摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
目录 | 第6-8页 |
前言 | 第8-10页 |
1 材料与方法 | 第10-26页 |
1.1 实验试剂 | 第10-11页 |
1.2 实验仪器 | 第11-12页 |
1.3 主要溶液的配制 | 第12-13页 |
1.4 引物设计 | 第13-15页 |
1.6 TA 克隆 | 第15-18页 |
1.6.1 PCR 产物纯化(胶回收法) | 第15-16页 |
1.6.2 克隆 | 第16页 |
1.6.3 转化 | 第16-17页 |
1.6.4 筛选 | 第17页 |
1.6.5 质粒提取 | 第17-18页 |
1.6.6 酶切鉴定 | 第18页 |
1.6.7 测序鉴定 | 第18页 |
1.7 质粒重组 | 第18-21页 |
1.7.1 酶切重组质粒及载体 | 第18-19页 |
1.7.2 目的片段与载体重组连接 | 第19页 |
1.7.3 连接产物转化 | 第19-20页 |
1.7.4 筛选 | 第20页 |
1.7.5 重组质粒 SPAG6/PGBKT7 提取 | 第20-21页 |
1.7.6 Spag6/PBGKT7 重组质粒的酶切鉴定 | 第21页 |
1.8 Yeast-2-Hybriy 实验 | 第21-24页 |
1.8.1 酵母感受态细胞的制备 | 第21-22页 |
1.8.2 酵母感受态细胞质粒 DNA 转化 | 第22-23页 |
1.8.3 酵母双杂交 | 第23-24页 |
1.9 酵母质粒筛选 | 第24页 |
1.10 酵母质粒提取 | 第24-25页 |
1.11 酵母质粒的鉴定 | 第25-26页 |
2 结果 | 第26-35页 |
2.1 小鼠的 SPAG6 碱基序列 | 第26-27页 |
2.2 小鼠 SPAG6 的 PCR 结果 | 第27-28页 |
2.3 TA 克隆连接产物酶切鉴定结果 | 第28-29页 |
2.4 SPAG6 质粒测序结果 | 第29-31页 |
2.5 克隆质粒 SPAG6 及载体质粒 PGBKT7 酶切结果 | 第31-32页 |
2.6 SPAG6/PGBKT7 重组质粒酶切结果 | 第32-33页 |
2.7 酵母质粒测序图部分结果截图 | 第33-34页 |
2.8 酵母质粒测序分析后部分结果 | 第34-35页 |
3 讨论 | 第35-38页 |
4 结论与展望 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
综述 | 第46-54页 |
参考文献 | 第51-54页 |
附录 1 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第54-55页 |
附录 2 攻读硕士学位期间参加的科研项目 | 第55-56页 |
附录 3 质粒及载体质粒图谱 | 第56-58页 |