| 摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 缩略语 | 第14-15页 |
| 文献综述 | 第15-29页 |
| 一、植物细胞离子通道 | 第15-22页 |
| 1 细胞膜离子通道 | 第15-16页 |
| 1.1 离子通道的定义 | 第15页 |
| 1.2 离子通道的特性 | 第15-16页 |
| 1.2.1 选择性 | 第15页 |
| 1.2.2 门控特性 | 第15-16页 |
| 2 植物细胞离子通道 | 第16页 |
| 3 植物环核苷酸门控通道基因的功能及其调控 | 第16-22页 |
| 3.1 植物CNGC基因的克隆 | 第17页 |
| 3.2 植物CNGC离子选择特性 | 第17-19页 |
| 3.3 植物CNGC的调控 | 第19页 |
| 3.4 植物CNGC的生物学功能 | 第19-21页 |
| 3.4.1 植物CNGC与植物细胞重金属胁迫 | 第19-20页 |
| 3.4.2 植物CNGC与植物细胞离子动态平衡 | 第20页 |
| 3.4.3 植物CNGC与植物抗病反应 | 第20页 |
| 3.4.4 植物CNGC与植物生长发育 | 第20-21页 |
| 3.5 展望 | 第21-22页 |
| 二、花粉管生长过程的钙信号转导 | 第22-28页 |
| 1 花粉管尖端[Ca~(2+)]_(cyt)梯度与[Ca~(2+)]_(cyt)振荡 | 第22-23页 |
| 2 花粉细胞膜Ca~(2+)转运体 | 第23-24页 |
| 3 花粉管[Ca~(2+)]_(cyt)与微丝、ROP蛋白的关系 | 第24-25页 |
| 4 花粉管[Ca~(2+)]_(cyt)与蛋白激酶 | 第25页 |
| 5 以罂粟科植物自交不亲和性为例简述[Ca~(2+)]_(cyt)对花粉管生长的调控 | 第25-28页 |
| 5.1 胞内自由钙的改变 | 第26页 |
| 5.2 自交不亲和反应中的磷酸化的级联反应 | 第26-28页 |
| 5.2.1 P_(26)：一种磷酸化的无机焦磷酸酶 | 第26-27页 |
| 5.2.2 一种MAPK在SI反应中被激活 | 第27页 |
| 5.2.3 细胞程序化死亡(PCD)的证据 | 第27-28页 |
| 三、本研究拟解决的科学问题及意义 | 第28-29页 |
| 第一章 梨花粉超极化激活钙通道活性与花粉发育的关系 | 第29-39页 |
| 1 材料与方法 | 第30-31页 |
| 1.1 生物材料 | 第30页 |
| 1.2 生化试剂 | 第30页 |
| 1.3 花粉培养 | 第30页 |
| 1.4 花粉及花粉管原生质体的分离 | 第30-31页 |
| 1.4.1 花粉原生质体的分离 | 第30页 |
| 1.4.2 花粉管原生质体的分离 | 第30-31页 |
| 1.5 膜片钳实验 | 第31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-37页 |
| 2.1 花粉和花粉管原生质体超极化激活的钙通道的特性 | 第31-34页 |
| 2.2 不同花龄花粉原生质体钙通道活性比较 | 第34-36页 |
| 2.3 预水合对梨花粉超极化激活的钙通道活性的影响 | 第36页 |
| 2.4 不同长度花粉管的质膜超极化激活钙通道活性 | 第36-37页 |
| 3 讨论 | 第37-39页 |
| 第二章 cAMP对梨花粉管质膜超极化激活的钙通道的调控 | 第39-49页 |
| 1 材料与方法 | 第40页 |
| 1.1 试验材料 | 第40页 |
| 1.2 试验方法 | 第40页 |
| 1.2.1 分离花粉管原生质体 | 第40页 |
| 1.2.2 膜片钳试验 | 第40页 |
| 2 结果与分析 | 第40-47页 |
| 2.1 cAMP激活梨花粉管钙电流 | 第40-42页 |
| 2.2 cAMP激活梨花粉管钙通道的离子选择性 | 第42-44页 |
| 2.3 cAMP激活梨花粉管钙通道的特异性 | 第44-45页 |
| 2.4 cAMP激活梨花粉管钙通道受胞内自由钙浓度调控 | 第45-47页 |
| 2.5 cAMP激活梨花粉管钙通道与细胞质ATP的关系 | 第47页 |
| 3 讨论 | 第47-49页 |
| 第三章 亚精胺对梨花粉管钙通道活性与花粉管生长的调控作用 | 第49-79页 |
| 第一节 亚精胺激活梨花粉管超极化激活钙通道 | 第49-63页 |
| 1 材料与方法 | 第50-51页 |
| 1.1 生物材料 | 第50页 |
| 1.2 生化试剂 | 第50页 |
| 1.3 花粉培养 | 第50页 |
| 1.4 MGBG抑制剂实验和花粉管免疫荧光观察 | 第50页 |
| 1.5 花粉管原生质体的分离 | 第50页 |
| 1.6 梨花粉和花粉管原生质体过氧化氢的检测 | 第50-51页 |
| 1.7 花粉中自由钙浓度的测定 | 第51页 |
