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红掌花青素合成途径相关基因的克隆与分析

摘要第4-5页
Abstract第5页
1 序言第9-19页
    1.1 红掌的研究进展第9页
    1.2 花青素的研究进展第9-12页
        1.2.1 花青素的生物合成途径第9-11页
        1.2.2 花青素基因工程概况第11-12页
    1.3 红掌花青素生物合成途径6个相关基因的研究第12-14页
    1.4 植物基因克隆技术分析第14-16页
        1.4.1 同源序列克隆第15页
        1.4.2 功能克隆第15页
        1.4.3 定位克隆第15-16页
        1.4.4 cDNA末端快速扩增技术第16页
    1.5 基因表达技术分析技术第16-18页
        1.5.1 Northern印迹第17页
        1.5.2 核糖核酸酶保护试验第17-18页
        1.5.3 RT-PCR第18页
    1.6 本研究的意义第18-19页
    1.7 技术路线图第19页
2 不同品种红掌颜色观察与比较第19-21页
    2.1 材料与方法第19页
    2.2 结果与分析第19-20页
        2.2.1 佛焰苞的比较第19页
        2.2.2 叶片的比较第19-20页
    2.3 小结第20-21页
3 花青素含量的测定与比较第21-22页
    3.1 材料与方法第21页
        3.1.1 植物材料第21页
        3.1.2 花青素提取及测定第21页
    3.2 结果与分析第21-22页
    3.3 小结第22页
4 红掌花青素合成6个相关基因全长cDNA的分离第22-44页
    4.1 植物材料第22页
    4.2 菌株和载体第22页
    4.3 培养基第22-23页
    4.4 试剂盒和主要试剂第23页
    4.5 引物第23-24页
        4.5.1 相关基因RACE特异引物第23-24页
        4.5.2 全长cDNA PCR特异引物第24页
    4.6 方法第24-31页
        4.6.1 RNA的提取及检测第24-25页
        4.6.2 3’RACE和5’RACE第一链cDNA的合成第25-26页
        4.6.3 合成全长cDNA PCR模板第26-27页
        4.6.4 3’和5’RACE PCR扩增第27-28页
        4.6.5 RACE扩增产物检测第28页
        4.6.6 T/A克隆与测序第28-30页
        4.6.7 全长cDNA PCR及检测第30-31页
    4.7 生物信息学分析工具第31-32页
    4.8 结果与分析第32-38页
        4.8.1 RNA定性与定量分析第32页
        4.8.2 cDNA全长序列拼接第32-38页
    4.9 生物信息学分析第38-43页
        4.9.1 开放阅读框(ORF)第38页
        4.9.2 NCBI Blastn第38-39页
        4.9.3 NCBI Blastp第39-41页
        4.9.4 基因预测第41-43页
        4.9.5 结构域预测第43页
    4.10 小结第43-44页
5 花青素合成相关6个基因的表达分析第44-49页
    5.1 植物材料第44页
    5.2 引物第44页
    5.3 方法第44-45页
        5.3.1 RNA的提取及检测第44页
        5.3.2 内参β-actin的选择与半定量RT-PCR引物设计第44-45页
        5.3.3 cDNA模板的合成第45页
        5.3.4 PCR反应第45页
    5.4 结果与分析第45-48页
        5.4.1 RNA定性与定量分析第45-46页
        5.4.2 β-actin片段的确定第46-47页
        5.4.3 半定量RT-PCR结果分析第47-48页
    5.5 小结第48-49页
6 结论第49页
7 讨论第49-52页
    7.1 红掌佛焰苞颜色、花青素含量及花青素合成相关基因表达分析的比较第49-50页
    7.2 实验中应注意的问题第50页
    7.3 下一步研究设想第50-52页
附:彩图板第52-59页
参考文献第59-65页
致谢第65页

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