| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 前言 | 第9-18页 |
| 1.1 植物花色素苷生物合成研究进展 | 第9-13页 |
| 1.1.2 花色素苷及其生物合成途径 | 第9-10页 |
| 1.1.3 花色素苷生物合成途径中MYB类转录因子的研究 | 第10-13页 |
| 1.2 基因枪法介导的瞬时表达 | 第13-16页 |
| 1.2.1 基因枪法 | 第13-14页 |
| 1.2.2 影响转化效率的因素 | 第14页 |
| 1.2.3 基因枪法的优缺点 | 第14-15页 |
| 1.2.4 基因枪法的应用 | 第15-16页 |
| 1.3 三色堇花色形成研究进展 | 第16页 |
| 1.4 研究目的及意义 | 第16-17页 |
| 1.5 技术路线 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-20页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第18页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第18-19页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第19页 |
| 2.1.4 培养基 | 第19页 |
| 2.1.5 菌种与载体 | 第19-20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-31页 |
| 2.2.1 三色堇花瓣总RNA提取 | 第20页 |
| 2.2.2 转录组测序 | 第20页 |
| 2.2.3 三色堇MYB基因的Real-time PCR分析 | 第20-22页 |
| 2.2.4 三色堇花瓣MYB基因的克隆 | 第22-27页 |
| 2.2.5 三色堇MYB基因生物信息学分析 | 第27页 |
| 2.2.6 基因枪法介导MYB基因的瞬时表达 | 第27-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-48页 |
| 3.1 三色堇花瓣总RNA提取 | 第31-32页 |
| 3.2 转录组分析 | 第32-34页 |
| 3.2.1 总RNA质量检测 | 第32页 |
| 3.2.2 转录组测序结果 | 第32-34页 |
| 3.3 三色堇MYB基因的Real-time PCR分析 | 第34页 |
| 3.4 MYB基因的克隆 | 第34-36页 |
| 3.4.1 三色堇MYB基因3'RACE扩增结果 | 第34-35页 |
| 3.4.2 三色堇MYB基因5'RACE扩增结果 | 第35页 |
| 3.4.3 三色堇MYB基因全长扩增 | 第35-36页 |
| 3.5 三色堇MYB基因生物信息学分析 | 第36-44页 |
| 3.5.1 三色堇MYB8序列分析 | 第36-40页 |
| 3.5.2 三色堇MYB29序列分析 | 第40-44页 |
| 3.5.3 三色堇MYB基因编码氨基酸序列聚类分析 | 第44页 |
| 3.6 基因枪法介导MYB29基因的瞬时表达 | 第44-48页 |
| 3.6.1 质粒提取 | 第44-45页 |
| 3.6.2 双酶切 | 第45页 |
| 3.6.3 重组质粒的鉴定 | 第45-46页 |
| 3.6.4 重组质粒图谱 | 第46页 |
| 3.6.5 转化材料的观察 | 第46-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| 4.1 三色堇花瓣总RNA提取问题 | 第48页 |
| 4.2 转录组测序分析 | 第48页 |
| 4.3 基因枪瞬时表达 | 第48-49页 |
| 4.3.1 微弹制备 | 第48-49页 |
| 4.3.2 轰击参数 | 第49页 |
| 4.3.3 荧光显微镜观察 | 第49页 |
| 4.4 三色堇MYB基因影响花色形成机理推测 | 第49-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 6 展望 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 论文发表情况 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
