.1.3 数据分析 | 第39-40页 |
| 4.2 实验方法 | 第40-43页 |
| 4.2.1 实验流程图 | 第40页 |
| 4.2.2 蛋白提取 | 第40页 |
| 4.2.3 蛋白定量检测 | 第40-41页 |
| 4.2.4 蛋白SDS-PAGE电泳 | 第41页 |
| 4.2.5 蛋白Trypsin酶解 | 第41页 |
| 4.2.6 肽段标记和等量混合 | 第41页 |
| 4.2.7 蛋白highPH-RP分级 | 第41-42页 |
| 4.2.8 蛋白质谱分析 | 第42页 |
| 4.2.9 数据分析 | 第42-43页 |
| 4.3 结果与分析 | 第43-48页 |
| 4.3.1 蛋白定量分析 | 第43页 |
| 4.3.2 常规HPLC分离 | 第43页 |
| 4.3.4 蛋白质鉴定结果 | 第43-44页 |
| 4.3.5 定量差异蛋白分析 | 第44-46页 |
| 4.3.6 GO功能富集分析 | 第46-47页 |
| 4.3.7 KEGG代谢通路分析 | 第47-48页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 BcGs1诱导番茄抗病差异蛋白基因转录表达分析及防御物质积累 | 第50-60页 |
| 5.1 实验材料 | 第50页 |
| 5.1.1 供试植株 | 第50页 |
| 5.1.2 仪器与试剂 | 第50页 |
| 5.1.3 分析与设计软件 | 第50页 |
| 5.2 实验方法 | 第50-52页 |
| 5.2.1 特异性引物设计 | 第50-51页 |
| 5.2.2 BcGs1处理番茄植株 | 第51页 |
| 5.2.3 BcGs1处理番茄样品总RNA提取 | 第51-52页 |
| 5.2.4 cDNA第一链的合成 | 第52页 |
| 5.2.5 目的基因qPCR扩增 | 第52页 |
| 5.2.6 荧光定量PCR结果分析 | 第52页 |
| 5.3 早期防御反应检测 | 第52-54页 |
| 5.3.1 H2O2生成及含量检测 | 第52-53页 |
| 5.3.2 BcGs1诱导的关键酶PAL和POD含量检测 | 第53页 |
| 5.3.3 BcGs1诱导番茄木质素生成 | 第53-54页 |
| 5.4 结果与分析 | 第54-58页 |
| 5.4.1 番茄样品总RNA提取 | 第54页 |
| 5.4.2 BcGs1诱导番茄抗性差异蛋白相关基因转录分析 | 第54-55页 |
| 5.4.3 BcGs1诱导番茄叶片H2O2积累 | 第55-56页 |
| 5.4.4 BCGS1诱导番茄组织中防御关键酶的活性 | 第56-57页 |
| 5.4.5 BcGs1诱导番茄细胞木质素积累 | 第57页 |
| 5.4.6 BcGs1诱导番茄细胞壁增厚 | 第57-58页 |
| 5.5 小结与讨论 | 第58-60页 |
| 第六章 全文结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者简历 | 第68页 |