| 1.8 膜片钳实验 | 第51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-63页 |
| 2.1 精胺对梨花粉管生长的调控作用 | 第51-53页 |
| 2.2 外源亚精胺增加了花粉胞内[Ca~(2+)]_(cyt)的浓度 | 第53-54页 |
| 2.3 外源亚精胺对花粉管超极化激活钙通道活性的影响 | 第54-56页 |
| 2.4 精胺激活的梨花粉管离子通道特性鉴定 | 第56-57页 |
| 2.5 外源亚精胺间接激活梨花粉管质膜钙通道 | 第57-58页 |
| 2.6 外源亚精胺增加梨花粉管活性氧(ROS) | 第58-59页 |
| 2.7 过氧化氢激活梨花粉管质膜钙电流 | 第59-61页 |
| 2.8 过氧化氢介导外源亚精胺对花粉管超极化激活的钙通道的调控作用 | 第61-63页 |
| 第二节 亚精胺通过多胺氧化酶调控花粉管生长的遗传学验证 | 第63-79页 |
| 1 材料与方法 | 第63-64页 |
| 1.1 拟南芥Atpao3突变体 | 第63页 |
| 1.2 花粉培养 | 第63页 |
| 1.3 花粉原生质体提取 | 第63页 |
| 1.4 花粉管过氧化氢的检测 | 第63-64页 |
| 1.5 花粉中自由钙浓度的测定 | 第64页 |
| 1.6 角果的形态学分析 | 第64页 |
| 1.7 膜片钳实验 | 第64页 |
| 2 结果与分析 | 第64-73页 |
| 2.1 精胺调控了花粉管的生长 | 第64-65页 |
| 2.2 外源亚精胺增加了花粉胞内[Ca~(2+)]_(cyt)的浓度 | 第65-68页 |
| 2.3 外源亚精胺增加梨花粉管活性氧(ROS) | 第68页 |
| 2.4 精胺对拟南芥花粉管作用的遗传学验证 | 第68-73页 |
| 3 讨论 | 第73-79页 |
| 第四章 花粉管质膜钙通道介导鞘胺醇-1-磷酸对花粉管生长的调控 | 第79-89页 |
| 1 材料和方法 | 第80页 |
| 1.1 生物材料 | 第80页 |
| 1.2 生化试剂 | 第80页 |
| 1.3 花粉培养 | 第80页 |
| 1.4 花粉及花粉管原生质体的分离 | 第80页 |
| 1.5 膜片钳实验 | 第80页 |
| 2 结果与分析 | 第80-86页 |
| 2.1 S1P对花粉管生长的调控 | 第81-83页 |
| 2.2 S1P增强质膜超极化激活的钙通道电流 | 第83-84页 |
| 2.3 异三聚体G蛋白介导S1P激活质膜钙通道 | 第84-86页 |
| 3 讨论 | 第86-89页 |
| 第五章 血红素与其代谢产物—氧化碳对梨花粉管胞内自由钙激活的外向钾通道的调控 | 第89-103页 |
| 1 材料与方法 | 第90-91页 |
| 1.1 试验材料 | 第90页 |
| 1.2 试验方法 | 第90-91页 |
| 1.2.1 分离花粉管原生质体 | 第90页 |
| 1.2.2 膜片钳试验 | 第90-91页 |
| 2 结果与分析 | 第91-99页 |
| 2.1 梨花粉管外向钾通道的鉴定 | 第91-94页 |
| 2.2 红素对外向钾通道的影响 | 第94-96页 |
| 2.3 NADPH与血红素对外向钾通道活性影响的协同作用 | 第96-97页 |
| 2.4 一氧化碳对外向钾电流的影响 | 第97-99页 |
| 3 讨论 | 第99-103页 |
| 第六章 低温诱导花粉质膜钙和钾通道活性的变化 | 第103-111页 |
| 1 材料与方法 | 第103-104页 |
| 1.1 生物材料 | 第103页 |
| 1.2 花粉培养 | 第103页 |
| 1.3 花粉原生质体提取 | 第103-104页 |
| 1.4 花粉中自由Ca~(2+)浓度的测定 | 第104页 |
| 1.5 膜片钳实验 | 第104页 |
| 2 结果与分析 | 第104-108页 |
| 2.1 低温显著影响花粉管生长速率 | 第104页 |
| 2.2 低温增加花粉胞内钙浓度 | 第104-107页 |
| 2.3 微丝调控低温胁迫下的钙、钾电流 | 第107-108页 |
| 3 讨论 | 第108-111页 |
| 综合讨论 | 第111-117页 |
| 1 花粉质膜超极化激活的钙通道活性与花粉发育程度相关 | 第111页 |
| 2 花粉管钙通道活性的调控 | 第111-114页 |
| 2.1 cAMP直接激活钙通道 | 第111-112页 |
| 2.2 亚精胺通过过氧化氢激活钙通道 | 第112-113页 |
| 2.3 鞘胺醇-1-磷酸通过花粉质膜异三聚体G蛋白激活钙通道 | 第113-114页 |
| 3 花粉管胞内钙与花粉管外向钾通道的关系 | 第114-115页 |
| 4 花粉管胞内钙浓度与低温的关系 | 第115-117页 |
| 全文结论 | 第117-119页 |
| 创新点 | 第119-121页 |
| 参考文献 | 第121-139页 |
| 致谢 | 第139-141页 |
| 发表文章 | 第141页 |
